血清可溶性尿激酶受体（suPAR）水平与慢性乙肝肝纤维化进展的相关性研究

王秋丰，邓国雄，黄桂霞

（佛山市高明区中医院，广东 佛山 528500）

慢性乙肝（Chronic Hepatitis B，CHB）是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）感染引起的慢性传染性肝病，是严重的全球公共卫生问题。目前，我国约有HBV 感染患者9300 万例，CHB 患者2000万例，CHB 发病率仍然高居不下，我国CHB 防治形势十分严峻[1]。由于HBV 长期反复作用于肝脏，导致肝细胞变性、坏死，患者会出现不同程度的肝纤维化，随着病情进展可能会发展为肝硬化或肝癌，严重危及患者的生命安全[2]。肝组织活检术仍然是临床判断CHB 患者肝纤维化程度的金标准，但此法存在创伤性，其可重复性差、取样误差大，无法长期、动态反映肝纤维化进展，患者对其认可度较低[3]。研究发现，血清学标志物在判断CHB 肝纤维化进展方面具有显著的应用优势，能够通过血清学标志物表达水平识别肝硬化程度，减少肝活检的实施[4]。血清可溶性尿激酶受体（soluble urokinase-type plasminogen activator receptor，suPAR）是uPAR 的可溶形式。研究发现，suPAR 可在发生炎症刺激时从细胞表面裂解并释放到体液中，作为一种新型血清标志物，其表达水平与各种疾病的病理过程及预后具有密切关联[5]。鉴于此，本文研究分析血清suPAR 水平与CHB 肝纤维化进展的相关性，以期为相关疾病的治疗及转归预测提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2021 年1 月至2021 年12 月我院收治的120 例CHB 患者作为CHB 组。病例纳入标准：1）经实验室检查及影像学检查证实符合《慢性乙型肝炎防治指南（2019 年）》[6]中CHB 的诊断标准；2）未经抗病毒治疗；3）临床资料齐全；4）患者对本研究知情，且已签署知情同意书。病例排除标准：1）甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染者；2）伴人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）、巨细胞病毒、嗜肝病毒感染者；3）脂肪肝、酒精肝、药物性肝炎、肝脓肿或原发性肝癌患者；4）伴心、肺、肾等器官的严重器质性病变者；5）伴自身免疫性感染者；6）伴恶性肿瘤者；7）临床资料不完整者。遵循1:1 匹配原则选取同时间段于我院进行健康体检的120 例健康志愿者作为对照组。CHB 组：男62 例，女58 例；年龄41 ～75 岁，平均年龄（56.26±9.24）岁。对照组：男57 例，女63 例；年龄42 ～71 岁，平均年龄（55.11±8.93）岁。两组的年龄、性别等一般资料相比，差异无统计学意义（P＞0.05），具有均衡性。本研究经我院医学伦理委员会同意，且符合《赫尔辛基宣言》中的相关原则。

1.2 研究方法

1.2.1 肝纤维化分期 CHB 患者均行肝组织穿刺病理学检查，指导患者取左侧卧位，超声定位选择腋前线第8 或第9 肋间为穿刺点，常规消毒铺巾，采用2%利多卡因行局麻，在超声引导下穿刺，取出肝脏组织，置入甲醛溶液中固定。依次进行脱水、石蜡包埋、切片，然后进行病理检查。参照《慢性乙型肝炎防治指南（2019 年）》[6]进行肝纤维化分期，分为S0-1期、S2期、S3期、S4期，患者例数分别为50 例、35 例、22 例、13 例。

1.2.2 血清学指标检测 采集两组受试者清晨空腹肘静脉血10mL 送检，于3000r/min 的离心机中旋转离心20min，分离血清置于-70℃冰箱中保存待用。采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清suPAR 水平及血清肝纤维化标记物〔壳多糖酶3 样蛋白1（chitinase 3-like protein 1，YKL-40）、前胶原C 端蛋白酶增强子1（procollagen C-terminal protease enhancer 1，PCPE-1）、转化生长因子β1（Transforming growth factor beta，TGF-β1）〕，所用仪器为THERMO Multiskan FC 全自动酶标仪（美国Thermo Scientific），试剂盒均购自上海钰博生物科技有限公司，检测步骤严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学分析

应用SPSS26.0 版软件处理数据，正态分布且方差齐性的计量资料以±s表示，两组比较行LSD-t检验，多组比较采用方差分析，用M（QR）表达呈偏态分布的计量资料，采用秩和检验；以n(%) 表示计数资料，采用χ² 或Fisher 检验；分析血清suPAR水平与CHB 患者肝纤维化分期的相关性采用Pearson相关性分析法，P＜0.05 表示数据差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CHB 患者与健康人群血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比较

CHB 组患者的血清YKL-40、TGF-β1、suPAR水平显著高于对照组，PCPE-1 水平显著低于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 CHB 患者与健康人群血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比较（± s）

