急性支气管肺炎患儿EOS%、CCR3、Eotaxin与病情严重程度的关系

王雅玲 黄运丽 田 密 王顺兰 肖 莉

（1.洪湖市人民医院儿科，湖北 洪湖 433200；2.洪湖市中医医院内科，湖北 洪湖 433200；3.洪湖市人民医院内科，湖北 洪湖 433200）

小儿支气管肺炎是儿科常见疾病，若未得到及时控制，可能会引发其他重要器官或组织损伤，严重影响儿童健康[1]。因此，寻找敏感的血清学指标对评估支气管肺炎患儿病情发展具有重要意义。气道炎症一般以嗜酸性粒细胞（eosinophil，EOS）浸润为主[2]。发生炎性浸润时，趋化因子会与靶细胞相应受体特异性结合，发挥组织定位、再循环等病理生理作用[3]。有研究发现，CC趋化因子受体3（CC chemokine receptor 3，CCR3）主要表达于EOS表面，通过与嗜酸性粒细胞趋化因子（eotaxin，Eotaxin）特异性结合来发挥作用，可使炎症细胞向病灶聚拢，经活化、诱导，使更多炎症因子被释放，促进炎症发生、发展[4]。有研究结果显示，EOS、CCR3、Eotaxin分别在支气管哮喘等呼吸系统疾病患儿中高表达[5-6]，但其在支气管肺炎患儿中的表达水平及与患儿病情严重程度的关系尚不清楚。为此，本研究拟探讨血清CCR3、Eotaxin水平和嗜酸性粒细胞百分比（eosinophil percentage，EOS%）与急性支气管肺炎患儿疾病严重程度的关系。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2019年8月—2021年6月洪湖市人民医院收治的急性支气管肺炎患儿126例（支气管肺炎组），其中男72例、女54例，年龄（5.97±1.22）岁。纳入标准：1）均符合第8版《诸福棠实用儿科学》[7]中急性支气管肺炎相关诊断标准；2）年龄≤12岁；3）均为首次治疗，入院前未使用糖皮质激素、免疫制剂、大环内酯类抗菌药物。排除标准：1）合并血液系统疾病或感染性疾病；2）合并肿瘤、免疫系统疾病；3）合并其他肺部疾病，如哮喘、慢性支气管肺炎、肺结核；4）合并心、肝、肾等重要脏器功能不全。根据急性支气管肺炎患儿入院时临床肺部感染评分（clinical pulmonary infection score，CPIS）[8]将126例患儿细分为轻症组（CPIS评分≤6分）[81例，其中男45例、女36例，年龄（6.04±1.29）岁]和重症组（CPIS评分>6分）[45例，其中男27例、女18例，年龄（5.89±1.17）岁]。另选取同期洪湖市人民医院体检健康儿童60名（正常对照组），其中男36名、女24名，年龄（5.94±1.52）岁。入选标准：1）年龄≤12岁；2）体格检查均正常；3）配合度良好，可完成相关研究。支气管肺炎组与正常对照组年龄、性别差异均无统计学意义（P>0.05）。本研究获得洪湖市人民医院伦理委员会批准（LS2019-032），所有研究对象家属或监护人均知情同意，并自愿签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 血清CCR3、Eotaxin水平检测

采集支气管肺炎患者确诊后次日、正常对照者体检当日的清晨空腹肘静脉血5 mL，4 ℃ 1 000×g离心10 min，分离血清，-20 ℃保存，1周内统一完成检测。采用酶联免疫吸附试验检测血清CCR3、Eotaxin水平。人CCR3试剂盒购自上海联迈生物工程有限公司[批号M100975；线性范围4.00～50.00 pg/mL，最低检测限为2.12 pg/mL，批间变异系数（coefficient of variation，CV）<15%，批内CV<10%，标准曲线r值为0.996]；人Eotaxin试剂盒购自北京百奥莱博科技有限公司（批号BL60172；线性范围63.10～300.00 pg/mL，最低检测限为13.80 pg/mL，批间CV<15%，批内CV<10%，标准曲线r值为0.993）。检测仪器为FT-SY96A全自动酶标仪（山东风途物联网科技有限公司）。严格按仪器和试剂盒说明书进行操作。

1.2.2 外周血EOS%检测

采用真空乙二胺四乙酸二钾抗凝管采集所有研究对象静脉血3 mL。采用XE-2100全自动血液分析仪（日本希森美康公司）及配套试剂检测EOS%。

1.2.3 肺功能检测

采用FGC-A+型全自动肺功能检测仪（安徽安科生物工程股份有限公司）检测急性支气管肺炎患儿肺功能，包括潮气量（tidal volume，VT）、呼吸频率（respiratory rate，RR）、达峰容积比（the ratio of volume to peak expiratory flow to total expiratory volume，VPTEF/VE）、达峰时间比（the ratio of time to peak tidal expiratory flow to total expiratory time，TPTEF/TE）。检测前清除患儿鼻咽部位分泌物，让患儿自然睡眠或使用10%水合氯醛对患儿进行催眠，取仰卧位，将仪器面罩扣在患儿口鼻上，压紧边缘防止漏气，每例患儿检测5次，取至少3次有效数据，检测结束后，取测量结果平均值。

