非小细胞肺癌患者癌组织和血清中SKA3、G3BP2、PROX1表达与临床治疗的关系

吴福林 吴伟乐斯

(1内蒙古民族大学附属医院胸外科,内蒙古 通辽 028000;2内蒙古科技大学包头医学院)

肺癌是呼吸系统常见的恶性肿瘤,在全球恶性肿瘤发病率和死亡率中位居首位〔1,2〕。肺癌一般可分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌,其中非小细胞肺癌是肺癌的常见类型,还包括鳞癌、腺癌和大细胞癌,占肺癌80%以上〔3,4〕。目前非小细胞肺癌发病机制尚不清楚,其首选治疗方案是手术治疗,胸腔镜微创因其创口美观、损伤小、恢复快等优势已逐步取代开胸术式。提高患者术后生存率,术后治疗、预测预后及防止复发是关键〔5〕。本文通过酶联免疫吸附试验和免疫组织化学法检测非小细胞肺癌患者癌及癌旁组织和血清中癌基因纺锤体与着丝粒相关蛋白(SKA)3、TP酶激活蛋白SH3结合蛋白(G3BP)2和Prospero相关同源异形盒蛋白(PROX)1的表达及分析其与非小细胞肺癌临床病理特征的关系,探寻非小细胞肺癌治疗的靶点及预测预后和复发的指标。

1 资料与方法

1.1临床资料 选择2019年10月至2022年8月内蒙古民族大学附属医院行微创手术的非小细胞肺癌患者102例,其中男65例,女37例;平均年龄(68.25±3.19)岁。

1.2入选标准 纳入标准:①术后经病理学检测确诊为原发性非小细胞肺癌,术中清扫淋巴结;②年龄≥65岁,可自行签署知情同意书;③均行单孔微创切除术,入院前未接受放化疗治疗。排除标准:①伴有严重心、肝、肾功能不全及脑、血液系统等疾病;②伴有其他原发性肿瘤或自身免疫性疾病;③伴有精神系统疾病或自我认知能力障碍。

1.3试剂和仪器设备 抗人的癌基因纺锤体与着丝粒相关蛋白(SKA)3、TP酶激活蛋白SH3结合蛋白(G3BP)2和Prospero相关同源异形盒蛋白(PROX)1酶联免疫试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供;抗人一抗SKA3、G3BP2、PROX1由北京博奥森生物技术有限公司提供;链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)和显色试剂盒由福州迈新生物技术有限公司提供;bioteck酶标仪(美国);Liaca石蜡切片机(德国)。

1.4非小细胞肺癌患者手术前后血清中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白含量检测 采用酶联免疫吸附试验,手术前清晨空腹和术后7 d清晨空腹抽取静脉血5 ml,3 000 r/min离心10 min后,留取上层血清液氮保存,待检测。

1.5非小细胞肺癌患者癌和癌旁组织中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白阳性表达强度检测 取非小细胞肺癌患者癌和癌旁组织,甲醛溶液固定、脱水和包埋,制备3 μm的病理切片3张,采用SP免疫组织化学染色法进行染色,染色结果通过Motic Images Advanced3.2图像分析软件测定光密度(OD)值,OD值越大阳性表达越强,反之越弱。

1.6癌组织中SKA3、G3BP2、PROX1的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系 分析SKA3、G3BP2、PROX1表达阳性率与患者组织学分型、病理分级、临床分期及淋巴结转移的关系。

1.7统计学分析 采用SPSS23.0统计学软件,计量资料均符合正态分布,组间采用t检验;计数资料采用χ2检验。

2 结 果

2.1非小细胞肺癌患者手术前后血清中SKA3、G3BP2、PROX1蛋白含量的比较 与术前比较,术后非小细胞肺癌患者血清中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白含量均显著降低(P<0.05)。见表1。

表1 非小细胞肺癌患者手术前后SKA3、G3BP2、PROX1蛋白血清中含量及癌和癌旁组织阳性表达强度的比较

2.2非小细胞肺癌患者癌和癌旁组织中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白阳性表达强度的比较 非小细胞肺癌患者癌组织中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白阳性表达强度明显高于癌旁组织(P<0.05)。见表1。

2.3SKA3、G3BP2、PROX1的阳性表达与非小细胞肺癌临床病理特征关系 不同组织学分型的非小细胞肺癌患者SKA3、G3BP2、PROX1表达差异无统计学意义(P>0.05);不同病理分型、临床分期、有无淋巴结转移的非小细胞肺癌患者SKA3、G3BP2、PROX1表达差异有统计学意义(P<0.05),且阳性表达随病理分级越低、临床分期越高及发生淋巴结转移有增高趋势。见表2。

表2 SKA3、G3BP2、PROX1阳性表达与非小细胞肺癌临床病理特征关系〔n(%)〕

3 讨 论

肺癌是全球肿瘤死亡的主要原因之一,也是致死率最高的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌占 85% 以上,治疗以手术切除为主,但大部分患者术后转移、复发及预后不良〔6,7〕。近年针对非小细胞肺癌的特异性靶向治疗取得了较大进展〔8～11〕,对非小细胞肺癌患者的全基因组筛查为不同分子分型的患者提供了个体化医学的个体化用药的治疗机会,因此寻找非小细胞肺癌的新的治疗靶向基因、预测预后和复发的基因是当下医学研究热点。

SKA3位于人类13q号染色体,是线粒体外层子单元SKA复合物,直接介导染色体两侧动粒与微管、染色体的分离与分裂及调节细胞增殖与凋亡,在肝、甲状腺、结直肠癌等肿瘤的增殖、侵袭、恶化和转移中高表达〔12,13〕。PROX1位于人类1q32号染色体,介导细胞分化、器官发育、促进淋巴管的生成,是具有高度保守性的转录调节因子,主要表达于淋巴管内皮细胞,参与新生毛细血管的生成,从而促进肿瘤的增殖、侵袭及淋巴转移〔14,15〕。G3BP2位于人类4号染色体,是RNA结合蛋白家族中Ras GAP SH3结构域特异性结合蛋白,在食管癌、膀胱癌等肿瘤中高表达,亦参与肿瘤的生长、分化、侵袭及转移〔16,17〕。

综上,SKA3、G3BP2、PROX1蛋白在肺癌发生及病情进展中均发挥重要作用,能够影响非小细胞肺癌的增殖、侵袭、转移及预后,SKA3、G3BP2、PROX1可作为关键分子标记物,有望成为非小细胞肺癌治疗的靶点及预测预后和复发的指标,为临床应用靶向基因治疗提供实验依据。