血清中期因子、脂氧素A4、CXC趋化因子配体16联合应用对过敏性紫癜患儿肾损害的预测价值

徐苏娟,张继明

1.陕西省咸阳彩虹医院/咸阳市儿童医院儿科,陕西咸阳 712021;2.西安启迪儿童医院检验科,陕西西安 710077

过敏性紫癜(HSP)是儿童时期常见的一种以小血管炎为主要病理性改变的全身综合征,HSP小血管炎可累及皮肤、关节、肾脏和消化道等多个部位,尽管大多合并肾损害的HSP患儿病程呈自限性特征,但仍有部分HSP患儿可发展为慢性肾功能不全甚至肾衰竭,严重影响患儿预后[1]。肾活检是评估肾脏损害的“金标准”,但其作为一种有创操作,存在取样困难和患儿受到的痛苦大等缺点,因此有必要寻找侵袭性较小的实验室指标。有研究表明,炎症反应参与HSP肾损害发生发展[2]。中期因子(MK)是一种肝素结合生长因子,能通过调控免疫细胞促进炎症反应[3]。脂氧素A4(LXA4)是一种内源性脂质介质,能结合多种细胞表面受体抑制炎症反应[4]。CXC趋化因子配体16(CXCL16)是一种趋化因子,能通过激活炎症细胞通路促进炎症反应[5]。本研究旨在分析HSP患儿血清MK、LXA4、CXCL16水平变化,探讨其对HSP患儿肾损害的预测价值,以期为HSP患儿肾损害防治提供参考依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月至2021年12月咸阳彩虹医院(以下简称本院)收治的117例HSP患儿为HSP组,其中男66例,女51例;年龄1～14岁,平均(5.86±1.32)岁;体质量6.72～62.58 kg,平均(16.02±2.64)kg。纳入标准:(1)HSP符合《儿童过敏性紫癜循证诊治建议》[6]中的相关诊断标准,存在可触性皮疹并伴有以下4条中的任意一条,①弥漫性腹痛,②任何部位活检提示免疫球蛋白A1沉积,③关节炎/关节痛,④肾脏受损(血尿和/或蛋白尿);(2)年龄≤14岁;(3)首次发病和诊治。排除标准:(1)合并川崎病、狼疮血管炎等其他血管炎症疾病;(2)合并血液系统疾病、免疫系统缺陷;(3)既往有肾功能损害;(4)合并严重内分泌疾病和其他重要脏器功能损害;(5)临床资料不全或不能接受随访。另选取本院同期59例健康体检志愿儿童为对照组,其中男33例,女26例;年龄1～14岁,平均(5.79±1.38)岁;体质量8.57～63.44 kg,平均(16.13.08±2.67)kg。两组研究对象性别、年龄、体质量比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究患儿家属知情并签署知情同意书。本研究经本院医学伦理委员会批准。

1.2方法

1.2.1资料收集 收集HSP患儿临床资料,包括性别、年龄、体质量、确诊时间(症状出现到医院确诊时间)、关节痛/关节炎及消化道出血、EB病毒(EBV)感染、呼吸道感染等情况。

1.2.2血清MK、LXA4、CXCL16水平检测 收集所有研究对象入院次日空腹静脉血3 mL(当天检测),1 500 r/min离心10 min后取上层血清,采用酶联免疫吸附试验(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司试剂盒,货号:E-EL-H2297c、E-EL-0053c、E-EL-H6009)检测血清MK、LXA4、CXCL16水平。

1.3肾损害诊断和分组 HSP患儿入院后参考《儿童过敏性紫癜循证诊治建议》[6]接受治疗:包括控制饮食、抗感染、皮疹治疗、关节症状治疗、胃肠道症状治疗和糖皮质激素治疗等。治疗后通过门诊复查随访6个月,统计肾损害发生情况。肾损害诊断标准[7]包括(1)血尿:肉眼血尿或1周内2次镜下血尿(红细胞≥3个/高倍视野);(2)蛋白尿:①1周内3次微量清蛋白高于正常值,②24 h尿蛋白定量>150 mg或尿蛋白/肌酐>0.2 mg/mg,③1周内3次尿常规尿蛋白阳性。符合血尿和/或蛋白尿的任意一项即诊断为肾损害。根据是否发生肾损害分为肾损害组和无肾损害组。

2 结 果

2.1HSP组与对照组血清MK、LXA4、CXCL16水平比较 HSP组血清MK、LXA4、CXCL16水平均高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 HSP组与对照组血清MK、LXA4、CXCL16水平比较

2.2HSP患儿肾损害的单因素分析 随访6个月,117例HSP患儿中发生肾损害35例(肾损害组),肾损害发生率为29.91%(35/117),其余82例为无肾损害组。肾损害组确诊时间≥7 d、呼吸道感染患儿比例和血清MK、LXA4、CXCL16水平均高于无肾损害组(P<0.05)。但两组性别、年龄、体质量及关节痛/关节炎、消化道出血、EBV感染患儿比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 HSP患儿肾损害的单因素分析[n(%)或或M(P25,P75)]

2.3HSP患儿肾损害的多因素Logistic回归分析 以确诊时间(≥7 d=1,<7 d=0)、呼吸道感染(有=1,无=0)、MK(连续变量,原值输入)、LXA4(连续变量,原值输入)、CXCL16(连续变量,原值输入)为自变量,是否发生肾损害(是=1,否=0)为因变量进行多因素Logistic回归分析。结果显示,确诊时间≥7 d、呼吸道感染和血清MK、LXA4、CXCL16水平升高均为HSP患儿肾损害的独立危险因素(P<0.05)。见表3。

