反刍动物布氏杆菌病的综合防控措施

吴宗豪

(贵州省三穗县农业农村局，贵州 三穗 556500)

0 引言

反刍动物是超过200种特殊的陆生植食性动物的统称，特点是有4个胃，分别为瘤胃用于消化纤维素、网胃用于过滤食物中的杂质、瓣胃用于过滤未完全消化食物、皱胃(也称真胃)用于吸收食物中的主要营养物质。反刍动物的瘤胃是一个由细菌、原虫、真菌组成的微生物生态系统，如同一个发酵罐。反刍动物对营养物质的消化吸收情况受瘤胃微生物种类和不同微生物数量关系的影响，而瘤胃微生物的数量影响营养物质的降解率以及纤维素酶活性。

反刍动物包括常见的经济价值较高的家畜，如牛、羊等，可以通过反刍作用将植物转化为优质的蛋白质和脂肪。羊肉和牛肉具有很高的市场价值，牛羊养殖业行情保持稳定增长态势，有着较高的养殖利润。我国主要饲养奶牛、肉牛、山羊和绵羊。近年来，随着我国奶牛和肉羊养殖规模的不断扩大，存栏量也不断增加，牛羊肉也保持着较高的市场价格优势。

养羊的周期比较短，一般来说10月龄的母羊可以进行配种，产出新的羊羔，带来不错的经济效益。而养牛根据环境区域的不同可以进行自繁自养，大概需要2年时间，母牛养殖至少1年以上才可以繁殖配种，因此牛的养殖周期高于羊，但牛群容易管理，牛的抗病力要强于羊。

布氏杆菌是威胁牛和羊养殖业的重要病原，潜伏期较长，传播速度极快，一旦出现1例感染则可在全群中迅速传播开来，并且引起较高的感染率，严重影响牛和羊的生殖机能，造成机体繁殖障碍。

1 布氏杆菌病症状

布氏杆菌病是人兽共患的一种传染病，以生殖系统侵害为特征。反刍动物感染后主要表现为睾丸炎、附睾炎、淋巴结炎、关节炎、流产以及不孕不育等特征[1]。反刍动物布氏杆菌大多呈隐性感染，少数表现临床症状。临床上布氏杆菌感染后的母牛和母羊多在怀孕2个月左右发生流产，流产时的症状为阴唇和阴道黏膜红肿，阴道内流出淡褐色或灰绿色分泌物，出现流产胎儿常有组织自溶、水肿及皮下出血等特点。流产后的雌性反刍动物常以慢性子宫内膜炎症状出现，往往屡配不孕。部分雌性反刍动物怀孕后并不发生流产，在怀孕早期胎儿死亡，被母体吸收。雄性感染布氏杆菌后，出现睾丸炎、副睾炎、前列腺炎、包皮炎等症状。

另外有研究发现，布氏杆菌属的菌均可以入侵到巨噬细胞和胚胎层细胞等，可在细胞内存活和繁殖。布氏杆菌最易侵袭乳腺，并可以在多种器官如子宫、阴道、肝、上咽骨、乳腺、淋巴结、邻近的淋巴网状组织、胃与精囊和睾丸等组织中增殖。反刍动物感染布氏杆菌后不仅会引起生殖系统炎症，还会引发关节炎、腱鞘炎，运动时出现跛行等症状。

反刍动物感染布氏杆菌后会引起机体免疫抑制。反刍动物的免疫抑制是一种急性感染状态，免疫抑制不仅危害机体的免疫系统，抑制免疫系统发挥作用，也易引起其他病原的继发感染，从而诱发机体产生菌血症。当雌性反刍动物持续性感染时引起繁殖障碍，经垂直传播，常发生流产、死胎和畸形胎儿，若产下胎儿则会出现免疫抑制和继续性感染，且不易被发现，使之成为威胁最为严重的传染源。而且隐形感染和免疫抑制对母牛的繁殖机能会产生巨大影响，比如生殖失败，出现受孕困难，死胎、流产、畸形胎和持续性感染胎牛等症状。母牛孕期通过胎盘传播布氏杆菌病是布氏杆菌重要的流行特征。布氏杆菌病是一种慢性疾病，通常情况下病程较长，可以持续半年，没有明显的典型症状，饲养者很难发现。布氏杆菌病感染后一方面表现为病牛采食量减少，机体逐渐消瘦；另一方面造成免疫抑制和病原体的继发感染。

