平卧菊三七根中化学成分的研究

温坚

（吉安市市场监督管理局，江西吉安 343000）

平卧菊三七（Gynuraprocumbens(Lour.) Merr.）属攀援草本植物，菊科，约20 种，主要分布于中国、马来西亚、泰国、印度尼西亚、韩国、菲律宾。2012 年5 月被国家卫生部批准为新资源普通食品。平卧菊三七茎叶营养丰富，富含绿原酸、异绿原酸、粗多糖等成分。据《傣医药》记载，平卧菊三七具有散瘀血、消肿痛、活血生肌之功能效果；现代药理研究表明，平卧菊三七具有保护肝脏[1]、降低血压[2]、调节血脂和降低血糖功效[3]，同时还具有抗炎症、镇痛[4-7]和抗癌[8-10]等多种药理活性。平卧菊三七叶可生吃、清炒、凉拌，是一种高经济价值的可食用植物。大量研究发现平卧菊三七叶中含有黄酮类、鞣质、皂苷、萜类、生物碱等活性物质[11]，但对其根部的研究仍然较少，且平卧菊三七根往往作为一种农业废弃物被任意丢弃。本研究以平卧菊三七根为研究对象，通过色谱、波谱等手段考察其化学成分，以期为平卧菊三七根的充分利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

INOVA-600 型核磁共振仪，美国Varian 公司；prep 150 制备型液相色谱仪，美国Waters 公司；MVP型HPLC分析色谱仪，配备VP-ODS C18色谱柱（50 m×4.6 mm，5.0 μm），日本岛津公司；Sephadex LH-20，美国GE 公司。乙腈、甲醇，色谱纯，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；乙酸乙酯、无水乙醇、无水甲醇、石油醚、正己烷、丙酮、氯仿、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼等，分析纯，国药集团化学试剂有限公司。

1.2 药材来源

平卧菊三七根由江西省赣州市江西华紫仁农业开发公司提供，其样品标本（GP-010）放置在吉安市市场监督管理局标本室。

1.3 实验方法

将干燥的平卧菊三七根（5 kg）粉碎，然后用95%乙醇（10 L）在室内提取3 次。提取液经过滤减压浓缩后得到粗提物，将粗提物溶解于丙酮溶液中，采用干法拌硅胶进行柱色谱分离。首先，通过硅胶柱（100 ～200 目）进行粗分离，采用流动相石油醚-乙酸乙酯（50 ∶1 →25 ∶1 →10 ∶1 →5 ∶1，体积比，下同）→二氯甲烷-甲醇（50 ∶1 →10 ∶1 →5 ∶1 →0 ∶1）梯度洗脱，得到9 个组分（A ～I）。组分A继续进行硅胶柱（200 ～300 目）分离，并用石油醚-乙酸乙酯（10 ∶1）洗脱，在甲醇中结晶得到化合物1（25.3 mg）。组分B 继续进行硅胶柱（200 ～300目）分离，并用石油醚-乙酸乙酯（50 ∶1）洗脱，在甲醇中结晶得到化合物2（26.0 mg）和化合物3（27.2 mg）。组分D 继续进行硅胶（200 ～300 目）柱色谱分离，并用二氯甲烷-甲醇（50 ∶1 →5 ∶1）洗脱，得到5 个亚组分（D1～D5），分别从D1和D3中结晶得到化合物4（26.1 mg）和化合物5（13.8 mg）。组分F 继续上硅胶柱（200 ～300 目）分离，并用石油醚-丙酮（10 ∶1 →2 ∶1）进行洗脱，在甲醇中结晶得到化合物6（30.2 mg）和化合物7（37.8 mg）。组分H 和组分I 首先过Sephadex LH-20 柱色谱，洗脱剂为甲醇-水（4 ∶1 →1 ∶1），然后采用制备HPLC进行分离得到化合物8（19.5 mg）和9（16.7 mg）。

2 结果与分析

化合物1：白色无定形粉末，ESI-MSm/z415[M+H]+，分子式为C29H50O（理论分子量为414.71）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：5.40（1H，dd，J=5.2、2.8 Hz，H-6），3.53（1H，m，H-3），1.06（3H，s，H-21），0.95（3H，d，J=6.0 Hz，H-29），0.86 （3H，t，J=7.2 Hz，H-27），0.83（3H，d，J=6.6 Hz，H-26），0.83（3H，d，J=6.6 Hz，H-29），0.64（3H，s，H-18）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：140.38（C-5），122.79（C-6），71.33（C-3），56.92（C-14），55.71（C-17），50.21（C-9），45.57（C-24），42.08（C-13），39.14（C-20），39.11（C-12），39.05（C-4），37.49（C-10），37.02（C-1），34.15（C-22），31.42（C-8），31.31（C-2），30.23（C-25），29.92（C-7），28.32（C-16），26.84（C-23），25.88（C-15），24.04（C-28），20.87（C-21），20.73（C-11），20.12（C-27），20.00（C-26），19.88（C-19），13.14（C-18），13.03（C-29）。以上数据与文献[12]报道的结果一致，故鉴定为β-谷甾醇。

