猪伪狂犬病特性研究及防控

于 磊，王竹军，李冰冰，张 宇

（1.赤峰市农牧业综合检验检测中心，内蒙古 赤峰 024000；2.绍兴市柯桥区畜牧兽医所；3.阜新市转型升级服务中心；4.南阳市动物疫病预防控制中心）

1 病毒特性

伪狂犬病病毒（PRV）是一种甲型疱疹病毒，与单纯疱疹病毒1 型（HSV1）和水痘带状疱疹病毒（VZV）相关。伪狂犬病是由疱疹病毒家族成员伪狂犬病病毒（PRV）引发的一种常见的传染病，具体传染特点表现为传播迅速、急性传染、地方流行性显著、死亡率较高。病毒寄生的主要宿主为猪，被感染伪狂犬病毒的猪会在不同时间段内出现病理性坏死，病理性坏死是细胞程序性死亡的一种炎症形式，感染伪狂犬病毒后，这种病毒以诱导细胞死亡的形式导致细胞死亡。PRV感染是通过与细胞受体结合以允许穿透细胞而开始的。到达细胞核后，病毒基因组引导一个受调控的基因表达级联，最终导致病毒DNA 复制和新病毒成分的产生，最后，子代病毒粒子自我组装并离开宿主细胞。除了猪这个主要宿主外，也有不少学者发现该病可通过家鼠感染其他动物，甚至也出现人类感染伪狂犬病毒的案例。因为这种病对新生仔猪有100%的致死率，并且对养猪业造成了巨大的破坏，经济遭受巨大损失。

2 流行病学

猪伪狂犬病有季节性，像普通的大多数病一样多发生在寒冷的季节，冬末春初是该病的高发时间段，因为寒冷的季节更有利于病毒的传播，延长了病毒的存活时间，但其他季节也有发生。猪场是伪狂犬病毒的温泉，病毒在猪场中肆虐传播。病猪、带毒猪、带毒猪场、带毒家鼠是该病毒的重要传染源。病毒通过空气及体液接触进行传播是该病毒传播的重要途径。病毒扩散类型除了空气传播、体液传播外，病猪可通过精液和胎盘传播［1］。该病表现为易感率高、发病急。在猪场内，病猪的体液、粪便可直接将病毒排出，相邻猪圈因空气流动直接患病，整个猪场也会因此将整个疫情扩散。不少学者认为，牛、羊、犬、猫、野生动物、肉食动物等感染该病与接触猪、鼠有关［2］。

3 临床症状和致病机理

感染伪狂犬病毒后，不同年龄的猪有不同的反应，年龄越大发病率和死亡率越低，新生仔猪有着相当高的致死率，最高可达100%，而成年猪因为其较高的抵抗力，因此多呈现为隐性感染。活下来的仔猪到了哺乳期，虽不发病但是长期带毒导致免疫力低下，各种有害应激反应会直接或间接引起该病病症发作。仔猪表现为高热、昏迷、嗜睡、四肢泳动、转圈、角弓反张、共济失调、抽搐、后肢麻痹、口流泡沫状液、呕吐、拉稀、咳嗽、打喷嚏、流鼻涕，育肥猪表现为高热厌食、呼吸道症状、偶有神经症状、增重受阻和发育障碍、饲料报酬率低，种猪表现为繁殖障碍和呼吸症状，妊娠母猪表现为木乃伊胎、死胎、流产，母猪表现为屡配不孕、返情率高，公猪表现为睾丸肿胀、萎缩、精液质量变差，丧失种用能力。PRV 编码的糖蛋白都是很容易被机体识别并排斥的靶标，这些有毒蛋白质大约被分为3 类，分别是囊膜蛋白、病毒DNA 代谢酶、病毒结构蛋白，这3 类蛋白质决定了PRV 毒力的大小。研究PRV囊膜表面糖蛋白，对于了解其致病机理有很大的意义。在分子层面上，是病毒宿主与病毒的相互作用机制。众所周知，囊膜蛋白是机体识别抗原的重要成分，现今已发现11种PRV的囊膜蛋白，这11种囊膜蛋白是机体识别的主要成员，也与病毒毒力存在一定关系。有研究表明病毒增殖的过程中必须要有糖蛋白的参与，非必须糖蛋白决定毒理的大小［3］。

4 临床诊断

可根据病猪的内脏等病理特征进行初步诊断，由于目前的病猪存在多种交错复杂的病理病症，一般采用常见的PCR检测、血清学检测等简单易行的检测方法。

4.1 PCR检测

根据伪狂犬病毒的稳定特殊序列设计出引物，目前扩增试验一般采集脑部组织作为病料进行PCR扩增快速检测。反应条件：95 ℃持续5 min，然后在94 ℃进行35个周期，40 s，52 ℃进行60 s，72 ℃进行1 min，最后在72 ℃延长10 min。PCR产物用溴化乙锭染色，并在1.5%琼脂糖凝胶上用紫外光进行可视化。

4.2 血清学检测

酶联免疫吸附试验，简称ELISA，在大样本量的病毒筛选检测中，成本低、成效快、特异性高、灵敏度强，也可以作为实验室检测的一种常规有效的检测方法。

5 疫苗免疫研究进展

目前尚无针对伪狂犬病的特效治疗药，疫苗免疫作为经济高效的防控依然是主要措施。从低毒力现场分离物获得的经典减毒活疫苗开始，根据疫苗类型不同，又主要分为灭活疫苗和减毒疫苗。基因工程疫苗目前正在研发中，AD疫苗通过首次使用缺乏毒力决定基因的基因工程活病毒疫苗和DIVA的概念，开创了动物疾病控制的新策略，即通过使用标记疫苗和相应的伴随诊断试验，将接种疫苗的动物与田间病毒感染动物进行血清学鉴别。活疫苗中使用最广的是Bartha-K61 株，目前有40 家生产厂家获批生产。

笔者发现甘草多糖（GCP）在体外具有抗PRV 感染活性，600 μg/ml GCP可以完全阻断病毒感染。在PRV感染的同时或感染后添加GCP对PRV有显著的抑制作用。在病毒生命周期的不同阶段添加GCP主要抑制PRV的附着和内化，但不影响病毒的复制和释放。研究结果表明，GCP作为一种抗PRV感染的药物具有很大潜力。我国目前每年需要免疫的猪有8亿头份，疫苗研发有着巨大的市场，相信在这么大的需求刺激下，未来经过疫苗研发公司的努力可以达到伪狂犬病毒彻底的防控和净化。

6 防控措施

目前大多数疫苗因为猪场阳性率太高，导致疫苗的免疫保护作用甚微。除了伪狂犬病毒外，其他病毒也因为阳性率过高导致猪只抵抗力差，在各种病毒不断的攻击下，呈现出较低的防御力，因此大多数猪场采取的防控措施都是提高猪只抵抗力。

目前的商业疫苗无法提供针对PRV 感染的完全保护，因此，抗病毒药物可以作为控制和预防PRV的替代方法。研究了解到美克利嗪在分子机制上对PRV有潜在的抑制作用。在病毒感染之前、同时或之后添加美克利嗪对PRV表现出显著的抑制作用。美克利嗪的抑制作用发生在病毒进入和细胞间扩散期间，而不是在病毒附着到PK-15 细胞时。美克利嗪还抑制感染后期的病毒颗粒释放。在小鼠身上测试了美克利嗪的抗病毒作用，结果表明美克利嗪降低了PRV攻击后临床症状的严重程度和组织中的病毒载量，并延迟了死亡。以上结果表明美克利嗪对PRV有抑制作用。该研究结果将有助于开发针对PRV感染的潜在治疗药物。