血清miR-152-3p、CK18联合D-二聚体检测在诊断肝病患者中的临床意义

程 蒙 高广林 康 迪 河南省平顶山市第二人民医院检验科 467000

肝脏为机体重要器官,是蛋白质合成的重要场所。肝脏损伤可导致机体多种血清蛋白等表达水平改变。细胞角蛋白18(CK18)是构成肝细胞骨架的主要中间丝蛋白之一,主要保护肝细胞免受各种损伤,还能调节细胞周期,其表达水平可反映感细胞损伤程度,可作为肝病发生发展的检测指标[1]。D-二聚体作为反映机体高凝状态、继发性纤溶亢进的指标,与肝病患者肝功能分级有关,在肝病进展过程中具有重要作用。微小RNA(miRNAs)为一类不编码蛋白,在调控细胞功能方面具有重要作用。基于此,本文选取我院收治的100例肝病患者进行分析,以探讨血清miR-152-3p、CK18、D-二聚体联合检测的诊断价值,从而为肝病诊断提供参考。现分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2019年2月—2022年4月收治的100例肝病患者作为研究组(慢性乙型肝炎39例,肝硬化43例,肝癌18例),另选同期94例健康体检者为对照组。研究组女41例,男59例,年龄29～75岁,平均年龄(51.67±10.14)岁,体质量指数(BMI)19.8～29.6 kg/m2,平均BMI(24.66±2.03)kg/m2;对照组女36例,男58例,年龄24～75岁,平均年龄(49.86±11.70)岁,BMI 19.8～29.6kg/m2,平均BMI(25.01±1.94)kg/m2。两组一般资料(性别、BMI、年龄)均衡可比(P>0.05)。研究经我院学术委员会、医学伦理委员会审核批准。

1.2 选择标准

1.2.1 纳入标准:研究组均符合慢性乙型肝炎[2]、肝硬化[3]、肝癌[4]相关诊断标准;认知、精神功能正常;血液系统功能正常;知情本研究,签署同意书。

1.2.2 排除标准:合并凝血及纤溶活性的疾病;其他类型病毒性肝炎;严重心、肺等脏器功能障碍;获得性免疫缺陷综合征;合并其他恶性肿瘤或恶性肿瘤肝脏转移;临床资料不完整。

1.3 方法 所有入选者于晨起后采集空腹外周静脉血,约5ml,抗凝,4 000r/min,10min,取血清,使用酶联免疫吸附法测定CK18,使用全自动血凝仪(Sysmex CA1500型)测定D-二聚体,使用全自动生化分析仪(日本日立7600型)测定天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL);使用比较CT法定量了解miR-152-3p浓度相对水平。

1.4 观察指标 (1)比较两组治疗前肝功能相关指标,包括AST、ALT、TBA、TBIL。(2)比较两组治疗前血清miR-152-3p、CK18和D-二聚体水平。(3)分析血清miR-152-3p、CK18和D-二聚体水平与肝功能指标的相关性。(4)分析肝病发生的危险因素。(5)分析血清miR-152-3p、CK18、D-二聚体联合检测对肝病的诊断价值。

2 结果

2.1 两组治疗前肝功能相关指标比较 研究组AST、ALT、TBA、TBIL水平高于对照组(P<0.05);研究组不同肝病患者AST、ALT、TBA、TBIL水平比较:肝癌患者>肝硬化患者>慢性乙型肝炎患者(P<0.05),见表1。

表1 两组肝功能相关指标比较

2.2 两组血清miR-152-3p、CK18和D-二聚体水平比较 与对照组相比,治疗前研究组血清CK18、D-二聚体较高,miR-152-3p水平较低(P<0.05);研究组不同肝病患者血清CK18、D-二聚体水平比较:肝癌患者>肝硬化患者>慢性乙型肝炎患者(P<0.05);研究组不同肝病患者血清miR-152-3p水平比较:肝癌患者<肝硬化患者<慢性乙型肝炎患者(P<0.05),见表2。

表2 两组血清miR-152-3p、CK18和D-二聚体水平比较

2.3 血清miR-152-3p、CK18和D-二聚体水平与肝功能指标的相关性 研究组患者血清CK18、D-二聚体水平与AST、ALT、TBA、TBIL指标呈正相关(P<0.05);血清miR-152-3p水平与AST、ALT、TBA、TBIL指标呈负相关(P<0.05),见表3。

