四种口腔脱敏材料降低牙本质通透性的体外研究

李雅萍，刘 丽，张 新

牙本质敏感症是口腔常见临床症状,表现为暴露的牙本质对外界刺激(温度刺激、机械刺激或化学刺激等)产生短而尖锐的疼痛,且不能归因于其他特定原因引起的牙体缺损或病变[1]。牙本质的通透性与牙本质敏感症相关，敏感牙本质的小管处于开放状态，管径明显增大，牙本质通透性增加。基于该理论，目前临床应用的牙本质脱敏剂大多通过堵塞或减小牙本质小管管径来降低牙本质通透性，达到治疗目的。但由于临床疗效的评估主要依赖受试者的主观感受，结果不能真实反映口腔材料的脱敏效果，其结果不容易评价和统计[2]。体外脱敏材料降低牙本质通透性是评价脱敏材料功效的重要手段,以往用体外评价脱敏材料降低牙本质通透性的方法，主要是通过扫描电镜观察牙本质小管口被脱敏材料阻塞情况,并不能直接反映小管通透性降低情况,也没有量化指标[3]。本实验采用牙本质片体外灌注法，测定四种口腔脱敏材料降低牙本质通透性的效果，为临床脱敏剂的选择提供重要参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料：Gluma脱敏剂(德国贺利氏，批号：20409)；极固宁脱敏液(Italmed，意大利，批号：0373)；氟化钠(分析纯，国药集团化学试剂有限公司，批号：F20090624)；舒适达修复牙膏(中美史克，371A)；乙二胺四乙酸(EDTA，分析纯，合肥工业大学化学试剂厂)；低速锯(150型，沈阳科晶设备制造有限公司)；超声清洗器(上海科导超声仪器有限公司)；分析天平(AE240型，感量0.000 01克，METTLER TOLEDO Co，瑞士)；立体显微镜(ZOOM-200，上海蔡康光学仪器有限公司)；厚度计(H-D10型，上海化工机械四厂)。

1.2 方法

1.2.1 牙本质片的制备：收集我院2个月内18～30岁患者因阻生齿拔除的下颌第三磨牙(均获得患者知情同意),在体视显微镜下筛选牙冠完整、无龋、无裂纹的牙齿80颗。用石膏包埋固定牙根(保证牙合平面与水平面平行)后，分别用低速金刚石切割机自牙冠牙合面向髓腔依次片切牙冠,切割方向与牙体长轴垂直，厚度为0.6 mm,直到髓角暴露。选取紧邻髓腔的牙片,磨去其外周釉质,获得直径4.0 mm的圆形牙本质片，分别用600#碳化硅水砂纸磨平表面，确保牙本质片厚度在(0.50±0.05)mm范围内。牙本质片均超声清洗60 s，吹干表面水分后用17% EDTA溶液(pH7.4)处理牙本质片远髓面5 min，去离子水冲洗2 min，4 ℃相对湿润环境中保存备用。

1.2.2 牙本质片的通透值测定：80个牙本质片随机分为4组,每组20个。分别测定32 cm液压下每个牙本质片通透值(Lp 1)，测定时以蒸馏水作为渗透液体,且牙本质片近髓面位于有液压一侧。牙本质片通透性的测定装置由恒定的液压器、试样固定装置及微量流速测定仪组成。试样固定装置与液压器连通，内部有两个直径2 mm的“ O”型硅橡胶密封圈,牙本质片固定于两密封圈之间，即可限定测试液体通过牙本质片的面积。恒定液压器中测试液体流入固定装置时，可在压力作用下渗透通过牙本质片，并经过三通管进入内径为0.3 mm微量流速测定仪的流通管，用注射器从三通管向液体内注入微小气泡,气泡即可被流通管两端的激光传感器探测并记录。以单个气泡通过激光传感器间的时间计算出流速 (μL/min)，再除以牙本质片测定面积(即密封圈直径),即为牙本质通透值(Lp)。计算公式为Lp =L×S / (t×A)，式中L为气泡移动的距离(cm),S为流通管横截面积 (cm2),t为气泡移动的时间(min)，A为牙本质片通透面积(cm2)。