2 布氏杆菌流行特点

反刍动物布氏杆菌病在全世界均有分布，一年四季中均可感染。反刍动物布氏杆菌病的传染途径为水平传播、垂直传播、口腔传播和母胎传播。水平传播的特点为传播范围广，波及较大，而母胎传播是危害最严重的传播方式。值得注意的是，受感染的牛奶、羊奶中也携带布氏杆菌，因此布氏杆菌且对人也存在潜在威胁。布氏杆菌在羊群中可以持续存在并广泛传播。尤其在一些牲畜有流动的区域，布氏杆菌不仅可以耐受干燥还可以在低温和潮湿的环境中生存数月，而且可以在低温天气下的流产胎儿、粪便、干草、灰尘、设备和衣物中长期存活。布氏杆菌不耐受高温，对于布氏杆菌的消杀可以通过巴斯德消毒法、蒸煮处理，大部分含氯和含碘消毒剂也可将其杀灭。

布氏杆菌病为慢性疾病，潜伏期较长，隐性传播，病程较长，传播性极强，任何时期的反刍动物都易感，均可成为主要传染源，病畜可以通过流产胎儿、粪便、尿液等体液将布氏杆菌排泄到外界环境中，然后污染料槽、饮水器或日常用具，最后引起饲料和饮水污染，导致布氏杆菌病的快速传播。疫区多为隐形慢性发病。有数据表明，在哺乳期，反刍动物可以通过犬、猫、野生食肉动物的母奶垂直传播。在布氏杆菌病暴发时，90%的雌性和雄性反刍动物的生殖系统会被感染，这也是感染后引起不孕不育的的主要原因。

3 布氏杆菌病诊断技术

3.1 直接诊断方法

3.1.1 布氏杆菌的分离和培养鉴定

将采集的样品比如阴道拭子、胎盘、流产胎儿、奶、精子以及胃内容物在实验中进行革兰氏染色后观察并鉴定布氏杆菌，但此方法缺少特异性并存在直接接触的风险。另外，可在实验室中，将采集的疑似患病组织器官经过基础培养基和选择培养基培养后进行鉴定和分离，一般实验室可利用Farrell’s和Thayer-Martin’s培养基进行分离鉴定，通常布氏杆菌会在5 d内长出菌落。以上操作必须在布氏杆菌病标准参考实验室中进行。分离培养鉴定是诊断布氏杆菌病最可靠的方法，只要从病羊体内或排出物中发现病原体即可确诊。

3.1.2 PCR聚合酶链式反应

PCR是一种用于病原基因检测的诊断方法。提取疑似患布氏杆菌病机体组织，建议采取生殖器官，经过一系列处理后提取核酸，并利用基因设计工具设计出特异性引物，并经过聚合酶链式反应后分析和判定。但是，由于布氏杆菌是一种细菌病，所以临床上对于布氏杆菌的PCR方法的敏感性不如分离培养。

3.2 间接诊断方法

3.2.1 血清凝集试验

布氏杆菌血清凝集试验是利用标准的脂多糖(LPS)抗原检测病畜体内脂多糖的抗体水平，临床上判定标准为凝集效价1：50为可疑，1：100以上为阳性。若检测出血清效价有4倍或以上增长，则提示此病畜存在布氏杆菌感染，这也需要结合PCR诊断方法进行进一步诊断[2]。

3.2.2 ELISA酶联免疫吸附实验

ELISA的检测方法可以广泛应用于群体动物的检测和疫病的诊断。ELISA检测具有较高的敏感性和特异性，根据检测需求不同，ELISA还可分为间接型、竞争型和阻断型。

3.2.3 补体结合试验

布氏杆菌补体结合试验是利用羊的溶血素作为指示剂，布氏杆菌抗原与其抗体结合后形成抗原抗体复合物，再结合补体进行实验。参与补体结合反应的抗原是透明的溶液，故补体结合现象不能被肉眼看出来，必须借助溶血素作为指示剂，用于判定媒质中有无游离的补体，再进一步判定抗原抗体是否进行特异性结合。布氏杆菌补体结合试验具有较高的敏感性和特异性，常用于诊断布氏杆菌病。

