猪圆环病毒病血清学调查研究*

蔡元庆，张拥军，赵云龙，徐学栓，黄红娟，张弦，杨文刚，周玉东，王春伟，盛涛*

（1.第七师胡杨河市畜牧兽医站，新疆 胡杨河 834034；2.第七师一二七团农业发展中心；3.第七师一二四团农业发展中心；4.第七师一二六团农业发展中心；5.第七师一三一团农业发展中心）

猪圆环病毒病（Porcine Circovirus Disease，PCVD）是由猪圆环病毒（Porcine circovirus，PCV）感染引起的一种免疫抑制性疾病。健康猪感染猪圆环病毒会抑制机体的免疫反应，从而引发不同阶段猪发生多系统衰竭综合征、猪呼吸道疾病综合征、肠炎、亚临床感染、繁殖障碍性疾病、猪皮炎肾病综合征等不同病症[1]。自2001年我国首次发现猪圆环病毒以来，该病呈逐年增加趋势，严重影响着养猪业的健康发展，给养猪业造成较大经济损失。为掌握第七师胡杨河市辖区猪圆环病毒病感染情况，2021年采集辖区内39个猪场共384份血清开展猪圆环病毒病抗体检测。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 样品

采集第七师胡杨河市39个猪场育肥猪血液384份，经3 000 r/min离心10 min，取上层血清分装于Ep管中，-20 ℃保存备用。

1.1.2 试验试剂

猪圆环病毒2型抗体酶免检测试剂盒，购自哈尔滨元亨生物药业有限公司，生产批号：PCV20210517E。

1.2 试验方法

1.2.1 检测方法

使用猪圆环病毒2型抗体酶免检测试剂盒，按照试剂盒操作说明进行，具体步骤：（1）在反应板上标记样品、阴性对照和阳性对照位置，并做好记录。配置洗涤液，浓缩洗涤液20倍稀释。（2）分别在相应孔中按100 μL/孔加入阴性对照（2孔）和阳性对照（2孔）原液。在待检样品孔加入80 μL样品稀释液和20 μL待检样品，振荡混匀，封膜，37 ℃孵育30 min。（3）取出反应板，揭掉封膜，倒掉各孔中液体，拍净。每孔加满洗涤液，静置30 s，重复洗涤5次，最后在吸水纸上拍净。（4）每孔加入酶结合物液100 μL，贴上封膜，37 ℃孵育30 min。（5）再取出反应板，揭掉封膜，倒掉各孔中液体，拍净。每孔加满洗涤液，静置30 s，重复洗涤5次，最后在吸水纸上拍净。（6）每孔加入底物液A50 μL，再加入底物液B50 μL，轻轻振荡混匀，37 ℃避光显色15 min。（7）每孔加入终止液50 μL，轻轻振荡混匀，酶标仪450 nm波长测定各孔OD450值。

1.2.2 判定标准

两孔阴性对照OD450平均值≤0.15，两孔阳性对照OD450平均值≥0.60，试验成立；临界值=阳性对照OD450平均值×0.25；被检样品OD450值＜临界值，为猪圆环病毒2型抗体阴性，被检样品OD450值≥临界值，为猪圆环病毒2型抗体阳性。

2 检测结果

2.1 对照组结果

阴性对照OD450平均值=（OD1+OD2）/2=（0.049+0.056）/2=0.052 5。

阳性对照OD450平均值=（OD3+OD4）/2=（1.598+1.665）/2=1.631 5。

试验结果判定成立。被检样品OD450值≥临界值=1.631 5×0.25=0.407 9，为猪圆环病毒2型抗体阳性。

2.2 检测结果（表1）

表1 猪圆环病毒2型抗体检测结果

2.3 结果与分析

2.3.1 免疫猪场猪圆环病毒2型抗体检测结果

对35个免疫猪场的340份血清进行抗体检测，阳性数322份，阳性率94.7%，高于国家70%标准，免疫效果良好。

2.3.2 未免疫猪场猪圆环病毒2型抗体检测结果

对4个未免疫猪场的44份血清进行抗体检测，阳性数44份，阳性率100%，说明猪群存在猪圆环病毒感染。

3 讨论

3.1 免疫猪场

35个免疫猪场抗体阳性率94.70%，说明猪场对猪圆环病毒病的重视程度很高，选用高效的疫苗，并按照免疫程序免疫，取得了良好的免疫效果。

3.2 未免疫猪场

4个未免疫猪场抗体阳性率100%，表明猪圆环病毒病已在本辖区流行，对辖区的养猪业发展造成了较大影响。因此猪场应掌握本场猪圆环病毒感染情况，选用高效猪圆环病毒病疫苗，将猪圆环病毒病的免疫列入本场免疫程序，同时加强抗体监测，逐步淘汰带毒猪，建立健康猪群。

4 综合防控

猪圆环病毒病目前没有行之有效的治疗方法和药物，猪场应将猪圆环病毒病免疫列入到本场的免疫程序，14日龄猪进行第一次免疫接种，感染严重猪场应加强免疫1次，临产母猪在产前1个月加强免疫1次。免疫猪群应定期开展抗体检测，对抗体不达标猪群进行加强免疫，确保疫苗对猪群的有效保护。同时，加强猪场猪瘟、猪蓝耳等免疫抑制病的基础免疫工作，提升猪圆环病毒病的免疫效果[2]。

饲养管理方面。一是提高猪群饲料的蛋白质、氨基酸、维生素和微量元素等水平，增强猪群的免疫力和抵抗力；二是要建立完整的生物安全体系，对进出场的人、车、物严格管控，严防外部感染，各生产单元进行有效物理隔离，以防交叉感染；三是同批次猪全进全出，避免将不同日龄的猪混群饲养，从而减少猪群之间接触感染机会；四是降低饲养密度，圈舍保持通风，将清洗消毒工作贯穿于养猪生产的各个环节，降低猪场病原微生物，减少或杜绝猪群感染风险。