NSCLC中EZH2对免疫微环境影响的研究进展

王儒帅 ，呼群 ，张影花 ，郭家毓 ，领兄 ，王悦

（1.内蒙古医科大学，内蒙古 呼和浩特 010050；2.内蒙古医科大学附属医院肿瘤内科，内蒙古 呼和浩特 010050）

1 EZH2通过表观遗传调控免疫

EZH2基因定位于7q35染色体，是包括20个编码746个氨基酸残基的外显子，是PRC2的核心酶亚基。在多种癌症中可观察到 EZH2 的失调会改变许多抑癌基因的表达从而促进肿瘤的发生。此外，EZH2还可启动癌症发生发展过程中的多种分子过程，例如 NF-κB激活、microRNA 沉默以及其他非经典转录途径调控。EZH2 通过甲基化组蛋白H3第27位赖氨酸（trimethylation on histone 3 lysine 27，H3K27me3）来抑制基因表达，因此被认为是组织发育和干细胞生长方向的关键表观遗传物质。同时EZH2可以调节细胞周期进程，控制细胞自噬和细胞凋亡，促进DNA损伤修复并抑制细胞衰老，影响抗原呈递。当EZH2发生突变（包括过表达，表达下调和表达缺失）时可能会导致癌症的发生、进展和转移[6-8]。

表观遗传调控是指在不改变DNA序列的前提下，通过大规模更改基因表达实现细胞变化。最近的研究表明[9]，表观遗传修饰不仅可以改变癌细胞表型，还可以改变免疫细胞表型。通过修饰表观遗传物质调控免疫细胞的功能和表型，从而杀死细胞并调节免疫功能。此外，表观遗传修饰因子可以激活许多沉默基因，其中一些是触发免疫反应的免疫检查点调节剂，而另一些则会抑制免疫反应，导致肿瘤细胞逃避免疫。EZH2作为细胞表观遗传状态的关键调节剂，即EED，SUZ12和RbAp46/48的PRC2的核心酶亚基，EZH2通过甲基化H3K27me3会影响染色质螺旋化，从而促进靶基因转录沉默。在正常人体组织中，EZH2通过控制组织特异性干细胞中的基因表达程序来维持各种组织的体内平衡。

2 EZH2和CD8+T细胞

CD8+T细胞，也称为CTLs，是免疫应答中抗原特异性细胞毒性的主要介质，依赖于主要组织相容性复合体1（major histocompatibility complex-1, MHC-1）。在肿瘤中，癌细胞产生的抗原中的短肽会促进CD8+T细胞增殖并分化为足够数量的短寿命CD8+T效应细胞，以减少表达抗原的肿瘤细胞的数量，同时会减少T细胞分化为长寿命记忆性CD8+T（Tm）细胞，以免当抗原重复递呈时快速对抗原作出反应[10-11]。EZH2与非血液细胞的组蛋白修饰功能一致，它也修饰CD8+T细胞的组蛋白甲基化。研究证明，与外周血和非肿瘤组织相比，各种肿瘤组织中EZH2阳性表达的CD8+T细胞数量百分比均下降[12]。

2.1 EZH2影响CD8+T细胞呈递抗原

向免疫细胞呈递抗原是细胞免疫第一步，CD8+T细胞会识别并杀死与MHC-1结合的外源抗原的细胞，所以在抗肿瘤过程中肿瘤相关抗原作为特定靶点是免疫疗法最重要的目标之一。而癌细胞则通过破坏CD8+T细胞主导的抗原呈递使免疫系统无法激活 并建立有效的抗肿瘤反应。研究表明[13]大多数癌细胞抗原呈递水平极低，甚至难以引发免疫反应。EZH2调节异常引起的表观遗传变化已被确定为通过控制基因转录来抑制肿瘤细胞免疫原性呈递的主要机制，即通过EZH2抑制基因转录达到阻断癌细胞抗原呈递途径的作用。由于EZH2调节细胞周期进程，所以EZH2失调会加速细胞增殖，并延长细胞存活时间，这也可能导致癌变和癌症发展。研究表明[14-15]，在乳腺上皮细胞中EZH2的过表达可以诱导定植的癌细胞生长及侵袭。在K562白血病细胞中EZH2通过抑制H3K27me3起到了维持肿瘤细胞MHC-1沉默的作用。同样在小细胞肺癌和神经母细胞瘤等神经内分泌肿瘤中，EZH2也通过减少MHC-1从而降低抗原呈递获得免疫特权，这些证据均证明了EZH2的促癌作用。鉴于对PD-L1 /PD-1抗体具有原发性耐药的患者部分缺乏活化的免疫细胞，这激发了我们通过表观遗传药物的治疗来增强对免疫细胞的识别和激活，从而进一步增加免疫细胞的浸润和PD-L1 /PD-L1的活性。

2.2 EZH2影响CD8+T细胞增殖

CD8+T细胞的增殖发生在T细胞的免疫应答过程中。EZH2通过抑制细胞周期调节因子（cyclin-dependent kinase inhibitor，CDKN）中CDKN2A和CDKN2C的表达促进CD8+T细胞的细胞周期进程。同时研究发现，缺失EZH2的活化CD8+T细胞中CDKN2A和CDKN2C的表达水平会上升，同时H3K27me3水平降低[16]。

