周慧娟 叶正文 曾思懿 王晓庆 骆 军
(1.上海市农业科学院林木果树研究所,上海 201403;2.上海市设施园艺技术重点实验室,上海 201403)
早生新水、沪晶梨18、沪晶梨67是遗传背景相似、由上海市农业科学院林木果树研究所选育的3个砂梨品种,具有果肉脆嫩、石细胞少、汁液丰富等优良特性,加之与翠冠错峰上市而成为市场新星,是长三角新兴的主栽品种[1-3]。砂梨皮薄汁多、具有明显的呼吸和乙烯释放高峰,其成熟正值高温高湿季节,采后极易软化和腐败变质[4];低温虽然可延长果实的保鲜期,但长期的低温易使果实出现糖酸失调、果心褐变等症状,严重影响了果实的食用和商品价值[5]。
砂梨系统果实采后仍具有新陈代谢进程,可形成其特有的风味[6]。质构、色泽、糖酸和挥发性物质是构成果实品质的重要因素[7]。质构是果实的基本属性,与口感质地和手感质地间呈强正相关[8];糖酸是果实采后衰老期间的代谢底物[9],可调控果实风味和色泽的代谢[10],与果实耐贮性紧密相关[11]。糖代谢及其信号转导在果实的风味、功能、贮藏物质及成熟衰老等方面都发挥着重要作用,不同系统梨果实中糖组分及含量差异较大,主要分为山梨糖醇、果糖和蔗糖积累型[12],果糖占比对梨果实的甜味起决定作用[11],砂梨以果糖、山梨醇和葡萄糖为主[13]。不同系统梨果实酸组分及含量存在差异,刘松忠等[11]研究表明,白梨有机酸由苹果酸、柠檬酸和琥珀酸构成,而蒋爽等[14]发现梨果实中有机酸以苹果酸和枸橼酸为主。苹果酸与果实酸度呈正相关性[15],是果实代谢的基础底物,适量的苹果酸使梨果实口感清爽,酸味持续时间长[16];奎宁酸影响果实苦味,是芳香物质合成途径的中间产物[17],间接影响了果实的品质;柠檬酸与梨果实酸度呈正相关,影响果实的综合风味[9]。
挥发性物质是影响消费者购买意向的重要果实性状,包括烃类、有机酸、酯类、醛类、醇类、酮类、萜烯类、氧化物及硫化合物[18],其成分及比例决定了不同梨果的特有香气[19]。电子鼻技术由Corrado等[20]提出,在果实的贮藏性评价[21]、腐败判别[22]、果实新鲜度[23]等方面均有一定的应用,但果实在成熟期和贮藏期间的组分和含量不同,传感器识别作用有一定差异[24]。电子鼻技术不但可区分品种差异还可区别贮藏和货架期间挥发性物质的变化[25],为目前较为成熟的检测技术之一。
研究拟以遗传背景相似、成熟期不同的早生新水、沪晶梨18、沪晶梨67为试材,测定冷藏期间3个砂梨果实质地、糖、有机酸、挥发性物质,并对果实的质地及品质差异性进行评价,为砂梨品种的选育和采后保鲜技术的研发提供依据。
1.1.1 试验材料
早生新水、沪晶梨18(HJ18)、沪晶梨67(HJ67)梨果实:2021年采自上海市农业科学院庄行综合试验站,株行距2.5 m×3.5 m,树龄10年,果实套单层黄袋,土壤表层肥沃,排灌通畅,统一管理,生长正常。3个品种分别于30株树树冠外围高1.2 m处随机采摘向阳面果实,每株随机采摘50个成熟度一致、大小均一、色泽均匀、无病虫害、无机械损伤的果实,采摘后立即运送至上海市设施园艺技术重点实验室冷库进行分装和预冷处理,果实的入库品质见表1。
表1 梨果实入库时品质状态
1.1.2 仪器与设备
防雾保鲜袋:0.03 mm,零度包装科技有限公司;
质构仪:TA.XT.Plus型,英国SMS公司;
高效液相色谱仪:E2695型,美国Waters公司;
高速离心机:X-22R型,美国Beckman公司;
