枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐生长性能和粪便中细菌数量的影响

宗文丽，郭亮，邓露芳，辛娜，王冬冬

（北京三元种业科技股份有限公司饲料分公司，北京 101105）

北极狐（Alopex lagopus）属于食肉目（Carnivoraes）犬科（Canidae）动物，产于亚欧北部、北美北部和南美洲南部，20 世纪50 年代从苏联引种至我国[1]。目前我国养殖区主要分布在黑龙江、内蒙古、辽宁、吉林、山东及河北等地区。益生菌和植物提取物具有天然无毒副作用、无耐药性、无残留和无环境污染等特点[2,3]，一直是饲料领域研究热点。自2013 年国家批准35 种益生菌，12 种植物提取物进入饲料添加剂目录，枯草芽孢杆菌和牛至提取物——牛至香酚也在其中。枯草芽孢杆菌和牛至提取物可以抑制畜禽肠道中的大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌等常见的有害菌，增加乳酸菌数量[4-6]。Ma 等[7]研究表明枯草芽孢杆菌能显著提高肉鸡的平均体重、平均日采食量和平均日增重。黄其春等[8]研究发现日粮中添加500 mg/kg 牛至提取物可提高生长育肥猪生长性能，改善肉品质和风味。但目前，北极狐日粮中枯草芽孢杆菌和牛至提取物联合使用，对其生产性能影响的研究少见报道。本试验在北极狐日粮中添加不同水平的枯草芽孢杆菌和牛至提取物组合，研究其对北极狐生长性能和粪便中细菌数量的影响，以期获得适宜的添加量，可为其在实践生产中应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）≥2.0×1010CFU/g，为山东蔚蓝生物科技有限公司生产；牛至提取物：牛至香酚≥10%，山东鲁西兽药股份有限公司生产；金霉素≥10%，为内蒙古金河动物药业有限公司生产。

1.2 基础日粮

北极狐试验用基础日粮组成及营养成分含量，见表1。

表1 北极狐试验基础日粮组成及营养成分含量Table 1 Compsition and nutrient content of the basal diet for arctic fox

1.3 试验动物与设计

试验在河北省秦皇岛市抚宁区某狐貉养殖场进行，试验采用双因素3×3 随机试验设计，选取60 日龄体重相近，精神状态良好，健康的北极狐240 只，随机分成10 个处理，每个处理设4 个重复，每个重复6只，公母比例1:1。试验从7 月5 日开始，预试期5 d，正试期25 d。试验组添加剂含量，见表2。

表2 试验组添加剂添加量Table 2 Amount of additives added in the test groups

1.4 饲养管理

饲养管理按养殖场日常管理进行，试验北极狐饲喂干粉状配合饲料，饲喂前用4 倍水浸泡10 min，搅拌均匀后饲喂，每天饲喂3 次，自由饮水。每天清理粪便1 次，食盒每天清洗1 次，每周用0.08%高锰酸钾溶液消毒2 次。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 生长性能的测定－试验开始和结束，空腹称重，记录始末体重；按重复记录采食量和腹泻只数；记录北极狐试验始末时间。计算平均日采食量、平均日增重、料重比和腹泻率等。

1.5.2 粪便中细菌的测定－在试验结束前3d，每天早晨每个处理随机取5 只北极狐新鲜粪便样品，混合均匀，80℃保存。大肠杆菌用胆盐硫乳琼脂培养基在有氧条件下培养，乳酸杆菌用琼脂培养基在厌氧条件下培养，结果以每克粪便中含有微生物数量的对数值［lg(CFU/g)］表示。

1.6 数据分析

试验数据用Excel 2013 进行初步整理后，利用SPSS 26.0 软件一般线性模型（GLM）进行方差分析，Duncan氏法进行多重比较。试验结果用“平均值±标准差（mean±SD）”表示，P ＜0.05 表示差异显著，P ＜0.01 表示差异极显著，P ＞0.05 表示差异不显著。

