百色地区人群MTHFR C677T基因多态性对高脂血症的影响

黄宵莓，黄艳云，冯国钢，梁林慧

·论 著·

百色地区人群MTHFR C677T基因多态性对高脂血症的影响

黄宵莓1，黄艳云2，冯国钢1，梁林慧1

1.百色市人民医院检验科，广西百色 533000；2.百色市人民医院医学生殖中心，广西百色 533000

分析百色地区人群亚甲基四氢叶酸还原酶（methylene tetrahydrofolate reductase，MTHFR）C677T位点基因多态性对高脂血症的影响。选取2020年5月至2022年9月在百色市人民医院进行体检的1073例高脂血症患者作为高脂血症组，选取同期1036例健康体检者作为对照组。检测两组的血脂水平，应用PCR-荧光探针法测定MTHFR C677T基因型。观察两组MTHFR C677T基因型和等位基因频率的分布情况，分析MTHFR C677T不同基因型对高脂血症的影响。高脂血症组与对照组的MTHFR C677T 3种基因型（CC、CT、TT）、两种等位基因（C、T），以及显性模型（CCCT+TT）、超显性模型（CTCC+TT）、隐性模型（TTCC+CT）频率的分布情况比较，差异均无统计学意义（>0.05）。高脂血症各亚组的基因型及等位基因频率分布与对照组比较，差异无统计学意义（>0.05）。两组MTHFR C677T不同基因型间总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平比较，差异均无统计学意义（>0.05）。百色地区人群MTHFR C677T 位点的基因多态性可能对高脂血症影响不大。

高脂血症；亚甲基四氢叶酸还原酶；基因多态性

高脂血症是一种由多因素导致的脂质代谢紊乱疾病，以血清总胆固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）升高和高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）降低为主要特征，能引起心血管疾病、甲状腺功能减退、糖尿病视网膜病变等疾病的发生，对人类健康造成巨大危害[1-3]。高脂血症常与饮食习惯、生活方式等环境因素及个体遗传因素有关，其中个体遗传因素的影响已引起人们广泛的关注。目前研究已证实多个基因多态性与高脂血症相关，如诱导型低密度脂蛋白受体降解蛋白（inducible low density lipoprotein receptor degrading protein，IDOL）、载脂蛋白A（apolipoprotein A，Apo A）、载脂蛋白B（apolipoprotein B，Apo B）、载脂蛋白E（apolipoprotein E，Apo E）等的基因多态性位点[4-6]。其中亚甲基四氢叶酸还原酶（methylene tetrahydrofolate reductase，MTHFR）C677T位点的基因多态性与血脂之间的研究是目前备受关注的热点之一，但报道结果缺乏一致性[7-11]。本研究选取百色地区常住人口为研究对象，讨论MTHFR C677T基因多态性对高脂血症的影响，为本地区进一步预防和临床治疗高脂血症提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年5月至2022年9月在百色市人民医院保健科体检的1073例高脂血症患者作为高脂血症组，选取同期1036例健康体检者作为对照组。高脂血症组再分为高胆固醇血症组（TC>5.90mmol/L，=493）、高三酰甘油血症组（TG>1.80mmol/L，=765）、混合型高脂血症组（TC>5.90mmol/L且TG> 1.80mmol/L，=265）3个亚组。纳入标准[12]：成年人空腹TC>5.90mmol/L和（或）TG>1.80mmol/L和（或）LDL-C>4.11mmol/L和（或）HDL-C<0.90mmol/L。排除标准：①存在心脑血管疾病、糖尿病、高血压、恶性肿瘤、严重肝肾功能损害；②近期服用影响血脂水平药物。本研究已通过百色市人民医院医学伦理委员会审批（伦理审批号：LW2023020101）。

1.2 检测方法

清晨采集两组的空腹静脉血5ml，3000转/min，离心10min分离血清，采用全自动生化分析仪（日本佳能公司，TBA-FX8型）检测TC、TG、LDL-C、HDL-C，检测试剂盒购自北京安图生物工程有限公司。以EDTA-K2作为采血管抗凝剂，采集空腹静脉血1ml，采用全自动核酸提取仪（广东凯普生物科技股份有限公司，HBNP-4801A型）提取DNA。采用快速实时荧光定量PCR仪（美国赛默飞世尔科技公司，ABI 7500）通过PCR-荧光探针法，根据荧光信号强度变化来分辨提取DNA的MTHFR C677T的基因型，检测试剂盒由购自深圳泰乐德医疗有限公司。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 高脂血症组与对照组患者临床资料比较

