质控图联合Westgard 多规则法评价两套生化检测系统测定尿酸的室内质控方案

严诗云（通信作者），吴静标，韩芝斌，姚燕丽，曹春玲，黄燕虹

广东省医疗器械质量监督检验所 （广东广州 510663）

尿酸是嘌呤碱基的代谢产物，大部分从肾脏排泄。尿酸升高的主要危害是引起痛风，同时是心血管疾病的危险因素。血清中尿酸的检测，是肾功能及心血管疾病检查的重要项目。尿酸的测定方法主要包括磷钨酸法、尿酸酶法、高效液相色谱-质谱法。目前，临床实验室主要采用灵敏度、特异度和准确性均较高，且操作较为简单的尿酸酶法[1]。但需注意的是，在实际检测过程中由于受到多种因素的影响，可能会导致出现误差。为减少检测误差，获得更精准且客观的数据，应严格控制全自动生化分析仪的检测过程，加强质量管理，以有效提高仪器的精密度及检测质量[2]。Westgard 多规则法结合Levey-Jennings 质控图的质控方法，可以确定误差类型、误差率且假失控率更低，在临床实验室被广泛应用[3-9]。

为确保检测结果的准确性和可重复性，本研究根据《检测和校准实验室能力认可准则》[10]，对日立7180、贝克曼AU680 两套生化检测系统[11]测定尿酸含量的精密度和准确度结果进行分析，通过质控图联合Westgard 多规则法分析评价2 套检测系统的内部质控结果，旨在将该方法应用于日常质量控制，以降低生化检测项目的检测误差，提高检测质量，现报道如下。

1 材料

1.1 仪器

日立7180 型全自动生化分析仪、贝克曼AU680 型全自动生化分析仪、MixMax 漩涡混匀器、可调移液器（100～1000 μl）、反渗透+EDI 纯水系统。

1.2 试剂和样本

试剂A：广州科方生物技术股份有限公司生产的尿酸测定试剂盒（尿酸酶法）（批号：210108）及配套校准品和质控品。

试剂B：贝克曼库尔特实验系统（苏州）有限公司生产的尿酸测定试剂盒（尿酸酶-过氧化物酶法）（批号：AUZ8902）及配套校准品和质控品。

质控样本：英国朗道实验诊断有限公司生产的人基质定值生化质控血清水平2（批号：1326UN，标示浓度为：340 μmol/L）、水平3（批号：1005UE，标示浓度为：560 μmol/L）。

A 检测系统：试剂A、日立7180 型全自动生化分析仪。

B 检测系统：试剂B、贝克曼AU680 型全自动生化分析仪。

2 方法及结果

2.1 精密度和准确度试验

将人基质定值生化质控血清水平2、水平3 按说明书要求充分溶解后，使用A 和B 检测系统分别重复检测10 次，计算日内精密度，连续检测20 d，计算日间精密度。并计算测定浓度与标示浓度相对偏差，得到准确度结果。见表1。

表1 A 与B 检测系统尿酸的准确度偏差及精密度比较

结果显示，A 与B 检测系统测定2 个水平质控血清的精密度和准确度偏差均达到行业标准YY/T 1207-2013[12]批内精密度和准确度的相关要求，且质控血清的日内和日间精密度结果均＜1%，A 检测系统的水平3 质控血清准确度相对偏差较B 检测系统小，结果更接近靶值。

2.2 绘制Levey-Jennings 质控图

计算A 与B 检测系统测定水平2、水平3 的日内10 次重复测试结果均数（M），用于统计20 d 日间试验结果的均数（M）和标准差（SD），进而以“d”（组号）为横坐标，测定浓度为纵坐标，M 为靶值，M±2SD 为警戒限，M±3SD 为失控限，运用Excel 软件绘制Levey-Jennings 质控图，见图1～4。

图1 A 检测系统水平2 质控血清Levey-Jennings 质控图

图2 A 检测系统水平3 质控血清Levey-Jennings 质控图

图3 B 检测系统水平2 质控血清Levey-Jennings 质控图

图4 B 检测系统水平3 质控血清Levey-Jennings 质控图

2.3 绘制Z-分数质控图

将不同水平的质控测定值转换为Z 分数形式（公式1），绘制在单个质控图上进行比较，可以直观地反映实验的系统误差与随机误差[13]，见图5 ～6。

图6 B 检测系统水平2 和水平3 质控血清Z-分数质控图

式中xi为第i 次测定值，M 为所有测定值的均数，SD 为所有测定值的标准差。

2.4 确定质量控制规则

Levey-Jennings 质控图、Z-分数质控图均结合Westgard 多规则理论的质控规则，确定6 条规则，即12S、13S、22S、R4S、41S、10X。（1）合格：所有质控样品的浓度测定值均在M±2SD 范围内，或|Z|＜2；（2）警告：12S表示有1 个质控样品测定值超过M±2SD，或出现1 次2 ＜|Z|＜3；（3）失控：13S表示有1 个质控样品测定值超过M±3SD 或出现1 次|Z|＞3；22S表示有2 个连续质控样品测定值超过M±2SD 或连续2 次出现2 ＜|Z|＜3；R4S表示相邻2 个质控样品测定值超过4SD，即一个质控超过M+2SD，另一个质控超过M-2SD，或连续2 次Z 之间差值＞4；41S表示4 个连续质控样品测定值同时超过M±SD，或连续4次|Z|＞1；10x表示连续10个质控样品测定值在M 同侧，或连续10 次Z＞0[6]。