2 结果与分析

2.1 枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐生长性能的影响

试验中枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐生长性能影响的统计分析结果，见表3。

表3 枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐生长性能的影响Table 3 Effect of and extracts on the growth performance of arctic fox

表3 枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐生长性能的影响Table 3 Effect of and extracts on the growth performance of arctic fox

注：同列数据肩标相同小写字母表示差异不显著（P ＞0.05），不同小写字母表示差异显著（P ＜0.05），不同大写字母表示差异极显著（P ＜0.01），下表同。Note:The same lowercase letters in the same column data indicate there was no significant difference (P ＞0.05),different lowercase letters indicate there was significant difference(P ＜0.05),and different upercase letters indicate there was very significant difference(P ＜0.01).The following table is the same.

各试验组初始体重相近。对于末体重，枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和牛至提取物交互作用影响差异极显著，牛至提取物影响差异显著；试验组Ⅴ、Ⅶ分别比对照组高2.24%、1.55%（P ＜0.01），试验组Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ与对照组比差异不显著。对于平均日增重，牛至提取物影响差异显著，枯草芽孢杆菌和牛至提取物交互作用影响差异极显著；试验组Ⅴ、Ⅶ分别比对照组高4.43%、3.53%（P ＜0.05）；试验组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ与对照组比差异不显著。对于平均日采食量，枯草芽孢杆菌、牛至提取物及枯草芽孢杆菌和牛至提取物交互作用影响差异不显著，试验各组与对照组比差异不显著。对于料重比，枯草芽孢杆菌影响差异不显著，牛至提取物及枯草芽孢杆菌和牛至提取物交互作用影响差异极显著；试验组Ⅴ与对照组比差异显著，试验组Ⅴ比对照组低4.01%；试验组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ和Ⅶ与对照组差异不显著。对于腹泻率，枯草芽孢杆菌和牛至提取物影响差异不显著，枯草芽孢杆菌和牛至提取物交互作用影响差异极显著；试验组Ⅲ、Ⅴ和Ⅶ分别比对照组低6.38%、6.49%和6.60%（P ＜0.01）。

2.2 枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐粪便中细菌数量的影响

试验中枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐粪便中细菌数量影响的统计分析结果，见表4。

表4 枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐粪便中细菌数量的影响Table 4 Effect of and extracts on numbers of bacteria in the feces of arctic fox [lg]

表4 枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐粪便中细菌数量的影响Table 4 Effect of and extracts on numbers of bacteria in the feces of arctic fox [lg]

对于粪便中细菌总数，枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和牛至提取物交互作用影响差异不显著，牛至提取物影响差异极显著；试验组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ和Ⅸ与对照组比差异不显著。对于乳酸菌数量，枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和牛至提取物交互作用影响差异不显著，但枯草芽孢杆菌有先增后降的趋势；试验组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ和Ⅷ与对照组比差异不显著；试验组Ⅱ比对照组高7.35%，实验组Ⅵ比对照组低7.69%（P＜0.05）；试验组Ⅰ、Ⅸ分别比对照组高8.63%、10.30%（P ＜0.01）。对于粪便中大肠杆菌数量，枯草芽孢杆菌、牛至提取物及枯草芽孢杆菌和牛至提取物交互作用影响差异极显著，试验组Ⅴ、Ⅵ与对照组比差异不显著，其他试验组均高于对照组（P ＜0.01）。对于粪便中乳酸菌与大肠杆菌比值，枯草芽孢杆菌影响差异显著，牛至提取物、枯草芽孢杆菌和牛至提取物交互作用影响差异极显著；试验组Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ与对照组比差异不显著；试验组Ⅳ比对照组低43.01%（P ＜0.05）；其他试验组均比对照组低（P ＜0.01）。

