王玙 赵保生 成小莉
(甘肃省天水市动物疫病预防控制中心,甘肃天水 741000)
安卡拉病又称心包积液—肝炎综合征,是由腺病毒科、禽腺病毒属的I 群禽腺病毒血清4 型(Fowl Adenovirus 4)所引起的一种以心包积液和肝炎为典型病理特征,兼具有肺水肿、肾水肿等病变的高度接触性传染病。该病潜伏期短、发病快,可以水平传播,也可垂直传播,主要侵害肝脏、脾脏、肾脏,病禽发病快,多以急性死亡为主[1]。该病的临床表现为渗透压减少,血管通透性增加,脾脏肿大,全身组织循环不畅,组织液聚集于心脏,进而引发心包积液[2]。主要感染3~5 周龄的肉鸡,致死率高达80%,一般在感染后3 周开始出现死亡,第4 周死亡率达到最高,第5 周死亡率开始下降。1987 年首次发现于巴基斯坦卡拉奇靠近安卡拉的地方而得名,随后在亚洲、欧洲和南美洲等地区流行[3]。1997 年,我国在肉鸡上首次报道有该病发生,自2015 年以来,我国山东、江苏、河南等9 个省的家禽相继发生该病,并迅速在我国大范围流行,严重威胁养禽业的发展[4]。根据不同国家的研究情况看,FADV-4 是该病流行的主要血清型[5]。近几年,禽流感、新城疫等疫情相对稳定,但安卡拉、禽滑液囊炎等新发病越来越多,给养殖户造成巨大的经济损失,不间断的区域监测十分重要。本研究连续3 年对天水及周边地区家禽安卡拉病的流行情况展开调查,对部分养殖场发病家禽进行临床观察,对死亡家禽进行剖检,观察病理变化并采样进行相应的实验室检测,基本掌握了当前家禽安卡拉病的基本流行情况,以期为当地家禽安卡拉病的综合防控提供对策和数据支撑。
自2017 年以来,天水及周边成县、礼县等地区规模鸡场发现少量鸡只精神萎靡不振,双翅耷拉,排黄色稀粪,伴有神经症状,两腿划空,数分钟内死亡的病例,传播速度快、死亡率高。2018 年后该病开始大面积流行,对养殖户造成一定的恐慌和经济损失。本研究于2018 年6 月开始实地走访家禽养殖场、部分乡镇动物疫控与畜牧技术服务中心、兽药店、种禽批发商,对家禽引种、免疫、禽只调运以及近几年主要疫病和新发病的种类、发病原因、传染源、传播途径等情况展开调查。
在实地走访调查过程中,根据养殖场以往发病史和发病现状随机选择93 个鸡场、1 个鸭场、2 个信鸽场采集血液样本1222 份,其中鸡血液样本1070 份(有疑似安卡拉临床症状及发热阶段的病鸡血液样本144 份)、鸭子血液样本90 份、信鸽血液样本62 份,置4℃冰箱中过夜,自行析出血清后用移液枪吸取上层血清至另一个新的无菌EP 管中,做好标记后置于-20℃保存,待检。
1.3.1 试剂
FAVDⅠAb.ELISA 检测试剂盒,美国KERNEL公司生产,批号 200212;禽腺病毒血清4 型核酸检测试剂盒(荧光PCR 法),抚生实业公司生产,批号FADV420192201。
1.3.2 方法
首先通过ELISA 检测方法对1222 血清样本进行安卡拉病抗体检测,以便对可能感染过安卡拉病毒的禽只和接种过安卡拉疫苗的禽只进行初步筛选,再采用荧光PCR 检测方法对有疑似安卡拉临床症状的144份病鸡样本和安卡拉抗体检测呈阳性的23 份鸭子血清、14 份信鸽血清进行安卡拉病毒核酸检测并确诊。所有检测方法均按着试剂盒说明书进行。
利用Excel 对所有实验室检测结果根据不同检测方法、动物种类、不同日龄进行统计。
本研究现场流行病学调查时间为2018 年6—2021年12 月,共计调查1080 个规模养殖场。调查发现,天水地区家禽安卡拉病于2017 年开始零星发病,当时由于缺少疫苗保护和有效的防控措施,加之混合感染普遍存在,2018—2019 年后开始大面积流行。通过查看免疫记录和诊疗记录,并经养殖场人员证实,起初养殖户主要通过注射法氏囊精制卵黄抗体和中药来控制该病的发生,但由于安卡拉病毒持续在鸡群内潜伏感染,造成鸡群隐性感染或带毒传播,使得该病的流行一直在扩大,加之该病传染性强,死亡率高,给养殖户造成很大的经济损失,2019 年后半年大多养殖户开始接种市面上非法生产的腺病毒疫苗来控制该病,非法疫苗的接种对家禽安卡拉病的感染起到一定的保护作用。2020 年以来,安卡拉病得到一定的控制且无大面积流行,趋于平稳势态,但在一些养殖场仍有零星发生。