化合物2：白色无定形粉末，ESI-MSm/z577[M+H]+，分子式为C35H60O6（理论分子量为576.85）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：5.66（1H，m，H-6），5.05（1H，brs，H-1′），4.44（1H，t，H-3），2.33（1H，s，H-9），1.07（1H，d，J=6.3 Hz，H-21），0.96（1H，d，J=6.3 Hz，H-27），0.95（1H，s，H-19），0.94（1H，d，J=5.4 Hz，H-26），0.90（1H，s，H-29），0.67（1H，s，H-18）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：141.32（C-5），122.28（C-6），103.32（C-1′），79.03（C-3′），78.94（C-5′），78.47（C-3），75.82（C-2′），72.15（C-4′），63.21（C-6′），56.93（C-14），56.58（C-17），50.65（C-9），46.43（C-24），42.68 （C-13），40.28（C-12），38.42（C-4），37.34（C-1），36.78（C-10），34.53（C-20），32.58（C-22），31.78（C-7），30.62（C-8），29.38（C-2），28.87（C-25），26.78（C-16），24.87（C-23），23.76（C-15），21.68（C-28），20.42（C-11），20.15（C-27），19.82（C-26），19.57（C-19），19.43（C-21），12.48（C-29），12.37（C-18）。以上数据与文献[13]报道的相关数据一致，故鉴定为胡萝卜苷。

化合物3：白色无定形粉末，ESI-MSm/z413 [M+H]+，分子式为C29H48O（理论分子量为416.24）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：5.27（1H，d，J=2.9、2 Hz，H-23），5.14（1H，dd，J=13.8、6.8 Hz，H-22），5.01（1H，d，J=8.4 Hz，H-6），3.36（1H，m，H-3），1.01（3H，d，J=6.6 Hz，H-21），0.85（3H，d，J=6.4 Hz，H-29），0.83（6H，m，H-26，27），0.80（3H，s，H-19），0.55（3H，s，H-18）。（2）13C-NMR（101 MHz，CDCl3）。δ：140.63（C-5），138.17（C-22），129.15（C-23），121.57（C-6），71.67（C-3），56.69（C-14），55.89（C-17），51.11（C-24），50.02（C-9），45.72（C-4），42.14（C-13），40.35（C-20），39.60（C-12），37.13（C-1），36.38（C-10），33.82（C-7，8），31.78（C-2），31.54（C-25），29.04（C-16），25.97（C-28），24.20（C-15），22.94（C-11），21.01（C-26），19.68（C-21），19.26（C-19），18.88（C-27），18.65（C-29），11.46（C-18）。以上数据与文献报道基本一致[14]，故确定该化合为β-豆甾烯醇（β-stigmasterol）。

化合物4：白色无定形粉末，ESI-MSm/z415[M+H]+，分子式为C29H50O（理论分子量为414.54）。（1）1H NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：0.68（3H，s，Me-18），0.91（3H，d，J=6.5 Hz，Me-21），0.80 ～0.87（9H，m，Me-26,27,29），1.01（3H，s，Me-19）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：211.14（C-3），56.34（C-17,14），52.36（C-9），46.72（C-5），45.20（C-24），44.21（C-4），43.12（C-13），39.99（C-12），38.99（C-1），38.29（C-2），36.48（C-20），35.46（C-8），35.15（C-10），34.66（C-22），31.11（C-7），29.47（C-6，25），28.35（C-16），27.16（C-23），24.67（C-15），23.66（C-28），21.05（C-11），19.89（C-26），19.13（C-27），18.78（C-21），12.09（C-18,19），11.39（C-29）。以上数据与文献报道基本一致[15]，故确定该化合物为5α-stigmastna-3-one。

