发酵中草药对青脚麻鸡生长性能、血液生化指标及抗氧化能力的影响

谢苗苗, 李 笑, 胡 建, 阿依姑·苏来曼,白俊宇, 武慧敏, 胡忠泽,2*, 王夺标, 孟 玲

(1.安徽科技学院 动物科学学院,安徽 凤阳 233100;2.动物营养调控与健康安徽省重点实验室,安徽 凤阳 233100; 3.安徽标王农牧股份有限公司,安徽 淮北 235000; 4.安徽省正大源饲料集团有限公司 安徽 淮北 235000)

自2020年7月1日起,我国全面实施饲料禁抗,为保障畜禽养殖业的生产效率和品质,许多企业开始将目光投向天然植物提取物、肠道健康剂、酸化剂、消化酶等饲料添加剂。这些添加剂既可以提高动物的免疫力和生产性能,又可以减少食品中药物残留的问题。其中,天然植物提取物是比较热门的饲料添加剂之一,这些提取物可以调节动物肠道微生物群落,增强肠内免疫屏障,提高消化吸收率,从而提高动物的食欲和生产性能。其中中草药及其提取物以其低毒副作用及具有的营养性、独特天然性和生物活性,受到畜牧工作者的重视[1]。中草药成分十分复杂,主要药用成分包括但不限于具有抗应激、抗菌及增强机体免疫作用的黄酮类、生物碱类、多糖类、皂苷类、有机酸类、挥发油等多种活性成分[2]。中药炮制的一种重要方法是利用微生物进行发酵,在发酵过程中,微生物代谢产生多种胞外酶,如木质素酶、纤维素酶和果胶酶等,能催化降解植物细胞壁,提高细胞膜的通透性,能使中草药活性物质释放更充分或被代谢得到活性更好的物质[3],还能将中草药中的大分子物质分解成易吸收的小分子物质,从而提高药物疗效[4]。据谷巍等[5]报道,经发酵后,中草药中某些成分含量提高了1～4倍。王晓冰等[6]研究发现,黄芪发酵后所产生的多糖类物质,最多可达到传统萃取技术的5倍,且经过动物试验证实使用传统制药用量的1/28发酵黄芪的用量,就具有同等药效。苏贵龙[7]将黄芪利用非解乳糖链球菌FGM发酵后,其根茎多糖、皂苷、黄酮类等主要活性成分的浸出率可得到有效提高。金顺义等[8]研究发现,发酵后的中草药较未发酵的中草药提高了生物碱、皂苷类、黄酮类和多糖类的含量。高鹏辉等[9]试验后发现,将发酵过的中药材加入饲粮中,可使仔猪的日平均食量增加、腹泻率降低、免疫力增强。姜莱等[10]研究表明,使用发酵中草药可以提高肉鸡的生长性能,改善血清指标水平,呈现和抗生素相似的促生长效果。本试验复方中草药由黄芪、党参、当归、陈皮、茯苓、白术、香附、甘草等配伍组成,再经植物乳杆菌、黑曲霉、枯草芽孢杆菌、酵母菌等发酵处理,探究发酵中草药对青脚麻鸡的生长性能、抗氧化能力及血清生化指标的影响,为发酵中草药在青脚麻鸡生产中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验药物 购自亳州市蕊苑花茶有限责任公司的中药材(黄芪、当归、党参、白术、陈皮、甘草、茯苓、香附)按配比将中药材粉碎后经40目筛,对经筛后的中药材进行发酵处理,其初始水分37.33%,其中菌液接种量为4%,菌种质量配比为黑曲霉∶乳酸菌∶枯草芽孢杆菌∶酵母菌=3∶3∶2∶1,将其置于带有单向呼吸阀的发酵袋中进行发酵,初始温度为29.9 ℃,发酵时间为3 d;抗菌肽(0.6 g/kg酵母肽,英惠尔生物技术有限公司);99%苯甲酸钠(瑞多食品公司)。

1.1.2 试验动物 1日龄雄性青脚麻鸡192只,体质量为(35.72±0.52) g,购自安徽标王农牧股份有限公司。

1.1.3 试验器材 卓越450全自动生化分析仪(上海科华实验系统有限公司);Multiskan Go 1510全波长酶标仪(赛默飞世尔科技有限公司);抗氧化试剂盒(南京建成生物工程研究所)

1.2 试验设计

将192只1日龄青脚麻鸡随机分成4组,组内设4个重复,12只鸡为1个重复,A组饲喂基础饲粮作为阴性对照,B组按照每千克日粮添加34 g的抗菌肽以及1.5 g的苯甲酸作为阳性对照,C组基础饲粮中添加1%未发酵中草药,D组基础日粮中添加1%发酵复方中草药。

1.3 饲养管理

试验鸡采用4层立式笼养,试验周期为90 d,试验期内自由采食、饮水,24 h光照,常规疫苗免疫。饲养管理按照NY/T 1871—2010进行。

1.4 试验日粮及其组成

试验饲粮为粉状料,其组成和营养水平见表1。

表1 基础日粮组成和营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air dry basis)