在流行病学调查过程中,对发病当天死亡鸡只进行解剖,观察到心包积有淡黄、透明的渗出液,呈胶冻状,心肌柔软(图1a);肝脏充血肿大、边缘变圆、质地变脆(图1b)。
图1 病死鸡心脏解剖图
经流行病学调查发现,被污染的鸡胚和种公鸡精液是该病的主要传染源。由于天水种鸡场相对较少,养鸡场鸡苗主要从陕西、宁夏两省引进,种源净化管控措施不到位,导致该病传入本地,使得垂直传播成了主要传播途径。其次是场群内患病鸡、隐性带毒鸡、被污染的环境、饮水、饲料等形成的水平传播。
2.4.1 鸡安卡拉病检测结果统计
通过LISA 检测方法共检测鸡血清样本1070 份(包括有安卡拉临床症状及发热阶段的病鸡样本144份),结果显示,2018—2021 年鸡安卡拉抗体阳性率为23.68%~76.52%(平均为57.76%),场阳性率为33.33%~83.87%(平均为62.37%);通过荧光PCR检测方法对144 份病鸡血清样本进行安卡拉病毒核酸检测,结果显示,2018—2021 年鸡安卡拉病毒核酸阳性率为12.5%~34.290%(平均为24.31%)、场阳性率为40.00%~66.67%(平均为47.83%)。具体数据见表1。
表1 2018-2021 年鸡安卡拉病实验室检测结果
2.4.2 不同日龄肉鸡和蛋鸡安卡拉病毒核酸检测统计
PCR 检测结果显示,45~130 日龄肉鸡病毒核酸阳性率为29.73%,场阳性率为8.11%;130~450 日龄肉鸡病毒核酸阳性率为17.14%,场阳性率为5.71%;45~130 日龄蛋鸡病毒核酸阳性率为19.05%,场阳性率为9.52%;130~450 日龄蛋鸡病毒核酸阳性率为21.43%,场阳性率为7.14%。具体数据见表2。
表2 不同日龄肉鸡蛋鸡安卡拉病毒核酸检测结果
2.4.3 其他家禽安卡拉病检测结果统计
通过LISA 检测方法共检测鸭子血清样本90 份、信鸽血清样本62 份,结果显示,鸭子和信鸽安卡拉抗体阳性率分别为25.56%、22.58%,场阳性率分别为100%、50%;通过荧光PCR 检测方法对安卡拉抗体检测呈阳性的23 份鸭子血清样本、14 份信鸽血清样本进行病毒核酸检测,结果显示鸭子和信鸽安卡拉病毒核酸阳性率、场阳性率全部为0%。具体数据见表3。
表3 鸭子信鸽安卡拉病实验室检测结果
本次流行病学调查及实验室检测证实了该病在天水及周边地区规模养鸡场普遍存在,主要传染源为被污染的鸡胚和种公鸡精液。因此,该病的预防控制首先要确定种源安全,不要从疫区引进鸡苗。其次要及时进行实验室检测,规模鸡场在发病初期应迅速送检,通过实验室检测诊断尽快确诊病因,对症处理,以免延误病情造成更大的损失。三是加强饲养管理,严格生物安全措施,进场车辆、物料、垫料、淘汰鸡、笼具等严格执行本场制定的消毒程序和方案,加强粪便无害化处理,有研究表明,40 日龄以内的鸡群是本病的高发鸡群[6],因此在雏鸡饲养过程中要加加强该病的防控。四是选择正规厂家的优质疫苗,2021年6 月,我国首个禽腺病毒病灭活疫苗(新流腺三联灭活疫苗)获批新兽药证书,该疫苗的上市可为该地区家禽养殖业提供疫苗保障。
该研究于2018—2021 年对1080 个规模养殖场开展现场走访、实地勘察,对93 个不同规模鸡场、1 个鸭场、2 个信鸽场的1222 份血清样本进行实验室检测。调查结果显示,该病在天水及周边地区规模养鸡场普遍存在,低日龄肉鸡感染率高于蛋鸡,随着日龄增加,肉鸡感染率降低,蛋鸡感染率增加,鸭场和鸽子场尚未发现感染。