浓缩仪:Eppendorf Concentrator plus TM型,美国Eppendorf公司;
手持阿贝折光仪:PAL-1型,日本ATAGO公司;
电子鼻:PEN3.5型,德国 AIRSENSE公司。
1.2.1 试验处理 将分选好的果实放置于外衬厚度为0.03 mm 的PE防雾保鲜袋、内衬凹槽的塑料筐中,单层摆放,温度为(4.0±0.5)℃、相对湿度为85%~90%的冷库中预冷24 h,保鲜袋敞口预冷;封口置于温度为(1.0±0.5)℃、相对湿度85%~90%的冷库中贮藏60 d。每个品种设3次重复,每重复300个果实,每个品种共计900个果实。每个品种每10 d取30个果实,对冷藏期间果实质构,可溶性固形物、可滴定酸、蔗糖、葡萄糖、果糖、山梨醇、苹果酸、柠檬酸含量,10个电子鼻传感器感应值等指标进行测定。
1.2.2 指标测定
(1)质构:用质构仪对梨果实赤道对称两点的质构特性进行测定,圆柱形探头(P/5)直径5 mm,测前速度60 mm/min,测试速度120 mm/min,测后速度600 mm/min,触发力0.5 N。第1次下压距离3 mm,测定果皮硬度和果皮脆性;第2次下压距离20 mm,测定果肉硬度、果肉紧实度及果肉脆性。
(2)可溶性固形物含量:取左右赤道对称部位果肉,20 ℃下,用手持阿贝折光仪测定未经稀释的汁液的可溶性固形物含量,每次随机取30个果实进行测定。
(3)可滴定酸含量:随机取18个梨果实赤道对称两点的果肉,设3个重复,酸碱滴定法测定(以苹果酸计)[26]。
(4)蔗糖、葡萄糖、果糖、山梨醇、苹果酸、柠檬酸含量:随机取18个梨果实赤道对称两点的果肉,设3个重复,参照严娟等[27]的方法测定。
(5)电子鼻传感器响应值:参照严娟等[24]的方法稍作修改,使用PEN3.5型便携式电子鼻,包含S1芳香苯类(W1C)、S2氮氧化物(W5S)、S3氨类(W3C)、S4氢气(W6S)、S5烷烃(W5C)、S6甲烷(W1S)、S7硫化氢(W1W)、S8乙醇(W2S)、S9芳香成分与有机硫化物(W2W)和S10烷烃(W3S)10个金属氧化物传感器阵列。将5个梨果实放置于干燥皿中,用橡皮塞封口,25 ℃静置60 min后进行测定。挥发性气体以400 mL/min流速通过采集管,清洗时间为60 s,检测时间为240 s,取168~170 s处1~3个稳定信号作为分析时间点。每个样品重复测定3次。
采用Excel软件进行数据统计分析并作图;采用SPSS 22.0软件进行相关性分析和显著性分析。
由图1可知,冷藏期间,3个品种梨果肉组织硬度、果肉脆性及果实紧实度呈下降趋势,带皮硬度和咀嚼性较为恒定。冷藏期间,HJ67果实带皮硬度显著高于HJ18和早生新水,说明遗传背景相似的3个品种的果皮特性有一定差异,与周慧娟等[28]的结论一致。冷藏第20~60天,HJ18和早生新水果肉组织硬度和果肉脆性呈急剧下降趋势,显著低于HJ67的,说明果实质地是调控软化速率的决定性因素[29],与HJ67果实较耐贮运的品种特性一致[1-3]。冷藏第30~60天,HJ67果实紧实度急剧下降,HJ18和早生新水果实紧实度较为恒定,且显著高于HJ67的,说明果实紧实度与耐贮性的关系值得研究。冷藏第30~60天,HJ67果实咀嚼性显著高于HJ18和早生新水,说明HJ67果实可较好地保持果实固有质地特性。综上,HJ67果实带皮硬度、果肉组织硬度等质地特性优于HJ18和早生新水,但存在贮藏后期紧实度降低的缺陷;HJ18果实的果皮特性、紧实度和脆性优于早生新水,但果肉组织硬度和咀嚼性无显著性差异,进一步说明了两个品种质地的相似性。