2.5 结果分析

日立7180 检测水平2 的20 组结果浓度范围为332.8～341.7 μmol/L，水平3 的20 组结果浓度范围为558.9～573.1 μmol/L；贝克曼AU680 检测水平2 的20 组结果浓度范围为346.5～357.9 μmol/L，水平3 的20 组结果浓度范围为586.2～599.2 μmol/L。

由Levey-Jennings 质控图可知，2 套系统水平2、水平3 的测定值均未超过失控限3SD。结合Westgard 多规则法分析，日立7180 检测的20 组结果，水平2 和水平3 分别有9 个和11 个结果低于靶值，11 个和9 个结果高于靶值，水平2 第20 组结果为332.80 μmol/L，超 出M-2SD（332.81 μmol/L），提示警告1 次。贝克曼AU680 检测的20 组结果中，水平2 和水平3 分别有11 个和8 个低于靶值，9 个和12 个高于靶值，水平2 和水平3 第17 组的结果分别为357.89 μmol/L 和599.20 μmol/L，超出M+2SD（357.84 μmol/L 和598.96 μmol/L），分别提示警告1 次；水平3 第10 组至第20 组连续11 组结果在M同侧，均高于M，违反10X规则，提示失控1 次。

分析Z-分数质控图，日立7180 检测水平2 质控血清的第20 组结果|Z|=2.003，违反12s 规则，提出警告1 次，检测水平3 质控血清，所有组的|Z|值均＜2。贝克曼AU680 检测水平2、水平3 质控血清的第17 组结果均出现2＜|Z|＜3，分别为2.01 和2.07，均违反12s 规则，提出警告1 次，水平3 第10 组至第20 组，连续11 次Z＞0，违反10x规则，提示失控1 次，此结果与Levey-Jennings 质控图结果一致。

3 讨论

本研究通过2 套系统分别检测同一组质控品，计算精密度和准确度，结果显示，精密度结果较为一致，均在1%以内，准确度偏差亦满足行业标准YY/T 1207-2013《尿酸测定试剂盒（尿酸酶过氧化物酶偶联法）》[12]的规定，两套系统均能满足日常进行试剂盒性能检测的要求。

同时本研究进行2 套系统的尿酸含量检测，并绘制Levey-Jennings 质控图及Z-分数质控图，结合Westgard 多规则理论分析2 套系统内部质控结果，观察是否出现失控情况，并分析造成失控原因，提出解决方案。日立7180 检测水平3 的结果均为合格，水平2 的结果提出1 次警告，贝克曼AU680水平2结果提出1次警告，水平3结果提出1次警告及1 次失控，失控类型为违反10x 规则，即从第10～20 天的结果连续11 组均高于平均值。当出现结果失控时，及时查找失控原因并排除误差，分析可能存在的影响因素并及时纠正，以保证检测结果的准确性[3]。根据本实验室的具体情况分析出现失控结果的原因，主要是因为2 套系统检测的是同一份样本，且先进行的是日立7180 的检测，等待检测及转移样本的过程，导致AU680 样本检测时已放置的时间较长。另外，由于贝克曼AU680 不能设置检测重复次数，且为保证样本的可重复性，未将样本分装至多个样本杯，实验过程为反复进行10 次单次检测，吸样等待过程也会导致液体蒸发造成浓度偏高，即样本放置温度导致的系统误差。针对该原因，实验室完善了实验过程操作规程，规定样本复温后的检测时间，并对操作人员进行相关培训，以减少该类失控情况的发生。

Levey-Jennings 质控图和Z- 分数质控图与Westgard 多规则法的联合，可以降低假失控率和假报警率，其13s 和R4s 规则能够敏锐发现随机误差，22s、41s 和10x 规则能够准确判断系统误差，从而提高误差检出能力[5]，呈现内部质控的准确性。由于本次实验使用的是不同厂家的试剂盒，试剂盒的溯源过程及参考区间存在差异，未能对实验结果的一致性进行评价，在未来的研究中将考虑使用同一厂家的试剂盒在不同仪器上进行检测，结合一致性结果和质控方法，来评价仪器的性能差别，为实验室间比对及监督抽验结果的判定提供参考。

综上所述，Levey-Jennings 质控图和Z-分数质控图联合Westgard 多规则法是使用较多的室内质控方法，能及时发现失控结果，并及时提出解决措施，对于提高检测结果的精密度和准确性具有重要意义。日常进行尿酸检测时，可以联合使用质控图与Westgard 多规则法，以提高检验结果质量[14]。