1.5 样品采集与检测

1.5.1 生长性能 试验期内记录每只试验青脚麻鸡的1、60、90 d的体质量,计算平均日增重(ADG)。根据每周每个重复的喂料量,计算平均日采食量(ADFI)。并根据ADG和ADFI计算料重比(F/G)。

1.5.2 血清生化指标 在试验第60、90天,每重复随机取3只鸡,禁食12 h后翅下静脉采血,将非抗凝采血管于3 500 r/min离心10 min,分离血清后按照全自动生化分析仪说明书检测白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、白球比(ALB/GLB,A/G)、总蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、葡萄糖(GLU)、乳酸脱氢酶(LDH)、尿酸(UA)等指标。

1.5.3 抗氧化指标 血清抗氧化指标按试剂盒说明书进行测定。

1.6 数据处理

试验数据使用SPSS 21.0软件进行单因素方差分析,用Duncan氏法进行多重比较检验,结果以 “平均值±标准误”表示,P<0.05为差异显著。

2 结果与分析

2.1 饲粮中添加发酵复方中草药对青脚麻鸡生长性能的影响

由表2可知,在1～60日龄,与A组相比,D组的ADG升高13.58%(P<0.05),F/G降低11.48%(P<0.05),ADFI升高0.4%(P>0.05);与B组相比,D组的ADG、ADFI、F/G分别降低了0.06%、5.13%、4.87%(P>0.05),但未达到显著性水平;与C组相比,D组的ADFI、F/G分别降低了0.25%、2.33%,ADG升高了2.17%,但未达到显著性水平(P>0.05)。

在61～90日龄时,与A组相比,D组的ADFI、F/G分别降低了2.50%、8.04%,ADG升高了2.43%,但未达到显著性水平(P>0.05);与B组相比,D组的ADG、ADFI分别升高了4.47%、6.17%, F/G降低了1.38%,但达到显著性水平(P>0.05);与C组相比,D组的ADG、F/G分别降低了0.09%、4.98%,ADFI升高了1.59%,但未达到显著性水平(P>0.05)。

2.2 饲粮中添加发酵复方中草药对青脚麻鸡血清生化指标的影响

由表3可知,在60日龄时,与A组相比,D组血清中ALB/GLB显著降低(P<0.05),TG浓度显著升高(P<0.05),其余各指标均无显著性(P>0.05);与B组相比,D组血清中ALB、GLB、TP质量浓度及AST活性显著降低(P<0.05),TG浓度显著升高(P<0.05),其余各指标均无显著性(P>0.05);与C组相比,D组血清ALB、GLB、TP质量浓度及AST活性显著降低(P<0.05),其余各指标均无显著性(P>0.05)。在90日龄时,与A组相比,D组血清中ALB/GLB、TC浓度分别降低7.5%、15.90%,但均未达到显著性水平(P>0.05);与B组相比,D组血清中GLU浓度量显著升高(P<0.05),UA浓度显著降低(P<0.05),其余各指标均无显著性(P>0.05);与C组相比,D组血清LDH活性显著降低(P<0.05),其余各指标均无显著性(P>0.05)。

表3 饲粮中添加发酵复方中草药对青脚麻鸡血清生化指标的影响Table 3 Effects of compound fermented Chinese herbal medicines added to the diet on the serum biochemical indexes of partridge shank chickens

2.3 饲粮中添加发酵复方中草药对青脚麻鸡抗氧化能力的影响

由表4可知,在60日龄时,与A组相比,D组血清MDA浓度下降15.11%(P>0.05),T-AOC、GSH-PX、CAT、SOD活性分别升高5.43%、11.48%、4.18%、3.01%(P>0.05);与B组相比,D组MDA浓度,T-AOC、GSH-PX、CAT、SOD活性分别下降10.06%、3.31%、1.98%、7.64%、3.71%(P>0.05);与C组相比,D组MDA浓度及SOD活性分别下降4.22%、2.81%(P>0.05),T-AOC、GSH-PX及CAT活性分别升高3.10%、6.59%、1.49%(P>0.05)。在90日龄时,与A组相比,D组血清MDA浓度下降19.77%(P>0.05),T-AOC、GSH-PX、CAT、SOD活性分别升高2.22%、5.41%、34.02%、15.19%(P>0.05);与B组相比,D组MDA浓度,T-AOC、CAT、SOD活性分别下降5.51%、3.16%、4.88%、4.44%(P>0.05),GSH-PX活性升高0.23%(P>0.05);与C组相比,D组MDA浓度下降2.22%(P>0.05),T-AOC、GSH-PX、CAT、SOD活性分别升高1.29%、3.35%、5.14%、4.03%(P>0.05)。

表4 饲粮中添加发酵复方中草药对青脚麻鸡抗氧化能力的影响Table 4 Effects of compound fermented Chinese herbal medicines added to the diet on the antioxidant capacities of partridge shank chickens