小写字母不同表示同一时间点不同处理之间差异显著(P<0.05)
由图2可知,冷藏期间,HJ67和早生新水果实可溶性固形物(SSC)含量呈先升后降的趋势,HJ18果实SSC含量后期呈上升趋势,说明3种类型梨果实均存在后熟进程,与南果梨的变化趋势一致[30]。早生新水果实SSC含量于冷藏第40天出现峰值,后期急剧下降,说明 冷藏第40天为其品质劣变点,与其对低温敏感导致果实风味降低有关[29]。HJ67果实SSC含量显著高于HJ18和早生新水,较好地保持了果实固有风味。
小写字母不同表示同一时间点不同处理之间差异显著(P<0.05)
可溶性糖的构成和比例决定果实的甜度,其中果糖最甜,葡萄糖甜度最小[31]。HJ18和早生新水果实的葡萄糖、山梨醇和总糖含量显著低于HJ67,但其口感甜度却高于HJ67,与HJ18和早生新水为果糖积累型、HJ67为山梨醇积累型有关[14]。HJ18梨果实的果糖/总糖显著高于早生新水和HJ67,与HJ18梨果实较HJ67和早生新水甘甜的结论一致,进一步说明了果糖占比决定果实甜味[11]。
冷藏期间,3个品种梨果实葡萄糖含量均呈上升趋势;HJ18和早生新水果糖含量呈上升趋势;HJ18山梨醇含量呈上升趋势,早生新水山梨醇含量呈下降趋势;HJ67果糖和山梨醇含量无显著性变化,说明3个品种梨果实采后糖代谢存在差异,最终影响贮藏风味的变化[10]。HJ67的葡萄糖、山梨醇和总糖含量显著高于HJ18和早生新水,说明HJ67的综合营养物质较高,受冷藏时间调控小;HJ18果糖含量和果糖/总糖显著高于HJ67,甜度高;随着冷藏时间的延长,HJ18和早生新水的果糖/总糖无显著性差异,但仍显著高于HJ67。
可滴定酸(TA)是果蔬采后新陈代谢的底物,与果实耐贮性密切相关。由图3可知,冷藏期间,HJ18和早生新水的TA含量呈下降趋势,HJ67的TA含量较稳定,说明HJ18和早生新水消耗了大量的TA以应对低温环境[29];早生新水果实TA含量显著高于HJ67和HJ18,与HJ67果实较早生新水和HJ18果实酸含量高的结论有一定差异,说明总酸含量不是决定果实酸度值的决定性参数[9]。
小写字母不同表示同一时间点不同处理之间差异显著(P<0.05)
3个砂梨品种的有机酸均以苹果酸和柠檬酸为主,为典型的苹果酸积累型,与姚改芳等[12]的结论一致。梨果实中以苹果酸为主,但柠檬酸含量可影响总酸含量和酸度值[9]。HJ67果实TA和苹果酸含量低于其他两个品种,仅为早生新水的0.65倍,但综合口感却偏酸,与蒋爽等[14]的结论有一定差异。采摘时,HJ67果实柠檬酸含量显著高于HJ18和早生新水,且柠檬酸/可滴定酸为HJ18和早生新水的2~3倍,说明柠檬酸含量和占比是导致HJ67果实偏酸的原因之一,与胡红菊[9]的结果一致。与可溶性糖相比,酸组分和含量对果实的整体风味的贡献率更大[14]。冷藏第30~60天,早生新水苹果酸含量急剧下降,说明其综合风味下降,商品价值降低,HJ18和HJ67较好地保持了果实固有苹果酸含量;冷藏第20~60天,HJ67柠檬酸含量急剧下降,与果实口感酸度下降的趋势一致,进一步说明了柠檬酸含量是影响梨果实口感酸度的关键参数[9]。冷藏第0~40天,HJ67柠檬酸/可滴定酸呈下降趋势,至第40天,柠檬酸/可滴定酸降低至初始的1/2,与长期低温冷藏导致果实酸度降低,从而影响果实综合口感的结论一致;冷藏第30~60天,HJ67柠檬酸/可滴定酸显著高于HJ18和早生新水,比值较恒定,说明HJ67为典型的柠檬酸优势型品种[32],风味浓郁,不能仅以含酸量的高低断定果实品质优劣[33]。HJ67果实口感偏酸,但冷藏期间果实TA、苹果酸含量较稳定,贮藏风味较浓,加之汁液丰富、果肉脆嫩等优良性状,使其在冷藏风味和时间上占有优势;冷藏第30~60天,果实酸度下降至最佳比例,糖酸比适中,与早生新水、翠冠等主栽品种错峰上市,说明不能以采摘时果品的酸度衡量果实的商品价值。