两组患者性别、年龄比较，差异均无统计学意义（0.05），高脂血症组的TC、TG、HDL-C和LDL-C水平均显著高于对照组（<0.05），见表1。

2.2 高脂血症组与对照组患者MTHFR C677T基因型多态性遗传平衡检验

两组的基因型实际频数和理论频数比较，差异无统计学意义（>0.05），符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律，具有群体代表性，见表2。

2.3 MTHFR C677T基因型及等位基因频率比较

高脂血症组与对照组的MTHFR C677T基因型和等位基因频率比较，差异均无统计学意义（>0.03），见表3。高脂血症各亚组与对照组MTHFR C677T基因型及等位基因频率比较，差异均无统计学意义（>0.05），见表4。

2.4 高脂血症组与对照组患者MTHFR C677T不同基因型的血脂水平比较

高脂血症组与对照组MTHFR C677T不同基因型的血脂水平比较，差异均无统计学意义（>0.05），见表5。

表1 高脂血症组与对照组患者临床资料比较

表2 高脂血症组与对照组患者MTHFR C677T基因型多态性遗传平衡检验（例）

表3 高脂血症组与对照组患者MTHFR C677T基因型及等位基因频率比较[n（%）]

表4 高脂血症各亚组与对照组患者MTHFR C677T基因型及等位基因频率比较[n（%）]

表5 高脂血症组与对照组患者MTHFR C677T不基因型的血脂水平比较[M（Q1，Q3）]

3 讨论

MTHFR是人体叶酸代谢过程中的一个关键酶，可将5,10-亚甲基四氢叶酸转化为具有生物学功能的5-甲基四氢叶酸，再经甲基传递通路最后使血浆Hcy保持在一个较低水平。MTHFR基因存在多种位点突变，其中最常见的不耐热错义突变是C677T位点[13]。该突变是指MTHFR基因的第677位密码子胞嘧啶（cytosine，C）被置换为胸腺嘧啶（thymine，T），从而使该位点编码的高保守丙氨酸变成了缬氨酸，产生3种基因型，即677CC型（野生型）、677CT型（杂合突变型）及677TT型（纯合突变型）。携带Ｔ等位基因的突变型（CT型、TT型）都会导致MTHFR活性和热稳定性下降，从而使血浆同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）代谢受阻，最终导致Hcy水平升高[14]。高同型半胱氨酸血症（hyperhomocysteinemia，HHcy）作为心血管疾病的一个重要独立危险因素，与心血管系统疾病的发生及发展密切相关[15]。高脂血症作为心血管疾病的重要独立危险因素之一，严重危害人类健康[16]。目前认为Hcy对血脂水平有影响，可能是通过氧化应激作用或通过干扰某些脂质参数的分泌而扰乱磷脂代谢，从而导致血脂代谢水平异常[17-18]。因此，推测MTHFR C677T位点的基因多态性可能通过影响血浆Hcy水平而影响血脂水平的代谢。

