尿液胱抑素C检测在肾损伤中的诊断价值

李轶春，黄日昇，刘建航，彭云娟，岑文新，梁国玲

（北海市中医医院医学检验科，广西 北海 536000）

随着人民生活方式、饮食结构等变化，使高血压、糖尿病、冠心病等发病率呈增高趋势，容易导致肾损伤，因此能早期发现其损伤的标志物对肾病的诊治尤为重要[1]。胱抑素C（cystatin，CYS-C）为半胱氨酸蛋白酶抑制剂C，由120个氨基酸组成，低相对分子质量、碱性非糖化蛋白质，位于人类第20号染色体,能通过肾小球滤过被肾小管上皮细胞重吸收并在细胞内降解，而肾小管上皮细胞本身则不分泌CYS-C[2-3]。因此肾脏出现轻微损害时即可在外周血检测到CYS-C水平显著增高，是肾损伤早期诊断理想的内源性标志物[4]。研究发现原发性肾小球疾病或肾血管疾病以及其他疾病病累及引发的肾损伤多伴有不同程度的肾小管间质损害，引起CYS-C在肾小管重吸收障碍，致使尿液中CYS-C浓度升高，尿液CYS-C可作为评估肾小管功能的重要指标[5]。但目前，肾功能检测指标多以血清胱抑素C检测为主，尿胱抑素C的检测诊断浓度区间等还存在争议。本研究旨在通过评价尿液CYS-C对肾损伤的诊断价值，协助建立肾损伤患者的尿液CYS-C诊断浓度区间，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2021年2月-10月北海市中医医院肾病科门诊及住院收治的肾损伤患者45例作为肾损伤组（慢性肾脏病1-5期20例，肾功能不全7例，其他肾病3例，肾病综合征15例），其中男29例，女16例，年龄22～84岁，平均年龄（44.4±16.7）岁；另选择同期55例健康体检者为健康对照组，其中男39例，女16例，年龄18-58岁，平均年龄（23.8±8.9）岁。准入标准：①符合《肾脏诊断学》诊断标准，肾损伤参照实验室诊断[6]；②临床资料完善；③获得医院医学伦理委员会批准，所有患者知情同意。排除标准：使用糖皮质激素或甲状腺异常患者。

1.2 方法分别采集两组受试者空腹肘静脉血5 mL和清晨中段尿5 mL。血液标本室温静置30 min后，3 000 r/min 离心10min ,取上层血清待测；尿液标本1 000 r/min离心15 min，取上层尿液待测。血尿素和血肌酐分别使用尿素酶-谷氨酸脱氢酶法和肌氨酸氧化酶法检测，试剂由北京安图生物工程有限公司提供；尿液CYS-C使用胶乳免疫比浊法检测，试剂由北京九强生物技术股份有限公司提供。以上项目均由同一实验组人员，同一批号质控品，按照《全国临床检验操作规程》第四版的要求及标准作业指导书在佳能TBA-FX8全自动生化仪检测完成。实验期间所有室内质控均在控，室间质评均合格。血尿素参考范围为1.17-8.3 mmol/L；血肌酐参考范围为：男性71.0～115.0 μmol/L，女性53.0～88.0 μmol/L；尿液CYS-C参考范围为：0.03～0.3 mg/L，以上项目超出参考范围判断为 异常。

1.3 观察指标血尿素、血肌酐、尿液CYS-C其在两组试验者中的浓度变化；ROC曲线评价尿液CYS-C、血尿素、血肌酐单独及三者联合检测对肾损伤的诊断效能。

1.4 统计学分析应用SPSS 22.0统计软件进行数据分析。计量资料符合正态分布，以均值±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。采用ROC曲线评价尿液CYS-C、血尿素、血肌酐单独及联合检测对肾损伤的诊断效能。

2 结果

2.1 两组检测项目结果比较肾损伤组与健康对照组血尿素、血肌酐、尿液CYS-C检测结果显示，肾损伤组明显高于健康对照组，并且尿液CYS-C增高幅度最大，可达到健康对照组的51倍，两组结果比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组检测项目结果比较( ±s)

表1 两组检测项目结果比较( ±s)

组别 例数 血尿素（mmol/L）血肌酐（μmol/L）尿液CYS-C（mg/L）肾损伤组 45 7.506±5.238 138.227±117.046 0.329±0.642健康对照组55 4.729±1.104 78.780±13.936 0.047±0.026 t值 -3.833 -3.833 -3.26 P值 0.001 0.001 0.002