化合物5：黄色的油状物，ESI-MSm/z294 [M]+，分子式为C19H34O2（理论分子量为294.47）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：5.35（4H，m，H-9，H-10，H-12，H-13），3.66（3H，s，-OCH3），2.77（2H，t，J=6.8 Hz，H-11），2.30（2H，t，J=7.2 Hz，H-2），2.04（4H，m，H-8,14），1.60（2H，m，H-3），1.25 ～1.37（m，H-4 ～H-7，H-15 ～H-17），0.88（3H，t，J=6.8 Hz，H-18）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：175.86（C-1），130.80（C-9,10），129.75（C-12,13），51.59（-OCH3），34.39（C-2），32.54（C-8），31.87（C-14），29.96 ～22.88（C-3 ～C-7和C-15 ～C-17），14.02（C-18）。以上数据与文献报道基本一致[16]，故确定该化合物为亚油酸甲酯（methyl linoleate）。

化合物6：白色无定形粉末，ESI-MSm/z343[M+H]+，分子式为C22H46O2（理论分子量为342.15）。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：4.80（1H，s，H-1），3.51（3H，s，-OCH3），1.63（2H，s，H-20），0.90（3H，s，H-21）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：100.00（C-1），50.84（-OCH3），31.92（C-2），29.71（C-3 ～C-19），22.68（C-20），14.10（C-21）。以上数据与文献报道基本一致[17]，故确定该化合物为1-甲氧基苯基-1-醇（1-methoxyhenicosan-1-ol）。

化合物7：黄色结晶体，ESI-MSm/z447 [M-H]-，分子式为C21H20O11（理论分子量为448.38）。（1）1H-NMR（600 MHz，C5D5N）。δ：8.15（2H，dd，J=1.8、9.1 Hz，H-2′,6′），6.90（2H，dd，J=1.8、9.1 Hz，H-3′,5′），6.78（1H，d，J=7.3 Hz，H-1′′），3.89（1H，dd，J=2.3，12.2 Hz，H-6′′a），3.71（1H，dd，J=5.8、12.2 Hz，H-6′′b）。（2）13C-NMR（150 MHz，C5D5N）。δ：148.8（C-2），138.7（C-3），177.9（C-4），162.3（C-5），100.2（C-6），164.2（C-7），95.5（C-8），157.4（C-9），106.6（C-10），123.4（C-1′），131.2（C-2′,6′），116.9（C-3′,5′），161.5（C-4′），102.2（C-1′′），75.4（C-2′′），79.8（C-3′′），71.6（C-4′′），79.1（C-5′′），62.8（C-6′′）。以上数据与文献报道基本一致[18]，故确定该化合物为山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷（kaempferol-7-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物8：黄色粉末（甲醇），ESI-MSm/z609[M-H]-，分子式为C27H30O16（理论分子量为610.52）。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）。δ：12.58（1H，s，5-OH），7.56（1H，s，H-2′），7.53（1H，d，J=8.3 Hz，H-6′），6.84（1H，d，J=8.3 Hz，H-5′），6.38（1H，s，H-8），6.18（1H，s，H-6），5.34（1H，d，J=6.6 Hz，Glu-H-1），4.40（1H，s，Rha-H-1），0.98（3H，d，J=6.4 Hz，Rha-CH3）。（2）13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）。δ：156.5（C-2），133.2（C-3），177.4（C-4），161.3（C-5），98.7（C-6），163.5（C-7），93.6（C-8），156.6（C-9），103.8（C-10），121.3（C-1′），115.4（C-2′），144.8（C-3′），148.6（C-4′），116.4（C-5′），121.6（C-6′），101.2（C-1′′），74.1（C-2′′），76.6（C-3′′），70.4（C-4′′），75.8（C-5′′），67.0（C-6′′），108.7（C-1′′′），70.4（C-2′′′），70.0（C-3′′′），71.8（C-4′′′），68.4（C-5′′′），17.6（C-6′′′）。以上数据与文献报道基本一致[19]，故确定该化合物为芦丁（rutin）。

化合物9：黄色粉末，溶于甲醇，ESI-MSm/z258[M+H]+，分子式C15H10O6（理论分子量为286.23）。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：8.06（2H，d，J=8.74 Hz，H-2′,6′），6.87（2H，d，J=8.91 Hz，H-3′,5′），6.37（1H，d，J=1.88 Hz，H-8），6.14（1H，d，J=1.96 Hz，H-6）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：177.60（C-4），165.78（C-7），162.73（C-5），160.76（C-4′），158.45（C-9），148.24（C-2），137.59（C-3），130.88（C-2′,6′），123.96（C-1′），6.50（C-3′,5′），104.74（C-10），99.46（C-6），94.54（C-8）。 以上数据与文献报道基本一致[20]，故确定该化合物为山柰酚（kaempferol）。

3 结论

本研究从平卧菊三七根部的乙醇提取物中分离鉴定了9 个单体化合物，其中化合物1、5 ～8 和9均为首次从菊三七属中分离得到，可为平卧菊三七根的综合利用提供理论依据。