3 讨论

3.1 枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐生长性能的影响

饲用益生芽孢杆菌能够分泌多种胞外消化酶，包括淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、糖化酶、纤维素酶、木聚糖酶和肌醇六磷酸酶等，能显著改善动物肠道消化内环境，提升饲料利用率，促进生长性能[9]。枯草芽孢杆菌属于饲用益生芽孢杆菌。植物提取物的抗菌作用机制包括破坏/降解细胞壁结构、破坏细胞膜蛋白质结构、破坏细胞质膜、使细胞内容物外泄、凝聚细胞质及减弱质子运动力等[10]。牛至提取物中香芹酚和百里香酚主要作用模式是膜穿孔和膜黏合，细胞膜通透性改变和胞内物质外泄，导致重要的酶系统受到损害，从而引起微生物死亡[11]。

本试验中，末体重试验组Ⅴ比对照组高2.24%，平均日增重试验组Ⅴ和Ⅶ分别比对照组高4.43%和3.53%，平均日采食量试验各组与对照组比差异不显著，料重比试验组Ⅴ比对照组低4.01%，腹泻率试验组Ⅲ、Ⅴ和Ⅶ分别比对照组低6.38%、6.49%和6.60%。聂利芳[12]在AA 肉鸡日粮中添加牛至油可提高1～21日龄AA 肉鸡日增重和采食量，降低料重比；但对22～42 日龄AA 肉鸡采食量影响差异不显著。丁浩等[13]饲粮添加500g/t 枯草芽孢杆菌DSM32315 制剂可改善保育猪的机体氮利用和糖脂代谢相关的血浆生化参数，降低腹泻率，进而提高生长性能。蒲俊宁[14]在断奶仔猪日粮中添加苯甲酸、凝结芽孢杆菌和牛至油组合可提高仔猪的生长性能，降低腹泻率41.71%。在北极狐仔狐日粮中添加枯草芽孢杆菌和牛至提取物能够提高北极狐仔狐末体重和平均日增重，改善平均日采食量和料重比，降低腹泻率，与上述在猪鸡上的研究有相似的效果。

3.2 枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐粪便中细菌数量的影响

肠道微生物菌群结构受到多个因素的影响，宿主的遗传背景和环境共同决定着动物肠道微生物的种类和数量。环境因素尤其是饮食是肠道微生物菌群结构差异的主要影响因素[15]。本试验中，细菌总数试验组Ⅴ与对照组相比差异不显著，试验组Ⅸ粪便中乳酸菌和大肠杆菌数量最高，乳酸菌和大肠杆菌的比值也最低，试验组Ⅴ乳酸菌和大肠杆菌的比值最高，同时大肠杆菌数量最低。田跃等[16]育肥猪日粮添加100 mg/kg 和200 mg/kg 枯草芽孢杆菌可以显著降低6 周和15 周育肥猪粪便中氨气浓度和大肠杆菌数量，提高育肥猪粪便中乳酸杆菌数量。韩庆功等[17]在仔猪日粮中添加牛至油后粪便中细菌总数显著增加，但牛至油组、抗生素组之间差异不显著；大肠杆菌数量降低，乳酸杆菌、双歧杆菌的数量增加，减少断奶仔猪发生腹泻的概率。邓雨英等[18]研究发现在雪峰乌骨鸡日粮中，添加枯草芽孢杆菌和植物精油复合制剂粪便大肠杆菌数量无显著差异。韩丽等[19]在围产母猪日粮中添加枯草芽孢杆菌，母猪粪便中的乳酸杆菌/大肠杆菌呈增加趋势。本试验中，枯草芽孢杆菌和牛至提取物对北极狐仔狐粪便中细菌数量也有不同程度的影响。动物粪便菌群组成存在差异性，与动物品种、健康状态和日粮的结构等因素有关[20-22]。试验组Ⅸ粪便中乳酸菌和大肠杆菌数量同时增加，具体是由哪种原因引起的还需要进一步研究探讨。

4 结论

综上所述，试验组V 末体重、平均日增重及乳酸菌和大肠杆菌的比值最高，腹泻率比金霉素组低，粪便中大肠杆菌数最低，与腹泻率最低的试验组Ⅶ比无显著差异。由此可见，在本试验条件下北极狐日粮中牛至提取物添加量为250 mg/kg和枯草芽孢杆菌添加量为300 mg/kg 组合时，生产性能效果最好，并且优于金霉素组。