2.2 ROC曲线评价尿液CYS-C、血尿素、血肌酐单独及联合检测对肾损伤的诊断效能尿液CYS-C最佳截断值为0.095 mg/L，相比血尿素、血肌酐检测有更高的敏感度、特异性和AUC，且联合检测能提高肾损伤诊断的敏感度和特异性，见表2及图1。

图1 尿液CYS-C、血尿素、血肌酐单独及联合检测ROC曲线

表2 各指标单独检测及联合检测ROC曲线分析

3 讨论

随着经济发展、生活方式、年龄及饮食结构等的变化，使高血压、冠心病、糖尿病等呈上升趋势，这给老人的生活质量及生命健康带来了巨大的威胁[7-8]。CYS-C属半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族，广泛存在于植物、细菌、病毒、原生动物和哺乳动物组织中，其在预测心血管疾病、糖尿病肾病及先兆子痫等方面具有独特的优势，是评定肾小球滤过率（GFR）变化和肾小管损伤的优良内源性标志物，对肾损伤起到早期诊断作用[9-10]。而使用尿液CYS-C评估肾小管间质损害的研究报道不多，其在肾损伤诊断浓度区间等还存在争议。

本研究结果显示，血尿素、血肌酐、尿液CYS-C检测结果，肾损伤组均明显高于健康对照组。肾损伤组尿液CYS-C（0.329±0.642）mg/L相比健康对照组（0.047±0.026）mg/L 增高幅度更大，可达健康对照组的51倍，尿液CYS-C相比血尿素、血肌酐检测有更高的敏感度、特异性和AUC，且联合检测能提高对肾损伤诊断的敏感度和特异性。有报道指出，尿液中CYS-C的浓度与血清CYS-C和血肌酐具有良好的相关性[11]，但传统的肾小球滤过率（GFR）标志物血尿素和血肌酐容易受到蛋白摄入量、某些药物、体内代谢水平及个体肌肉量影响，在肾功能轻度减退时，其敏感性低于胱抑素C[12-13]，联合检测更适用于早期肾损伤的诊断。谢东德等[14]则指出当肾小球轻微病变时，血清CYS-C水平就会升高，能代替血尿素和血肌酐，成为GFR理想标志物，当肾小管损伤时，肾小管功能发生紊乱，尿液 CYS-C含量能上升200倍[15]，尿液CYS-C明显高于血清CYS-C水平。故尿液CYS-C可作为肾损伤诊断标志物，同时检测尿液与血清中的CYS-C浓度变化可以推测肾损伤的部位及评估肾损伤严重程度，联合血尿素和血肌酐检测能提高肾损伤诊断的敏感度和特异性。

通过本次研究还发现，尿液CYS-C检测ROC曲线AUC为0.835，敏感度为65%，特异性为80%，最佳截断值为0.095 mg/L与王慧等[16]研究的AUC为0.828，敏感度为76%，特异性为84%，最佳截断值为0.075 mg/L相近，均小于试剂盒提供的临界值0.3 mg/L。由此推测临床有较大部分早期肾损伤患者，尿液CYS-C检测结果不超过0.3 mg/L， 此时的诊断可能要参考实验室修订的参考范围并结合临床症状等综合判断，检测结果在0.095～0.3 mg/L范围以内，仍然存在肾损伤风险。由于本次研究组例数较少，未能依据美国肾病NKF-K/DOQI工作组制定的指南[17]，将入选的肾病患者按照eGFR水平分期统计分析，尿液CYS-C对肾损伤的诊断价值及诊断浓度区间，仍有待多中心检测研究分析。由此更多的研究报道[11,14-15,18]，建议尿液CYS-C联合24 h尿微量蛋白（24 h UMA）、N-乙酰-β-D - 葡萄糖苷酶 （NAG）、α1 -微球蛋白（α1-MG）、嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质转运蛋白（NGAL）等项目检测以提高肾损伤诊断的准确性。

综上所述，尿液CYS-C可作为肾损伤诊断标志物，当浓度超过0.095mg/L时对肾损伤早期诊断有一定的诊断价值，联合血尿素和血肌酐检测能提高肾损伤诊断的敏感度和特异性。