1.3 统计学方法

采用SPSS 25.0软件进行统计分析。呈正态分布的计量资料以±s表示，2个组之间比较采用t检验。计数资料以例或率表示，组间比较采用χ2检验。采用Pearson相关分析评估各项指标之间的相关性。采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评价各项指标诊断重症急性支气管肺炎的效能。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 支气管肺炎组和正常对照组EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平比较

支气管肺炎组EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平均显著高于正常对照组（P=0.000）。见表1。

表1 支气管肺炎组和正常对照组EOS%、血清CCR3、Eotaxin水平比较

2.2 轻症组和重症组血清CCR3、Eotaxin水平、EOS%、肺功能指标比较

与轻症组比较，重症组血清CCR3、Eotaxin水平和EOS%、RR显著升高（P<0.01），VT、VPTEF/VE、TPTEF/TE显著降低（P<0.01）。见表2。

表2 轻症组和重症组EOS%、血清CCR3、Eotaxin水平及肺功能指标比较

2.3 急性支气管肺炎患儿EOS%、CCR3、Eotaxin与肺功能指标的相关性分析

急性支气管肺炎患儿EOS%、CCR3、Eotaxin与RR呈正相关（P<0.05），与VPTEF/VE、TPTEF/TE呈负相关（P<0.05），与VT无相关性（P>0.05）。见表3。

表3 急性支气管肺炎患儿EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平与肺功能指标的相关性

2.4 EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平对重症急性支气管肺炎患儿的诊断价值

ROC曲线分析结果显示，以轻症组为对照，EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平单项检测和联合检测（以3项指标均阳性为联合检测阳性）诊断重症急性支气管肺炎的曲线下面积（area under curve，AUC）分别为0.861、0.762、0.826、0.931。见表4、图1。

图1 EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平诊断重症急性支气管肺炎的ROC曲线

表4 EOS%、血清CCR3、Eotaxin水平对重症急性支气管肺炎患儿的诊断价值

3 讨论

由EOS、淋巴细胞和巨噬细胞等分泌的细胞因子、炎症介质等产生的浸润性炎症反应是支气管肺炎的病理学基础，其中EOS是引起支气管肺炎的重要效应细胞之一，在炎症的发展过程中起核心作用[9-10]。有研究认为，肺泡或上皮损伤可引起炎症细胞的激活，导致白细胞介素33、白细胞介素25和胸腺基质淋巴蛋白的分泌，这些上皮细胞因子可刺激2型固有淋巴细胞并使辅助性T细胞2（T helper cell 2，Th2）极化，引起肺部EOS激活、聚集，上述细胞因子的存在又进一步放大了EOS的激活效应和Th2极化，加重患者病情[11]。Eotaxin是EOS高度特异性的趋化因子，正常情况下，Eotaxin主要由呼吸道上皮细胞产生；当支气管上皮细胞处于炎症状态时，Eotaxin主要由巨噬细胞和EOS分泌[12]。Eotaxin的活性功能受Eotaxin受体CCR3的调控。有研究结果显示，Eotaxin可与EOS表面的特异性受体CCR3结合，通过激活丝裂原活化蛋白激酶途径使EOS脱颗粒，从而使EOS升高[13]。徐凌云等[14]的研究结果显示，支气管哮喘患儿血清Eotaxin水平明显高于正常对照组和肺炎组（P<0.05），且血清Eotaxin可在一定程度上反映呼吸道炎症状态。有研究结果显示，慢性喘息组、肺炎组、正常对照组EOS%依次降低（P<0.05），EOS对儿童支气管哮喘具有较高的诊断价值[15]，与本研究结果相似。本研究结果显示，急性支气管肺炎患儿EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平均显著高于正常对照者（P=0.000），且重症组EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平显著高于轻症组（P=0.000），表明EOS%、CCR3和Eotaxin可在一定程度上反映急性支气管肺炎患儿病情的严重程度。ROC曲线分析结果显示，EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平单项检测和联合检测诊断重症急性支气管肺炎的AUC分别为0.861、0.762、0.826、0.931，提示EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平对重症急性支气管肺炎均有一定的诊断价值，联合检测的诊断效能更高。

本研究结果还显示，与轻症组相比，重症组VT减少，RR明显增快，表明随着支气管肺炎病情的加重，患儿肺内通气/血流比例失调，发生气体弥散障碍，导致低氧血症或高碳酸血症，机体代偿性RR增加，与李春芳等[16]支气管肺炎患儿每分钟VT降低的结论相符。VPTEF/VE、TPTEF/TE是反映气道阻塞，尤其是小气道阻塞的重要指标[17]，数值越低，表明小气道阻塞越严重。本研究Pearson相关分析结果显示，EOS%、CCR3和Eotaxin与RR呈正相关（P<0.05），与VPTEF/VE、TPTEF/TE呈负相关（P<0.05），表明外周血EOS%和血清CCR3、Eotaxin水平可在一定程度上反映急性支气管肺炎患儿肺功能的变化，具有较高的临床价值。

综上所述，急性支气管肺炎患儿血清CCR3、Eotaxin水平和EOS%显著升高，可在一定程度上反映患儿肺功能状态，与患儿病情的严重程度密切相关，或可作为临床判断急性支气管肺炎病情发展的血清学指标。