目前，MTHFR基因多态性已广泛用于多种疾病的研究[19-21]。关于MTHFR C677T位点的基因多态性与高脂血症的关系在不同人群中已有不少研究，但结果缺乏一致性。Liu等[7]研究表明，MTHFR各基因型间TC和LDL-C水平的分布比较，差异有统计学意义，TT基因型的高血压患者较CC型和CT型高血压患者具有更高的TC、LDL-C水平，与Aarabi等[8]的研究结果一致。另有国内学者对高血压人群MTHFR C677T基因多态性研究的结果显示，TT基因型携带者较CC+CT基因型携带者出现LDL-C异常的概率更高[9]。而刘爽等[10]的研究结果显示，MTHFR各基因型在TC、TG、HDL-C、LDL-C的水平比较，差异无统计学意义，提示血脂水平的变化与MTHFR C677T基因多态性无关联性。范贵娟等[11]的研究结果也显示二者之间不具有关联性。本研究结果与Liu等[7]、Aarabi等[8]不一致，与刘爽等[10]、范贵娟等[11]一致。本研究结果显示，MTHFR C677T位点的3种基因型（CC、CT、TT）、两种等位基因（C、T），以及显性模型（CCCT+TT）、超显性模型（CTCC+TT）、隐性模型（TTCC+CT）在高脂血症组和对照组中的分布情况比较，差异均无统计学意义；两组MTHFR C677T不同基因型间TC、TG、HDL-C、LDL-C水平比较，差异均无统计学意义；高脂血症各亚组与对照组的基因型和等位基因频率分布比较，差异亦无统计学意义，提示百色地区人群的MTHFR C677T位点的基因多态性对高脂血症的影响较小。研究结果不一致的原因可能是MTHFR C677T的基因型，以及等位基因频率在不同地区、不同人群中的分布存在显著差异[22]。国内一项Meta分析结果显示，MTHFR C677T基因多态性分布存在明显的地理分布差异，南方人群TT基因型及T等位基因频率分布情况较北方低，呈现由北向南逐渐下降趋势[23]。刘冉等[24]的研究结果也显示，随着地理纬度的降低，T等位基因频率也降低。这些基因频率分布的差异可能影响人群对疾病的易感性[25]。同时，研究结果的不一致性还可能与饮食习惯、生活方式、遗传结构特征、样本量的大小等有关。

综上所述，百色地区MTHFR C677T的基因多态性对高脂血症的影响不大。当然，本研究存在一定局限性。首先，本研究样本量相对较小，二者间是否有相关性需要更大规模及多中心协作去进一步验证。其次，血脂水平受多基因影响，单一基因、单一位点对疾病的作用可能不显著，需要联合多基因、多位点的遗传性状进行分析。基于以上的局限性，深入地探讨基因多态性和血脂相关疾病之间的关系将会是下一步研究的重点。

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Correlation analysis of MTHFR C677T gene polymorphisms with hyperlipidemia

HUANG Xiaomei, HUANG Yanyun, FENG Guogang, LIANG Linhui

1.Department of Clinical Laboratory, Baise People’s Hospital, Baise 533000, Guangxi, China; 2.Medical Reproductive Center, Baise People’s Hospital, Baise 533000, Guangxi, China

To analyze the effect of gene polymorphisms at methylene tetrahydrofolate reductase (MTHFR) C677T on hyperlipidaemia in the population of Baise region.A total of 1073 patients with hyperlipidaemia who underwent physical examination in Baise People’s Hospital from May 2020 to September 2022 were selected as the hyperlipidaemia group, and 1036 healthy people who underwent physical examination during the same period were selected as the control group. The lipid levels of the two groups were detected, and the PCR-fluorescent probe method was applied to determine the MTHFR C677T genotype. Observed the distribution of MTHFR C677T genotype and allele frequency in the two groups, and analyzed the influence of different genotypes of MTHFR C677T on hyperlipidaemia.Compared the distribution of three genotypes (CC, CT, TT), two alleles (C, T), and frequencies of dominant model (CCCT+TT), super-dominant model (CTCC+TT), and recessive model (TTCC+CT) of MTHFR C677T locus in hyperlipidaemia group and control group, the differences were not statistically significant (>0.05). The distribution of genotypes and allele frequencies of each subgroup of hyperlipidaemia was not statistically significant when compared with the control group (>0.05). Comparison of total cholesterol, triglyceride, high-density lipoprotein cholesterol and low-density lipoprotein cholesterol levels between different genotypes of MTHFR C677T in the two groups showed no statistically significant difference (>0.05).Genetic polymorphisms at the MTHFR C677T locus in Baise region population may have little effect on hyperlipidaemia.

Hyperlipidemia; Methylene tetrahydrofolate reductase; Gene polymorphisms

R394.3

A

10.3969/j.issn.1673-9701.2023.23.009

百色市科学研究与技术开发计划项目（百科20184417）

梁林慧，电子信箱：423568732@qq.com

（2022–12–01）

（2023–07–23）