3 结论与讨论

3.1 复方发酵中草药对青脚麻鸡生长性能的影响

刘墨晗等[11]研究表明,在饲粮中添加使用复方发酵中草药可以提高绿壳蛋雏鸡的生长性能,促进雏鸡的生长发育。申红春[12]的研究证实,在饲粮里加入使用1%的复方发酵中草药,对天府肉鸭的生长性能有提高作用。李汝等[13]研究发现,在育肥猪前期,益生菌发酵中草药对生长性能有显著改善作用,但在中晚期,作用较小。张涛等[14]研究表明,酶发酵后的中草药可改善仔猪生长性能。本试验中,添加1%复方发酵中草药对青脚麻鸡的生长性能并没有产生显著影响,但在一定程度上提高了ADG和ADFI,降低了F/G,这与前人的研究成果并不完全一致,可能是由于中草药配方、发酵菌种组成及发酵条件的不同,导致结果不完全一致。本研究中与阳性对照组相比并无显著性,但较阳性对照组未降低其效果,表明其可作为抗菌肽同等替代品。

3.2 复方发酵中草药对青脚麻鸡血清生化指标的影响

动物机体的生长状况和代谢水平可以通过血清生化指标得到直接反映[15]。血液中ALT和AST是动物体内参与体内转氨基作用的两种活力最强的转氨酶[16]。通常在正常范围内,血清中ALT和AST的活性提高,不仅对动物氨基酸合成有促进作用,而且对蛋白质的代谢效率也有改善作用[17]。解军亮等[18]将1%复方发酵中草药添加在基础日粮中,可以提高断奶仔猪ALT活性及AST活性。本研究结果表明,饲粮中添加复方发酵中草药,青脚麻鸡血清中ALT与AST活性均升高,这与解军亮研究相同。而血清总胆固醇的含量又能反映出体内脂质的代谢情况,血清中总胆固醇含量越高,心脑血管、肾脏疾病的发生率越高[19]。范作良等[20]的研究表明,将发酵的中草药制剂添加到饲粮中,能使蛋鸡血清TC含量明显降低。本试验结果表示,D组血清中TC含量降低,这与范作良的研究结果一致。血清中白球蛋白比是血清中白蛋白与球蛋白含量的比值,反映了机体的免疫情况的强弱,同时血清TP、ALB含量也反映了动物机体中蛋白质含量的代谢情况[21]。邹志恒等[22]研究发现,在日粮中添加0.4%的发酵中草药可以显著提高仔猪血清中球蛋白和总蛋白的含量。本试验结果显示,在饲粮中添加发酵复方中草药可以显著降低白球蛋白比,有效提高机体的免疫功能,这与前人结果一致。本研究中发酵中草药与阳性对照组相比,部分结果并未达到显著改善效果,但仍有改善作用,如ALT活性提高,UA含量的降低均可以改善机体的脂质代谢,这可能是由于配方成分的原因,从而使结果未达显著性,因此可在配方基础上稍作调整使其达到更好的效果。

3.3 复方发酵中草药对青脚麻鸡抗氧化能力的影响

机体的抗氧化能力在很大程度上反映动物的健康状况,其血清中的T-AOC,SOD、GSH-PX、CAT和MDA作为抗氧化防御系统的重要组成部分,对氧化和抗氧化剂之间的稳态具有非常显著的影响[23]。T-AOC代表了动物身体整体的抗氧化性;机体内清除活性氧的抗氧化酶有SOD和GSH-PX,SOD能清除超氧阴离子自由基,GSH-PX能清除过氧化物和羟基,促使其代谢处于动态平衡状态[24];MDA是脂质过氧化反应生物氧化损害程度的最终产物之一[25]。张敏等[26]研究表明,添加0.25%复方银杏叶发酵中草药制剂,可以提高21日龄肉鸡的血清中T-AOC含量。鲍菊等[27]报道了在饲粮中添加0.5%发酵中草药显著提高了断奶仔猪血清中T-AOC、CAT、SOD、GSH-PX活性。董延江等[28]将3%发酵中药添加到饲粮中,可使断奶仔猪血清中GSH-PX活性显著提高。杨濛等[29]研究在基础饲粮中添加了0.5%富锗发酵中药制剂,发现其显著降低了血清的MDA含量,且显著升高了SOD、GSH-PX、T-AOC、CAT活性。本研究结果表明,饲粮添加复方发酵中草药可以提高肉鸡血清T-AOC、CAT、SOD、GSH-PX活性,降低了血清MDA含量,与鲍菊、杨濛等的研究结果一致。这是由于配方中黄芪、党参等中草药富含丰富的黄酮类物质,而发酵可以促进黄酮类物质的释放,从而提高机体的抗氧化能力。本研究中抗氧化指标相对于阳性对照组来说,有所改善,综合以上结果发现其可以作为抗生素替代品应用于养鸡生产中。

综上,饲粮添加1%发酵中草药,可提高青脚麻鸡血清ALT和AST活性,降低白蛋白/球蛋白的比值和TC含量,使青脚麻鸡部分血清生化指标得到改善。饲粮添加1%发酵中草药,能够提高肉鸡血清T-AOC、CAT、SOD、GSH-PX活性,降低血清MDA含量,从而改善青脚麻鸡的抗氧化功能。