表1 CHB 患者与健康人群血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比较（± s）

组别 YKL-40（ng/mL） TGF-β1（pg/mL） PCPE-1（pg/mL） suPAR（ng/mL）CHB 组（n=120） 30.72±6.25 68.44±13.65 7.46±1.72 4.83±0.85对照组（n=120） 7.14±1.09 27.82±5.77 41.35±11.40 2.11±0.42 t 值 40.714 30.026 32.201 31.427 P 值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 不同肝纤维化分期CHB 患者血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比较

不同肝纤维化分期CHB 患者的血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；随着CHB 患者肝纤维化的加重，其血清YKL-40、TGF-β1、suPAR 水平表现出不同程度的升高，PCPE-1 水平表现出不同程度的降低。见表2。

表2 不同肝纤维化分期CHB 患者血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比较（± s）

表2 不同肝纤维化分期CHB 患者血清YKL-40、TGF-β1、suPAR、PCPE-1 水平的比较（± s）

注：①表示与S2 期比较，P ＜0.05 ；②表示与S3 期比较，P ＜0.05；③表示与S4 期比较，P ＜0.05。

肝纤维化分期 YKL-40（ng/mL） TGF-β1（pg/mL） PCPE-1（pg/mL） suPAR（ng/mL）S0-1 期（n=50） 25.44±2.72①②③ 54.71±6.23①②③ 14.75±4.11①②③ 2.82±0.37①②③S2 期（n=35） 28.39±3.19②③ 61.75±8.01②③ 9.23±3.14②③ 3.43±0.42②③S3 期（n=22） 31.72±3.34①③ 69.42±9.29①③ 5.17±2.52①③ 4.19±0.55①③S4 期（n=13） 33.65±4.29①② 82.64±11.47①② 1.85±1.43①② 5.68±0.73①②F 值 45.291 144.175 62.920 31.074 P 值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.3 CHB 患者血清suPAR 水平与肝纤维化分期相关性的分析

Pearson 相关性分析结果显示，CHB 患者血清suPAR 水平与血清YKL-40、TGF-β1水平及肝纤维化分期呈正相关性（r ＞0，P＜0.05），与血清PCPE-1 水平呈负相关性（r ＜0，P＜0.05）。见表3。

表3 CHB 患者血清suPAR 水平与肝纤维化分期相关性的分析

3 讨论

肝纤维化是肝细胞对HBV 感染、毒性损伤及自身免疫等引起的肝脏慢性损害产生的修复反应，可造成肝脏内细胞外基质慢性沉积；纤维化是相关疾病进展至肝硬化的必经阶段，也是医生确定CHB 患者治疗方案及判断其预后的重要依据[7]。肝活检是判断肝纤维化程度的“金标准”，但其存在创伤性大、取样误差大、需反复取样、费用高等缺点，患者对其认可度较低[8-9]。近年来，血清suPAR 作为新型血清标志物备受关注，尤其是在感染性疾病严重程度及预后的预测方面。有研究表明，血清suPAR 能够用于感染性疾病的早期诊断，也可用于预测感染性疾病的不良预后，其表达水平与肝纤维化的严重程度密切相关，也是肝病患者死亡及肝脏移植的重要预测指标[10]。杨凤等[11]研究发现，HBV 相关性慢加急性肝衰竭（acuteon-chronic liver failure，ACLF）患者的血清suPAR表达水平与其肝脏炎症及肝纤维化程度有关，其血清suPAR 的表达水平随着病情加重逐渐升高。杨红梅等[12]的研究表明，suPAR 与CHB-ACLF 患者的病情进展密切相关，对患者近期预后具有较高的预测价值。本研究的结果显示，CHB 组患者的血清YKL-40、TGF-β1、suPAR 水平显著高于健康人群，PCPE-1水平显著低于健康人群，且随着CHB 患者肝纤维化的加重，其血清YKL-40、TGF-β1、suPAR 水平表现出不同程度的升高，PCPE-1 水平表现出不同程度的降低。笔者进一步进行Pearson 相关性分析发现，CHB 患者血清suPAR 水平与血清YKL-40、TGF-β1水平及肝纤维化分期呈正相关性（r ＞0，P＜0.05），与血清PCPE-1 水平呈负相关性（r ＜0，P＜0.05）。这与上述学者的研究结果相似。suPAR 是细胞膜表面尿激酶型纤溶酶原激活物受体脱落在外周血中形成的产物，可参与到机体的多种病理生理过程中，可反映机体炎症状态及相关疾病的严重程度。从本研究可知，与健康人群相比，CHB 患者的血清suPAR 水平出现异常升高趋势，且随着肝纤维化加重其表达水平逐渐升高，说明CHB 患者的血清suPAR 水平与肝纤维化进展具有高度相关性，但相关具体机制仍不明确，尚需进一步研究。

综上所述，CHB 患者的血清suPAR 水平与肝纤维化进展密切相关，血清suPAR 水平升高提示CHB患者的肝纤维化加重。血清suPAR 可作为评估CHB患者肝纤维化进程的有效生物学标记物，检测此指标可为后期疾病治疗方案的拟定及病情转归预测提供参考依据。