五根汤口服液稳定性试验研究

刘光斌 张宇博 王艳 赵丽萍 张玉叶 毛和平

摘要：目的：对五根汤口服液的加速稳定性及长期稳定性进行考察。方法：根据加速稳定性及长期稳定性实验方法，检测五根汤口服液的性状、PH 值、相对密度。采用 TLC 法对其主要成分葛根、红花、大黄、山豆根、板蓝根进行鉴别。40℃±2℃，相对湿度为75%±5%的条件下放置6个月，温度为25℃±2℃，相对湿度为60%±5%的条件下放置24个月期内外观性状，测定、PH 值、相对密度、微生物及其主要活性成分葛根、红花、大黄、山豆根、板蓝根的变化；采用高效液相色谱法检测口服液中葛根素的含量变化。结果：密封贮存24个月期内五根汤口服液的外观性状、PH 值、相对密度、微生物等变化均在合格范围内， 其主要活性成分葛根、红花、大黄、山豆根、板蓝根稳定，口服液中葛根素的含量几乎无变化。结论：五根汤口服液直接接触药品的包装材料能够保证制剂在有效期内质量稳定。

关键词：五根汤口服液;稳定性; TLC；HPLC

中图分类号：R286.0                            文献标志码：A

五根汤口服液是我院根据内蒙古老中医李凤林先生治疗小儿发烧的处方优化后通过一定工艺提取浓缩制备而成的院内中药制剂。处方由葛根，板蓝根，芦根，山豆根，白茅根等八味药材组成，具有解表清里，解肌和营，调和气血，清热解毒，并有抗病毒、抑制细菌和消炎作用[1-3]。主要治疗伤风感冒、流行性感冒、扁桃体炎、猩红热等疾病所导致的发热，还可治疗不明原因发热等症。为了保证药品在贮藏及使用期间的质量控制，根据《医疗机构制剂注册管理办法》中关于申报资料的相关要求，以及《原料药与药物制剂稳定性指导原则》（《中国药典》2020年版四部通则9001）中口服液稳定性考察的有关内容，对五根汤口服液的初步稳定性进行了试验研究。内容包括制剂外观性状、鉴别、检查、相对密度、pH 值、含量测定、卫生学检查等指标、通过加速试验6个月和长期试验24个月，为确定五根汤口服液的有效期及储存条件提供依据。

1检测与方法

1.1仪器

LC-2010AHT 型高效液相色谱仪（日本岛津），岛津 LC solution 工作站；AUW220D电子分析天平（日本岛津）；TU-1221紫外-可见分光光度仪（北京普析通用）；数码超声波清洗机（广东固特超声股份有限公司）； BHS-4数显恒温水浴锅（上海驰唐电子有限公司）； HX-TLC-3H型薄层显色加热板（武汉恒信世纪科技有限公司）；ZF-20A型暗箱四用紫外分析仪[骥辉分析仪器（上海）有限公司]；SLD-I 型薄层显色喷雾泵（天津市思利达科技有限公司）；PHS-3E 型 pH 计（上海仪电科学仪器股份有限公司）；双槽展开缸（10 cm×10 cm，上海信宜仪器厂）；LRH-80F型细菌培养箱（上海量壹科学仪器有限公司）；MJX-80S 霉菌培养箱（上海旌派仪器有限公司）；硅胶G 薄层板（青岛海洋化工有限公司）。

1.2试剂与样品

葛根素对照品（中国食品药品检定院，110752-201816）；葛根对照药材（中国食品药品检定研究院121551-201404）；红花对照药材（中国食品药品检定研究院120907-201412）。板蓝根对照药材（中国食品药品检定研究院121177-201608）。苦参碱对照品（中国食品药品检定研究院110805-200508）。大黄对照药材（中国食品药品检定研究院120984-201202）。五根汤口服液中试样品三批（20190225、2020190226、20190228）为酒钢医院制备；中试样品试制规模均为10个处方量的生产规模，批量符合稳定性试验的要求，样品具有代表性，包装形式与规格：采用10ml 端肩管制口服液瓶包装，10mL/瓶×6支/盒。样品包装形式与拟上市包装一致。甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

1.3药材

试验用原药材及辅料来源见表1所列。

表1试验用原药材及辅料来源

按照中华人民共和国药典2020版一部标准对表1中所有中药饮片及辅料进行检验，结果均合格后方可制备制剂。

1.4观察指标[4-10]

1.4.1  考察项目

参照《原料药与药物制剂稳定性试验指导原则》（《中国药典》2020年版四部通则9001）对口服液稳定性重点考察项目要求，结合五根汤口服液稳定性的要求，重点考察五根汤口服液的外观性状、pH 值、鉴别项、微生物限度、相对密度以及主要成分的含量测定。

1.4.2 定性与定量

（1）性状：棕红色至棕褐色的液体；气微香；味甜，微苦。（2）定性测定：用 TLC 法对主要活性成分葛根、红花、大黄、山豆根、板蓝根的鉴别，在TLC 谱图中，样品溶

液和对照药材、对照品溶液在相同位置显相同颜色的斑点。（3）定量测定：采用高效液相色谱法测定口服液中葛根素的含量，本品每1mL含葛根以葛根素计，不得少于0.80（mg·mL-1）。（4）微生物限度：细菌小于100个/g；霉菌小于10个/g；不得检出大肠杆菌及活螨。（5）相对密度不小于1.00；pH 值要求在4～6。

