血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy水平与2型糖尿病周围神经病变的关系

赖树初，邱培杰，黄丹敏，王泽微，王旭芬

普宁市人民医院内分泌科，广东 普宁 515300

2 型糖尿病(T2DM)是临床常见慢性代谢性疾病，随着生活环境、方式及饮食结构的变化，T2DM的患病率呈逐年增长趋势[1]。糖尿病周围神经病变是T2DM患者较常见并发症，可诱导患者出现溃疡、糖尿病足、感染症状，至今无特效治疗方案，是造成患者截肢的主要因素[2]。糖尿病周围神经病变的发病机制尤为复杂，迄今为止尚未有准确定论，但有研究指出维生素D缺乏与其发生关系密切[3]。随着研究的不断深入，有学者发现生物学改变可促进局部氧化应激损伤，导致病情不断进展，因此通过监测生物学指标变化可提高临床诊断T2DM 周围神经病变的准确性。同型半胱氨酸(Hcy)可诱导过氧化物出现，进而导致周围神经出现病变，而胱抑素(Cys-C)参与了Hcy的代谢过程，通过监测其水平表达可反映患者病情情况[4]。目前，关于上述指标与T2DM 的关系国内报道鲜见。为此，本研究将分析血清25-羟维生素D3[25(OH)D3]、Cys-C、Hcy水平与T2DM周围神经病变的关系，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2022年1月至2022年9月普宁市人民医院内分泌科收治的90例T2DM患者作为研究对象。纳入标准：(1)符合T2DM相关诊断标准[5]；(2)确诊T2DM及T2DM周围神经病变治疗>2周；(3)患者及其家属知情并签订同意书。排除标准：(1)Ⅰ型糖尿病；(2)合并心脑血管疾病或自身免疫性疾病；(3)主要脏器功能严重障碍或合并恶性肿瘤疾病；(4)近期有服用维生素D 药物；(5)甲状腺功能异常者。根据是否发生周围神经病变分为病变组(n=62)和非病变组(n=28)。病变组患者根据病程分为<5 年组(n=18)，5~10 年组(n=24)，>10 年组(n=20)。选择同期体检健康人群50 例作为对照组。病变组中男性32 例，女性30例；年龄45~70岁，平均(59.31±4.21)岁；病程5~13年，平均(8.91±1.39)年。非病变组中男性19例，女性9例；年龄44~70岁，平均(59.28±4.32)岁；病程5~14年，平均(8.95±1.42)年。对照组中男性29 例，女性21 例；年龄45~70 岁，平均(58.92±4.59)岁。三组受试者的基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 检测方法 所有受试者于采集标本前禁食、禁饮8 h，采集空腹静脉血4 mL，低温静置30 min后以2 500 r/min 的速度离心处理5 min(r=3 cm)并分离血清，以ELISA 法测定血清中Hcy、Cys-C 含量，以串联质谱法测定血清25(OH)D水平，试剂盒均由浙江鸿兴科技公司提供，步骤以试剂盒说明书为准。

1.3 观察指标 (1)比较三组受试者血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 水平；(2)比较不同病程T2DM周围神经病变患者血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 水平；(3)分析血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 与周围神经病变关系；(4)比较血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 单独及联合检测对T2DM周围神经病变的诊断效能。

1.4 统计学方法 应用SPSS21.0统计软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差()表示，多组比较采用方差分析，两两比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验，采用Pearson 法分析血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 与T2DM 周围神经病变的相关性，采用ROC 评估各项指标诊断效能。以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组受试者的血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy水平比较 病变组患者的25(OH)D3水平明显低于非病变组和对照组，非病变组明显低于对照组，而Cys-C、Hcy 水平明显高于非病变组和对照组，非病变组明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 三组受试者的血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy水平比较()Table 1 Comparison of serum 25(OH)D3, Cys-C, and Hcy levels among the three groups()

表1 三组受试者的血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy水平比较()Table 1 Comparison of serum 25(OH)D3, Cys-C, and Hcy levels among the three groups()

注：与对照组比较，aP<0.05;与非病变组比较，bP<0.05。Note: Compared with the control group,aP<0.05; Compared with the non-lesion group,bP<0.05.

Cys-C(mg/L)5.21±0.38ab 4.81±0.41a 2.01±0.37 969.343 0.001组别病变组非病变组对照组F值P值25(OH)D3(ng/mL)13.98±4.09ab 15.71±4.14a 28.31±4.21 176.891 0.001例数62 28 50 Hcy(μmol/L)15.31±2.98ab 14.11±2.84a 6.31±2.01 161.952 0.001

2.2 不同病程T2DM 周围神经病变患者的血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 水平比较 <5 年组患者的25(OH)D3水平明显高于5~10年组和>10年组，5~10年组明显高于>10 年组，而Cys-C、Hcy 水平明显低于5~10年组和>10年组，5~10年组明显低于>10年组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 不同病程T2DM 周围神经病变患者的血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy水平比较()Table 2 Comparison of serum 25(OH)D3, Cys-C, and Hcy levels in T2DM patients with peripheral neuropathy of different disease course()

表2 不同病程T2DM 周围神经病变患者的血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy水平比较()Table 2 Comparison of serum 25(OH)D3, Cys-C, and Hcy levels in T2DM patients with peripheral neuropathy of different disease course()

注：与<5年组比较，aP<0.05；与5~10年组比较，bP<0.05。Note: Compared with the<5 years group,aP<0.05; Compared with the 5-10 years group,bP<0.05.