表3 HSP患儿肾损害的多因素Logistic回归分析

2.4血清MK、LXA4、CXCL16水平对HSP患儿肾损害的预测价值 ROC曲线分析结果显示,血清MK、LXA4、CXCL16水平联合预测HSP患儿肾损害的曲线下面积(AUC)大于MK、LXA4、CXCL16单独预测(Z=3.289、3.298、3.095,P<0.05)。见表4和图1。

图1 血清MK、LXA4、CXCL16水平预测HSP患儿肾损害的ROC曲线

表4 血清MK、LXA4、CXCL16水平对HSP患儿肾损害的预测价值

3 讨 论

HSP是一种系统性小血管炎,主要因遗传、免疫紊乱、感染等因素导致免疫球蛋白A1沉积小血管壁引起自身炎症反应和组织损伤所致,其炎症累及肾脏可导致肾脏损害[8]。本研究中,117例HSP患儿肾损害发生率为29.91%,与国内相关研究报道的15.0%～40.0%结果相符[9-10],说明HSP患儿肾损害发生率较高,及时预测肾损害发生情况对改善患儿预后具有重要意义。

炎症反应是HSP肾损害发生、发展的重要机制之一,免疫球蛋白A1沉积所引起的自身炎症反应能进一步损害肾细胞,导致肾脏功能损害[11]。MK是一种趋化因子,能通过直接作用或诱导B淋巴细胞增殖、T淋巴细胞活化、白细胞募集等促进局部炎症细胞浸润,参与炎症反应发生、发展[12]。MK在肾脏中主要表达于近端肾小管上皮细胞,当出现炎症和缺氧时能激活MK启动子促进MK表达[13]。有研究报道,敲除小鼠MK表达能减少白细胞等炎症细胞浸润,改善肾缺血再灌注小鼠肾脏功能,同时MK能通过引起Th1/Th2失衡导致肾脏损害和纤维化[14-15]。本研究结果显示,MK水平升高是HSP患儿肾损害的独立危险因素,说明MK参与HSP患儿肾损害发生,分析原因是HSP患儿血管炎症激活MK启动子导致MK水平升高,而血清MK水平升高能促进T淋巴细胞活化,引起肾小球炎症和损伤,导致肾损害发生[16]。

LXA4是脂氧素家族重要成员,可结合细胞表面的LXA4受体使自身活化,具有广泛的舒张血管、拮抗炎症反应和促进炎症消退的作用[17]。金波等[18]研究显示,LXA4能抑制肾小管细胞凋亡,减少急性肾损害。GUO等[19]研究显示,上调LXA4能通过抑制炎症信号通路抑制肾脏炎症和损伤。本研究结果显示,血清LXA4水平升高,这与LXA4具有抗炎作用机制的结果不符,考虑与LXA4表达上调具有内源性保护作用有关。有研究报道,LXA4水平在肾损伤模型中升高[18]。本研究结果显示,血清LXA4水平升高是HSP患儿肾损害的独立危险因素,分析原因是血清LXA4水平越高反映HSP患儿炎症反应越严重,间接反映肾小球炎症反应和损伤加重[20]。

趋化因子是一类具有诱导附近反应细胞定向趋化能力的小细胞因子,其分布和表达异常可导致人体细胞免疫功能紊乱,激活和促进炎症反应[21]。CXCL16是一种新型趋化因子,当炎症存在时能直接刺激趋化因子信号使CXCL16大量表达,并与炎症细胞和趋化细胞相互作用,促进炎症反应发展[21]。迟磊等[22]研究显示,抑制CXCL16能阻断下游核转录因子κB信号通路活化,抑制肾细胞炎症反应和凋亡。CHEN等[23]研究显示,抑制CXCL16表达水平可阻断细胞外调节蛋白激酶1/2信号通路,进而抑制肾足细胞增殖、迁移和凋亡。本研究结果显示,血清CXCL16水平升高是HSP患儿肾损害的独立危险因素,说明CXCL16参与HSP患儿肾损害发生,分析原因是HSP患儿血管炎症激活使CXCL16大量释放,随着血清CXCL16水平升高能促进多条信号通路活化,加重肾细胞炎症反应,导致肾损害风险增加[24]。

本研究结果还显示,确诊时间≥7 d和呼吸道感染也是HSP患儿肾损害的独立危险因素,分析原因是确诊时间越长,反映HSP患儿受到的血管炎症损害越长,因此肾损害风险越高;呼吸道感染则会进一步破坏HSP患儿免疫系统,使免疫复合物大量聚集于肾脏,导致肾损害风险增加[25]。本研究中消化道出血并非HSP患儿肾损害的影响因素,这与李艳等[10]报道结果相反,分析原因可能与纳入研究对象个体差异或样本量存在差异有关。最后本研究通过绘制ROC曲线分析发现,血清MK、LXA4、CXCL16水平分别为0.31、0.89、2.99 ng/mL时,预测HSP患儿肾损害的AUC分别为0.786、0.781、0.783,提示血清MK、LXA4、CXCL16或可成为HSP患儿肾损害的辅助预测指标,且上述3项指标联合预测HSP患儿肾损害的AUC显著增加至0.926,说明联合检测血清MK、LXA4、CXCL16水平能提升HSP患儿肾损害的预测价值。

综上所述,HSP患儿血清MK、LXA4、CXCL16水平升高,是肾损害发生的独立危险因素,可能成为HSP患儿肾损害的辅助预测指标,且三者联合预测的价值更高。但本研究年龄范围略窄,关于MK、LXA4、CXCL16与成人HSP的关系还需进一步研究,同时本研究结果也需前瞻性多中心研究验证。