1.2.3 口腔脱敏材料的涂布：四种口腔脱敏材料的使用参照以下步骤进行。

1.2.3.1 Gluma脱敏剂：气枪吹干牙本质片表面水分,小毛刷棒蘸取少量脱敏液后沿同一方向轻轻涂抹牙本质片远髓面,30 s后用气枪吹干牙本质片表面。

1.2.3.2 极固宁脱敏液：气枪吹干牙本质片表面水分，小毛刷棒蘸取适量1液，沿同一方向均匀涂抹在牙本质片远髓面，10 s后再用小毛刷棒蘸取适量2液，均匀涂抹后气枪吹干表面。

1.2.3.3 75%氟化钠甘油糊剂： 气枪吹干牙本质片表面水分,小毛刷棒蘸取少量糊剂后沿同一方向轻轻涂抹牙本质片远髓面，3 min后用气枪吹干表面。

1.2.3.4 舒适达修复牙膏：气枪吹牙本质片表面水分,牙刷蘸取少量牙膏后在牙本质片远髓面上下刷动,3 min后用去离子水冲洗表面泡沫，重复3次。涂布脱敏材料后测定每个牙本质片的通透值(Lp 2)，测定方法同前。

2 结果

使用脱敏剂前，各组牙本质片通透值差异均无统计学意义(P>0.05)；使用脱敏剂后，牙本质片通透值均明显下降，通透值由低到高依次为：Gluma脱敏剂≈极固宁脱敏液<75%氟化钠甘油糊剂<舒适达修复牙膏(P<0.05)，见表1。

表1 四种脱敏材料使用前、后牙本质片通透值

3 讨论

临床研究表明，越来越多的患者受到牙本质敏感症的困扰，患病率已高达89.1%[4]。牙本质敏感症的发病机制主要有三个学说，其中被广大学者们普遍接受的是流体动力学说。其发生的前提是敏感牙本质的小管全程开放，牙本质小管内组织液受到外界刺激因素的作用发生快速流动，激发牙髓神经的机械感受器，引起疼痛不适[5]。有研究报道[6]，牙本质敏感部位有80%的牙本质小管处于开放状态，不敏感区仅有10%的牙本质小管开放。有学者采用牙本质切片技术观察比较敏感牙本质与正常牙本质，结果显示不敏感牙本质高度矿化，大量结晶物堵塞牙本质小管，其通透性较敏感牙本质的通透性低[7]。因此，通过堵塞敏感牙本质小管可以降低牙本质小管内的液体流动，降低牙本质的通透性，治疗牙本质敏感症。有学者在研究中发现，敏感性高(通透性强)的牙本质敏感症，其脱敏治疗的效果较低敏感者(通透性弱)更好[8]。以上研究结果提示，牙本质敏感症与牙本质通透性密切相关。目前大多学者通过临床试验来评价口腔脱敏剂的效果，该方法虽然直接，但由于受主观因素影响大，结果不易评价和量化。因此，在可控的条件下用体外方法评价脱敏剂的效果，并与临床疗效观察结果相结合，评价更有意义。

为了更好模拟牙本质敏感在体情况，本实验用17%EDTA溶液处理牙本质片远髓表面5 min，以去除制备牙本质片过程中产生的玷污层及玷污层栓，开放牙本质小管口[4]。由于牙本质敏感症并不会引起牙髓腔压力的增高[9]，故体外测定液压选择32 cm的水压，该液压接近正常状态下的牙髓腔压力[10]。本实验基于灌注法原理，采用自制的牙本质通透性测定装置测定通透值，该装置可以很好地控制影响实验结果的因素，提高了实验结果的可靠性及其与临床的相关性。MORDAN等[11]证实在体外实验中模拟了敏感牙本质的口腔环境，其研究结果的可信度明显增加。