由图3可知,采摘时,HJ67果实糖酸比显著高于HJ18和早生新水。冷藏第0~40天,早生新水果实糖酸比为25%~40%,与初始值差异不显著;冷藏第40~60天,早生新水果实糖酸比急剧上升,糖酸比失调,风味降低,与40 d左右为早生新水的安全贮藏期,后期风味下降的结论一致。冷藏期间,HJ18的糖酸比较恒定,与初始值无显著差异,贮藏风味佳。冷藏第0~40天,HJ67果实糖酸比较稳定,风味偏酸,后期糖酸比上升,与冷藏40 d后风味偏甜的结论一致。综上,不同栽培系统梨品种应根据其贮藏风味特点和贮藏时间决定销售市场和品质优劣[12]。建议冷藏0~40 d的HJ67果实销往偏酸风味市场,冷藏40~60 d的果实销往偏甜风味市场。冷藏期间,HJ67可较好地保持果实质地,展现出其酸、甜风味的两面性,错峰上市,商品价值和食用价值佳。
由图4可知,PC1中,对3个砂梨品种贮藏风味贡献较大的传感器有S2、S6、S7、S8、S9,主要敏感的化合物为氮氧化合物、甲烷、硫化物、醇、芳香成分。
图4 电子鼻响应值的载荷分析
由图5可知,冷藏期间,早生新水的S2、S6、S7、S8和S9响应值呈先下降后平稳的趋势;HJ67的S2、S6、S7和S8响应值持续下降,S9感应值较平稳;HJ18的5个传感器感应值均无显著性变化,说明早生新水和HJ67梨果实挥发性化合物发生了明显变化,特别是氮氧化合物、甲烷、硫化物、乙醇等挥发性化合物,果实风味受冷藏影响较大。冷藏0~40 d,HJ67的S6和S8的响应值显著高于早生新水和HJ18的,说明HJ67的甲烷和乙醇含量较高,可能与果实偏酸有关;HJ67的S2和S7响应值显著高于HJ18的,与早生新水的无显著性差异。3个砂梨品种果实挥发性物质种类受冷藏时间影响较大,但研究未对果实挥发性物质进行定量测定,后续可结合电子鼻技术和GC-MS技术开展特征挥发性物质的研究工作。
小写字母不同表示同一时间点不同处理之间差异显著(P<0.05)
试验表明,沪晶梨18和早生新水为典型的果糖积累型,沪晶梨67为山梨醇积累型,3个品种梨均为苹果酸积累型。冷藏期间,沪晶梨67可较好地保持果实质地,含有较高的葡萄糖、山梨醇、总糖、可滴定酸、苹果酸,贮藏风味浓郁,耐贮性佳;沪晶梨18果皮特性、紧实度和脆性优于早生新水,拥有较高的果糖、苹果酸含量和果糖/总糖,可保持较高的甜酸度,贮藏风味浓郁;早生新水易软化,可滴定酸含量呈急剧下降,不耐贮。早生新水和沪晶梨67梨果实挥发性化合物发生了明显变化,特别是氮氧化合物、甲烷、硫化物、乙醇等挥发性化合物。综上,早生新水易软化,风味易失调,不耐贮藏,安全冷藏期为30 d;沪晶梨18带皮硬度、紧实度和脆性优于早生新水,拥有较高的果糖、苹果酸含量和果糖/总糖,贮藏风味佳,安全冷藏期为40 d;沪晶梨67可保持较高的果实质地特性,糖酸含量高,贮藏风味浓郁,安全冷藏期为60 d。后续可结合电子鼻技术和GC-MS技术,对受贮藏时间和贮藏条件影响较大的挥发性物质进行定性和定量分析,以筛选特征挥发性物质。