组别<5年组5~10年组>10年组F值P值54.042 0.001 26.763 0.001 147.712 0.001 Hcy(μmol/L)10.31±2.61 15.09±2.75a 19.41±2.70ab例数18 24 20 25(OH)D3(ng/mL)15.09±2.15 13.01±1.98a 10.21±2.10ab Cys-C(mg/L)4.98±0.57 6.91±0.59a 8.29±0.62ab

2.3 血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy与周围神经病变的关系 经Pearson 相关性分析结果显示，25(OH)D3与周围神经病变呈负相关(P<0.05)，而Cys-C、Hcy 水平与周围神经病变呈正相关(P<0.05)，见表3。

表3 血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy与周围神经病变的关系Table 3 Relationship between serum 25(OH)D3, Cys-C, Hcy and peripheral neuropathy

2.4 血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 单独及三者联合检测对T2DM 周围神经病变的诊断效能 血清25(OH)D3、Cys-C 和Hcy 单独检测对T2DM 周围神经病变诊断的敏感度和特异性明显低于三者联合检测，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表4。经ROC分析结果显示，三项指标联合检测的AUC为0.780，明显高于血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 单独检测的0.632、0.740、0.619，差异均统计学意义(P<0.05)，见表5和图1。

图1 血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 单独及联合检测诊断T2DM 周围神经病变的ROCFigure 1 ROC of serum 25(OH)D3, Cys-C, and Hcy alone and in combination for the diagnosis of peripheral neuropathy in T2DM patients

表4 血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy单独及联合检测对T2DM周围神经病变的诊断效能Table 4 Sensitivity and specificity of serum 25(OH)D3,Cys-C,and Hcy in the diagnosis of peripheral neuropathy in T2DM patients

表5 血清25(OH)D3、Cys-C、Hcy 单独及联合检测诊断T2DM 周围神经病变的效能Table 5 Results of serum 25(OH)D3, Cys-C, and Hcy alone and in combination for the diagnosis of peripheral neuropathy in T2DM patients

3 讨论

糖尿病周围神经病变可诱导T2DM 患者出现四肢感神经障碍、运动神经异常，且伴随病情不断进展可导致病情不断加重，最终导致患者出现残疾，对患者的工作、生活造成不良影响[6]。因此需要进一步明确T2DM 周围神经病变的发病机制，对降低致残率、死亡率有积极作用。研究表明，T2DM 周围神经病变的发生是多种因素作用的结果[7]，如脂代谢紊乱、自身免疫损伤、氧化应激损伤等，在上述致病机制的影响下，某些细胞因子，如：Cys-C、Hcy、25(OH)D3的异常变化被认为可能参与了T2DM 周围神经病变的发生、进展。

维生素D 为脂溶性类固醇激素，富含维生素D2和D3，是机体组织中不可或缺的营养元素之一[8]。但是由于维生素D3中无生物活性，因此必须将其转化为25(OH)D3才可发挥作用[9]。Lasschuit 等[10]研究指出，维生素D不仅参与了钙磷调节，同时其水平表达还与多种免疫性疾病有关，在促进T2DM 患者胰岛细胞分泌胰岛素时还增强了胰岛素的敏感性，进而发挥控制机体组织血糖的作用。本结果显示，病变组患者的25(OH)D3水平明显低于非病变组和对照组，且病程越长的患者25(OH)D3水平越低，进一步行相关性分析发现，血清25(OH)D3水平与T2DM 周围神经病变呈负相关。说明在T2DM 周围神经病变患者中血清25(OH)D3缺乏是一种十分普遍的现象，且患者病情越严重血清25(OH)D3水平越低。

Hcy、Cys-C 是临床常见生化指标，随着研究的不断深入，发现Hcy、Cys-C 在T2DM 周围神经病变的发生、进展中有关联，因此上述指标的水平变化逐渐受到临床医学者的重视[11]。Cys-C 是一种低分子蛋白质，在机体组织中所有的核细胞均能够以相同的速度产生Cys-C，其所产生的酶能够抑制机体组织中ZTP能量酶，从而降低细胞的代谢活性，诱导神经元纤维细胞核出现萎缩，对促进疾病转归有积极作用[12-14]。Hcy是蛋氨酸代谢的中间产物，主要经肝脏、肾脏进行代谢，其高水平表达能够诱导机体组织产生氧化应激反应，并参与动脉粥样硬化过程[15]。随着近年来研究的不断深入，发现Hcy 的水平变化与糖尿病周围神经病变关系十分密切，可能是诱导糖尿病周围神经病变发生的独立影响因素[16]。Cys-C 能够抑制Hcy 分解期间的酶，从而导致血清中Hcy水平异常升高，两者之间相互作用，相互影响，导致患者的病情不断加重[17]。本研究显示，病变组患者的Hcy、Cys-C 水平明显高于非病变组和对照组，说明T2DM 周围神经病变患者的Hcy、Cys-C 水平异常升高。此外，我院分析了不同病程患者的Hcy、Cys-C 水平差异，结果显示患者病程越短Hcy、Cys-C 水平越低，可见伴随病程的增加Hcy、Cys-C 水平逐渐升高。进一步行相关性分析发现，血清Hcy、Cys-C水平与T2DM周围神经病变患者的病情呈显著正相关。诊断效能方面，本研究显示上述三项指标联合检测诊断T2DM 周围神经病变的敏感性、特异性均分别高于三项指标单独检测诊断T2DM 周围神经病变的敏感度、特异性，AUC 也分别高于三项指标单独检测，由此可见三项指标联合检测可提高疾病诊断的准确率。

综上所述，T2DM周围神经病变患者血清25(OH)D3水平降低，而Cys-C、Hcy水平升高，且其水平与病情显著相关，上述三项指标联合检测可提高对T2DM 周围神经病变的诊断效能。