本实验通过体外测定脱敏材料使用前、后牙本质通透值的大小，评价脱敏材料的效果。结果表明，四种口腔脱敏材料使用后，牙本质通透值均明显降低，说明四种不同成分的脱敏材料，均能有效降低牙本质的通透性。其中Gluma脱敏剂与极固宁脱敏液的效果最好，其次是75%氟化钠甘油糊剂，舒适达专业修复牙膏脱敏效果相对较差，该结果与一些临床研究相一致[12]。Gluma脱敏剂的主要成分是戊二醛和2-羟基乙基甲基丙烯酸酯(HEMA),其中戊二醛作为典型的蛋白质凝固剂，可以凝固牙本质小管内的蛋白质并产生沉淀，堵塞牙本质小管，阻止牙本质小管内液体的流动，降低牙本质的通透性，达到脱敏的作用。具有亲水性的HEMA可溶于牙本质小管液，协助戊二醛深入牙本质小管内形成树脂突，降低牙本质小管的通透性[13]。有研究报道[14]，Gluma脱敏剂阻塞牙本质小管的最大深度可达200 μm，同时用扫描电镜(SEM)观察到，使用Gluma脱敏剂后，牙本质表面无明显沉淀物，但小管内形成了以树脂为主要成分的膜状结构，该结构有不同程度的堵塞牙本质小管。由此可见，Gluma的脱敏效果主要体现在牙本质小管内膜状结构的形成，对牙本质表面结构无明显作用。体外测定使用Gluma后牙本质的通透值，结果显示通透值显著下降。因此可以认为，体外定量测定牙本质通透性的方法可以作为评价其脱敏效果的手段之一。

极固宁脱敏液是临床常用脱敏剂，由1、2两个液体组成。1液的主要成分是磷酸钾、碳酸钾及水，2液的主要成分是氯化钙、氯化锶和水。在牙本质表面混合两个液体时，磷酸钾与氯化钙反应生成磷酸钙、碳酸钙结晶沉淀物，堵塞暴露的牙本质小管口，减缓牙本质小管内液体的流动，降低牙本质的通透性。同时，释放的钾离子作用于牙本质小管内的牙髓神经末梢，干扰神经传导，阻断神经细胞对疼痛信号的传递，降低牙髓神经敏感性，缓解牙本质过敏的症状[15]。因此，极固宁具有双重脱敏效果。目前钙盐、钾盐、锶盐是公认的具有脱敏效果的成分，且这些组分均可以与牙本质中的羟基磷灰石形成沉淀物[16]，沉积在牙本质表面及小管内，减小液体的流动，降低牙本质的通透性。通过SEM也可观察到，使用极固宁脱敏剂的牙本质表面覆盖大量鳞屑状结晶物，减小牙本质小管管径，甚至堵塞牙本质小管，降低通透性。

75%氟化钠甘油糊剂作为口腔科临床常用药物，对软组织无刺激性，不会使牙齿变色，应用安全方便，既有防龋的功效，又能治疗牙本质敏感症。其作用机制在于75%氟化钠甘油糊剂中的氟离子进入牙本质小管内，可与牙本质结构中的钙离子结合形成氟磷灰石晶体，沉积在牙本质小管内，减少牙本质小管的直径或封闭牙本质小管，降低牙本质通透性，达到脱敏作用。同时氟可以抑制牙本质的酸溶解，阻止牙本质小管开放，促进牙齿的再矿化，降低牙齿的敏感性[17]。

舒适达专业修复牙膏含有Novamin颗粒，其有效成分是单氟磷酸钠和磷硅酸钠钙。其中氟离子与羟基磷灰石形成氟磷灰石晶体沉积在牙本质小管内，降低牙本质通透性，同时氟可以阻止牙本质脱矿，促进其再矿化[18]。磷硅酸钠钙为无定形磷酸钙，当遇到唾液中的水分会形成磷酸钙结晶物，沉积在暴露的牙本质表面或深入到牙本质小管内部。Novamin颗粒还可持续释放磷离子和钙离子，深度封闭牙本质小管，同时使小管内神经去极化，降低神经兴奋性，缓解牙本质敏感症[19]。有研究表明，舒适达专业修复牙膏治疗牙本质敏感症的有效率为84.7%[12]。四种口腔脱敏材料均可不同程度的降低牙本质的通透值，其中Gluma脱敏剂和极固宁脱敏液降低牙本质通透值效果最好。体外灌注法进行通透性的测定，操作简单，结果可量化，能真实反映脱敏剂使用前、后牙本质通透性的变化。体外定量测定牙本质通透性的方法，可以作为评价脱敏效果的手段之一。本实验结果为今后临床脱敏剂的选择使用提供指导意义。