4 反刍动物布氏杆菌病综合防控措施

4.1 预防措施

规模化反刍动物养殖场最好采取自繁自养模式，减少从外界引入病毒的风险。如果必须从外界引进反刍动物，需要从无疫区购买，并且经过严格检疫，在经过隔离饲养后通过检测确定反刍动物身体健康时，方可引进合群。另外，需要加强免疫接种工作，根据当地疾病传播情况，制定合理的免疫程序。提高饲养管理水平，应及时改善圈舍内的卫生和通风状况，保证圈舍始终干净干燥、空气新鲜。需要保持饲养密度合理，减少反刍动物之间互相拥挤和争抢饲料的风险，如果过度密集就会增加布氏杆菌病传播的风险。养殖人员需要认真观察反刍动物群体，一旦发现异常，需要立即隔离，避免疾病扩散或蔓延。

4.2 治疗措施

反刍动物消化植物纤维作用最大的是瘤胃，因此在反刍动物布氏杆菌病治疗时，既要规范对症用药，又需要保证瘤胃的微生物发酵环境，以维持反刍动物身体机能。

按照中西医结合的方法制定合理的治疗方案，一方面通过对症治疗来帮助病畜恢复健康，另一方面中西医结合的方法温和有效，不破坏反刍动物的反刍功能。对患病病畜补充营养剂以及易消化的食物，应注意补充复合VB和VC，保持机体机能和水-电解质平衡，避免机体电解质失去平衡。同时，还可以在饲料中添加黄芪多糖来增加病畜的免疫力。

反刍动物的瘤胃内有复杂多样的微生物，包括瘤胃原虫、瘤胃细菌和厌氧真菌、少量的噬菌体,不同种类细菌的数量受日粮结构变化的影响。因此可以在反刍动物饲料中添加微生态制剂促进反刍动物瘤胃内益生菌的生长繁殖，调控胃肠道微生物菌群，减少动物胃肠道疾病的发生率。另外，微生态制剂可在胃肠道内产生多种消化酶，促进动物对营养物质的消化吸收，提高营养物质的利用率。对于布氏杆菌病的治疗原则为早期、中西联合、足量、足疗程用药，必要时延长疗程，以防复发[3]。

病畜布氏杆菌病发病初期表现为精神萎靡、体虚盗汗、关节屈伸不利、恶寒、伴全身肌肉与关节疼痛、睾丸肿痛、阴道发炎等症状。中医上判定属于湿热痹阻耗伤脏腑。治疗应侧重于清热透邪，利湿通络且化浊通痹。治疗时利用氨基糖甙类比如链霉素每日20 mg/(kg体重)、土霉素20 mg/(kg体重)并结合四环素类药物拌料服用。同时，可喂服薏米芍参汤中药汤剂，喂服3次/d，此中药汤剂的主要成分为生薏米、汉防己、秦艽、桑枝、苍术、广地龙、赤芍、丹参、黄芩、生甘草、栀子和木瓜等，用于清热透邪、利湿化浊、益气化湿、养血通络。随着病程的延长，若病畜表现为病情迁延、面色无华、气短懒言、肌肉关节困胀、舌质淡、苔白、脉沉细无力，治疗措施可采用抗生素和中药汤剂结合治疗。抗生素可选用利福平类药物或氟喹酮类；中药汤剂成分为生黄芪、党参、苍术、茯苓、山药、当归、白芍、威灵仙、鸡血藤、生薏米、白术、甘草 、杜仲、川断和松节等，喂服3次/d。抗生素与中药汤剂治疗结合，一方面可快速恢复动物健康，另一方面可减少药物对反刍动物组织脏器的伤害。

5 结语

对于反刍动物布氏杆菌病的防控可以通过提高个体的免疫力、在饲料中添加微生态制剂，提高动物的健康水平、免疫机能以及对病原的抵抗力。根据反刍动物的消化特点，应制定合理的饲料精粗比，使瘤胃真菌和纤维降解菌在发酵前期建立起相对稳定的共生体系，进一步保障反刍动物消化能力。从业者应当学习反刍动物布氏杆菌病的相关专业知识，科学地防范反刍动物布氏杆菌病的发生，如果出现突发布氏杆菌病疫病的情况，应做到及时隔离病畜、消杀环境、合理防控，杜绝布氏杆菌的传播和扩散，做到科学养殖；政府相关部门应向养殖户普及布氏杆菌病的相关防控技术，减少布氏杆菌带来的经济损失。