表3 血清miR-152-3p、CK18和D-二聚体水平与肝功能指标相关性分析

2.4 偏回归分析影响肝病发生的危险因素 以是否发生肝病为因变量,将血清miR-152-3p、CK18、D-二聚体水平作为自变量,对自变量进行赋值(以194例的平均值为界:≤平均值=1,>平均值=2)。Logistic回归分析显示,血清miR-152-3p(≤6.96)、CK18(>138.68ng/ml)、D-二聚体(>826.10μg/L)水平是发生肝病的危险因素(P<0.05)。见表4。

表4 偏回归分析影响活动性肺结核患者疾病复发的危险因素

2.5 ROC分析血清miR-152-3p、CK18、D-二聚体联合检测对肝病的诊断价值 以发生肝病为阳性标本,以健康体检者为阴性样本,绘制ROC曲线,结果显示,血清miR-152-3p、CK18、D-二聚体联合诊断肝病的AUC为0.915,敏感度87.00%,特异度93.62%,优于三者单一诊断。见表5。

表5 ROC分析血清miR-152-3p、CK18、D-二聚体联合检测对肝病的诊断价值

3 讨论

肝病为常见消化系统疾病,具有高发生率、高死亡率的特点,主要包括肝炎、肝硬化、肝癌等。肝组织活检为临床诊断的金标准,但其属于有创检查,且价格昂贵,部分患者还需反复取材,导致临床应用受限。故而需寻找更为有效、安全的检测肝病的方法。

CK18为人类细胞角蛋白家族成员之一,呈酸性,在肝细胞损伤发生凋亡时,其可被裂解为高度凋亡特异性片段,并释放入血,可反映肝细胞受损程度。本文结果发现,肝病患者CK18呈异常表达,且肝癌患者CK18>肝硬化患者>慢性乙型肝炎患者,与郭晓会等[1]学者研究结果类似。细胞凋亡为肝脏疾病发生的重要因素。肝细胞因各种原因受损凋亡后,CK18会被降解成片段进入血液,且多个研究发现其在非酒精性脂肪性肝病、肝癌、肝硬化等肝脏疾病中显著升高[5-6]。同时,本文结果还发现,CK18与AST、ALT、TBA、TBIL指标呈正相关,提示CK18可作为生物标志物诊断肝病或预测肝病程度。

本文中,肝病患者D-二聚体高于健康体检者,且肝癌患者D-二聚体水平较肝硬化、慢性乙型肝炎患者高,随着肝病患者病情程度加重,其表达水平越高。D-二聚体为交联纤维蛋白的特异性降解产物,可引起微血栓形成、纤溶亢进,加重肝损伤,促使病情恶化[7-8]。有研究发现,D-二聚体具有较高的特异性,但准确性相对较差,联合其他指标进行诊断,能提高诊断准确性[9]。

多种miRNA可参与到癌细胞生物程序调控过程中,发挥抑癌、促癌作用,其在肿瘤疾病的诊断、治疗、预后评估中也越来越得到临床重视[10-11]。本文结果发现,肝癌患者miR-152-3p显著低于慢性乙型肝炎、肝硬化者,且表达水平与肝功能指标呈负相关,提示,miR-152-3p可参与肝病的发生发展。miR-152-3p通过调节细胞增殖、凋亡、迁移等过程,可对肝癌的发生发展产生影响。有关研究还指出,miR-152-3p通过调控靶基因AKAP1、MRPL50、STAU1、FOXRED1、MRPL28、SHC1作用于线粒体呼吸链,还能影响细胞氧化呼吸功能,促进肝癌复发[12]。

本文结果发现,血清miR-152-3p、CK18、D-二聚体联合诊断感染性肺炎的AUC、敏感度、特异度均高于三者单一诊断,提示三者联合检测用于肝病诊断具有良好的价值。

综上所述,血清miR-152-3p、CK18、D-二聚体对不同病变程度的肝病具有指导意义,联合检测能帮助临床进行诊断、鉴别,了解肝脏病变程度,对治疗、预后评估具有重要作用。