贺钰云,简莹娜,胡 勇,李秀萍,马利青*
(1.青海省天峻县畜牧兽医站, 青海 天峻 817299; 2.青海大学畜牧兽医科学院,青海 西宁 810016)
羊传染性胸膜肺炎可感染任何品种和年龄的羊群,一年四季均可发生,呈地方流行性,主要通过空气飞沫经呼吸道传播,也可以通过接触传播。该病的流行特点为发病率高,发病较隐蔽,早期从临床上不易判定,且传播速度快,一旦发病很难控制,常常导致羊群反复感染,一般预后不良,最终给养殖者造成严重损失[1]。青海省传染性胸膜肺炎血清学调查研究常用间接血凝方法(IHA),经调查发现,该病主要感染羊群包括柴达木绒山羊、小尾寒羊以及其他一些引进品羊只。近年来,随着羊只的频繁调运以及该病的不时发生,养羊业遭受了极大的经济损失。因此,对来自天峻县快尔玛乡某养殖户的病死羊只进行了实验室诊断,现报道如下。
1.1发病史调查
养殖户共养殖300余只藏系羊,均为自繁自育,2022年3月开始陆续发病,呈慢性死亡。截至5月份,累计发病31只,死亡11只。期间按照防疫要求给羊群注射过小反刍兽疫、羊四联和羊痘疫苗,同时,在年初进行过1次驱虫。羊群采取全放牧方式,母羊产羔前给予适当补饲,羊舍环境干燥且尘土较多。
1.2临床症状
主诉:发病羊群主要症状为咳嗽、发烧,无明显鼻液、脓液咳出,逐渐消瘦,直至死亡。发病羊只膘情较差,被毛杂乱,不时咳嗽,后期不思饮食、卧地不起、偶有腹泻。
1.3剖检变化
对病死羊只进行剖检,剖检变化主要为心包积液、胸腔积液;心脏肿大,心脏冠状沟脂肪有出血;肝脏正常,胆囊充盈;脾脏边缘有点状出血;肺脏气肿且实变,呈大叶性肺炎,与胸腔粘连,肺门淋巴结肿大;腹腔有大量积液;肠系膜淋巴结肿大;膀胱充盈;气管环有粘液且带血丝。
1.4样品采集
现场无菌采集病死羊的心、肝、脾、肺、肾等组织2份,置于冰盒中及时送至实验室进行检测。
1.5细菌分离培养
将组织样品无菌接种至普通营养肉汤、鲜血平板和厌气肉肝汤中,在37℃条件下培养24~48 h,然后染色镜检。
1.6绵羊肺炎支原体检测
对上述2份病料组织中的脾脏、肺脏进行组织DNA提取,利用绵羊肺炎支原体特异性引物进行PCR扩增并做琼脂糖凝胶检测,其中样品编号见表1。
2.1细菌分离培养
普通营养肉汤、鲜血平板和厌气肉肝汤培养物经染色镜检未发现可疑致病菌。
2.2绵羊肺炎支原体检测
经绵羊肺炎支原体(MO)PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测,阴性、阳性对照均成立,1#、2#羊肺脏组织以及1#脾脏组织中检测到MO特异性条带(见图1)。
图1 绵羊肺炎支原体PCR结果图
3.1综合临床症状、细菌分离培养以及绵羊肺炎支原体PCR检测结果,判定此羊群感染了绵羊肺炎支原体,从而导致了传染性胸膜肺炎。在以往的血清学调查中,青海省祁连县2011年和2014年的阳性检出率分别为31.08%和6.5%[2,3];海晏县2010年和2012年阳性检出率分别为25.45%和12.6%[4,5];河南县2015年阳性检出率为0.5%[6];天峻县2009及2010年阳性检出率分别为71.38%和57.59%[7,8]。从血清学检测结果来看,青海省牧区的藏羊群中存在绵羊肺炎支原体感染。
3.2通过调查绵羊传染性胸膜肺炎的流行情况,制定相应的防控措施,防止该病的传播蔓延是防治该病的关键,免疫接种也是预防本病的有效措施[9]。带菌或患病羊只的引入及其运输过程是造成该病传播的主要途径。因此,引进羊只运输期间应注重通风,避免羊群过于拥挤,到达后必须隔离检疫 1 个月以上,确认健康时方可混入大群。
3.3对于已确诊传染性胸膜肺炎的病例,需及时采取隔离、封锁、消毒、治疗等一系列措施;对于已受到污染的羊舍、饲养管理工具等,应使用碘制剂、百毒杀进行全面消毒;对病羊粪便做无害化处理;对于同一养殖场中的闲置圈舍,可以用20%生石灰消毒,对在此基础上再用火焰消毒[10]。
3.4对自繁自育的羊群宜按照科学的免疫程序进行免疫,疫苗首选传染性胸膜肺炎疫苗。建议新生羔羊15日龄左右进行首次免疫,颈部皮下注射,免疫剂量为2 mL/只;每隔半年加强免疫一次,颈部皮下注射3 mL/只。免疫接种时可添加1~2 g头孢防止接种部位细菌感染。
3.5对患病羊只进行治疗时采用的
药物有多种,推荐用大环内酯类药物如泰乐菌素、替米考星、红霉素、加米霉素;喹诺酮类药物如恩诺沙星、氧氟沙星;四环素类药物如土霉素、强力霉素;头孢类药物如头孢噻呋等。结合清肺中兽药,如麻杏石甘散、清肺散进行治疗,疗程为7~10 d。
致谢
在采样过程中得到天峻县快尔玛乡畜牧兽医站工作人员的大力支持,在检测过程中得到青海大学畜牧兽医科学院兽医生物技术研究室工作人员的帮助,在此一并致谢。