1.4.3 稳定性试验

依据《中国药典》2020年版四部通则0181口服液剂项下：“除另有规定外，口服液应密封，置陰凉处贮存，口服液应澄清。在贮存期间不得有发霉、酸败、异物、变色、产生气体或其他变质现象，允许有少量摇支即易散的沉淀”。基于此规定，对五根汤口服液进行以下的稳定性试验项目。

（1）高温试验

试验方法：分别随机抽取本品三个批号各20支，除去外包装，置60℃温度下留样储存10 d 。在第0 d、第5 d 和第10 d 分别取样，按五根汤口服液稳定性考察项目进行观察与检测。所得结果与第0 d 的考察项目结果进行比较，考察五根汤口服液样品在高温试验条件下的稳定性。外观性状、pH 值、鉴别项、微生物限度、相对密度以及主要成分的含量测定结果见表2所列。

（2）高温试验小结

五根汤口服液在高温60℃条件下留样考察10 d，与第0 d 的观察及试验结果相比较，样品外观性状没有明显变化，未发现口服液出现发霉、酸败、异物、变色、产生气体或其他变质现象，各项试验考察指标基本无变化，样品稳定性较好，说明五根汤口服液在60℃条件下是比较稳定的。

1.4.4 强光照射试验

（1）试验方法：分别随机抽取本品三个批号各20支，除去内包装，置强光照射试验箱中，于照度为4500Lx±500Lx （25℃）的条件下留样放置10 d，在第0 d、第5 d 和第10 d 分别取样，按五根汤口服液稳定性考察项目进行观察与检测。所得结果与第0 d 的考察项目结果进行比较，考察五根汤口服液样品在强光照射试验条件下的稳定性。外观性状、pH 值、鉴别项、微生物限度、相对密度以及主要成分的含量测定结果见表3所列。

（2）强光试验小结：五根汤口服液在照度为4500 Lx±500 Lx强光条件下留样考察10 d，与第0 d 的观察及试验结果相比较，样品的外观性状没有发生明显变化，未发现口服液出现发霉、酸败、异物、变色、产生气体或其他变质现象，各项试验考察指标基本无变化，样品稳定性较好，说明五根汤口服液在强光试验条件下是比较稳定的。

1.4.5 加速试验

（1）试验方法：将本品三批（批号：20190225、

2020190226、20190228）模拟市售包装，在温度40℃±2℃，相对湿度75%±5%条件下留样放置6个月，试验期间分别在第1个月、2个月、3个月、6个月末分别取样一次，按五根汤口服液稳定性考察项目进行观察与检测。所得结果与第0月的考察项目结果进行比较，考察五根汤口服液样品在加速试验条件下的稳定性。外观性状、pH 值、鉴别项、微生物限（2）加速试验小结：本品的加速试验结果表明，五根汤口服液在模拟市售包装保护的情况下，在加速试验（40℃±2℃、RH 75%±5%）条件下放置6个月，与0月数据比较，样品的各项稳定性考察项目无明显变化。加速试验是通过加快模拟市售包装中药品的化学或物理变化速度来考察药品稳定性。试验结果表明，五根汤口服液在加速试验条件下稳定性良好。

1.4.6 长期试验

（1）试验方法将本品三批（批号：20190225、

2020190226、20190228）模拟上市包装样品模擬市售包装，在温度25℃±2℃，相对湿度60%±10%条件下进行试验，取样时间点在第一年3个月末、6个月末、9个月末、12个月末分别取样一次，第二年6个月末、12个月末分别取样一次。按五根汤口服液稳定性重点考察项目（外观性状、pH 值、薄层色谱鉴别项、微生物限度、相对密度和主要成分含量测定）检测。结果与0月的数据进行比较，观察五根汤口服液样品在长期试验条件下的稳定性，试验结果见表5所列。

（2）长期试验小结在长期实验（25℃±2℃，相对湿度60%±10%）条件下放置24个月，五根汤口服液3批样品的观性状、pH 值、相对密度、薄层色谱鉴别、微生物限度和含量测定等各项考察指标没有显著性变化，说明本品在温度25℃±2℃，相对湿度60%±10%条件下性质基本稳定。

3讨论

根据《医疗机构制剂注册管理办法》对医院中药制剂申报资料的要求，以及《原料药物与制剂稳定性试验指导原则》（《中国药典》2020年版四部通则9001）中制剂稳定性考察的有关内容，对五根汤口服液的初步稳定性进行了试验研究。本品经高温试验条件下（60℃）10 d、强光试验（4500 Lx±500 Lx）条件下照射10 d，各项观察指标基本稳定。加速试验（40℃±2℃、RH 75%±5%）6个月的考察结果表明，五根汤口服液3批样品在模拟上市包装条件下性质基本稳定，表明五根汤口服液在设定的试验条件下稳定性良好。长期试验（25℃±2℃，相对湿度60%±10%）24个月的考察结果表明五根汤口服液3批样品在模拟上市包装条件下性质基本稳定，说明五根汤口服液直接接触药品的包装材料能够保证制剂在有效期内质量稳定，相容性好，对制剂质量稳定性无显著影响。根据稳定性试验结果，本品的有效期初步确定为24个月。贮存条件确定为：密封保存。

参考文献：

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