EZH2独立控制CD8+T细胞的分裂周期和凋亡。探讨EZH2对CD8+T细胞分裂和凋亡的调节作用时，动物实验结果显示[16]，在EZH2低表达的小鼠身上原始的CD8+T细胞表现出增殖减少，G0/G1期细胞数增加，S期细胞数减少，但凋亡没有增加，但被细菌感染后T细胞凋亡反应增强。以上均强调了在细胞免疫应答过程中维持CD8+T细胞EZH2的正常表达的重要性。

3 EZH2和CD4+T细胞

CD4+T细胞又称Th细胞，分为2种主要亚型：1型（Th1）和2型（Th2）。它们对抗肿瘤的免疫作用依赖于细胞因子如干扰素，肿瘤坏死因子，白介素-2、白介素-4、白介素-5和白介素-6。尽管CD4+T细胞与抗肿瘤功能之间仅有间接关系，但仍可以间接预测肿瘤患者生存状态。最近的研究表明，患者体内CD4+T细胞的基本状态是临床PD-L1/PD-1阻断治疗的一个重要因素。

3.1 EZH2可负性调节Th细胞亚型的分化

EZH2的染色质调节功能对于CD4+辅助性T细胞规范化为效应细胞系（包括Th1，Th2和Th17）十分重要。EZH2通过H3K27ME3直接靶向作用并沉默部分基因来抑制Th细胞分化。Tumes等[17]通过染色质免疫沉淀测序（ChIP-seq）图谱发现EZH2可以通过控制TFS-T-Box TF（T-Bet），GATA3和eomes这3个关键点表达抑制效果，从而证明在原始的CD4+T细胞中敲除EZH2基因与调节Th1和Th2细胞的分化偏移有关。T-Bet促进Th1细胞分化，GATA3与Th2细胞分化有关，eomes会编码与T-Bet密切相关的T-Box TF，同时还会诱导Th细胞产生干扰素。

EZH2作为CD4+T细胞中谱系特异性基因的转录抑制物发挥作用，并负向调节Th细胞亚型的分化。与EZH2在Th1和Th2细胞中的调节作用不同，EZH2在Th17和Th9等其他Th细胞分化中的调节作用仍存在争议，值得进一步研究。

3.2 EZH2参与T细胞迁移

肿瘤可大致分为热（T细胞浸润）和冷（非T细胞浸润的）肿瘤两种类型。热肿瘤中会有大量淋巴细胞浸润并且免疫反应十分活跃。但在冷肿瘤中缺乏大量淋巴细胞浸润，从而导致其不易被免疫系统识别，免疫反应较差。免疫治疗抗肿瘤的重要步骤就是使T细胞融入肿瘤微环境中，而EZH2会参与T细胞迁移入肿瘤微环境的过程。通过对免疫系统的研究[18]，总结出T细胞无法浸润肿瘤的原因可能由肿瘤细胞，趋化因子和抑制性免疫细胞共同诱导血管通透性改变所致。同时也有证据表明[19]表观遗传改变可以影响T细胞向肿瘤微环境迁移及浸润，EZH2介导的DNA甲基转移酶1（DNA methyltransferase 1, DNMT1）和H3K27me3会通过DNA甲基化作用下调趋化因子配体9和10的表达来抑制效应T细胞的表达，并抑制T细胞转运至肿瘤微环境中。在 研究和卵巢癌结肠癌的抗肿瘤免疫过程时发现，该过程中CXCR 3优先通过活化的Teff细胞表达，Th1细胞分泌趋化因子配体（CXCL10）从而响应干扰素的分泌，并诱导Teff细胞迁入到肿瘤微环境中[20,21]。研究发现，CXCL10-CXCR3轴可以调节白细胞运输并促进T细胞迁移，从而实验抗肿瘤免疫。EZH2通过抑制Th1细胞分泌CXCL10来抑制CXCL10-CXCR3轴的活性，从而抑制Teff细胞向TME的迁移。因此，EZH2对T细胞迁移起抑制作用，从而可以抑制免疫系统抗肿瘤。

4 EZH2和TREGS

调节性T细胞（Tregs cell）是由FOXP3转录表达的CD4+T细胞的重要免疫抑制亚群，是维持机体免疫动态平衡的关键，在免疫应答过程中对Tregs细胞具有抑制功能。几乎在所有类型的癌症中，Tregs细胞出现的频率都很高，在大多数实体肿瘤中，这些Tregs细胞会促进肿瘤细胞逃避免疫监视[22-24]。研究表明[25-27]，与来自正常组织的Teff细胞和Tregs细胞相比，浸润肿瘤中的Tregs细胞，其EZH2 的表达水平增高。使用ChIP-seq分析H3K27me3 全基因组显示[34]，与来自外周血的初始 T 细胞相比，活化的Treg和Teff细胞中的 H3K27me3 水平增加。

4.1 EZH2维持Treg的稳定性和免疫抑制功能

EZH2对Treg细胞的稳定性起关键作用。无论是药物或遗传性EZH2缺乏不仅导致FoxP3表达减少，而且其他关键基因，如Neuropilin-1和BACH2表达减少，这都会使得Treg细胞保持良好的稳定性。在小鼠模型中表明[28-30]，EZH2抑制剂CPI-1205会引起Tregs的表型和功能改变，所以使用抑制EZH2表达的药物会损害Treg细胞的功能，但不影响其增殖。Goswami等人[31]将诱导的Treg细胞与Teff细胞共培养，发现CPI-1205不影响Treg细胞增殖，但会抑制其功能，并使Treg细胞的表型偏向于促炎细胞因子产生的效应T细胞的表型。

EZH2基因缺失与EZH2药物抑制会导致不同的特定表型。与Treg.EZH2Δ/+小鼠中的Tregs相比，Treg.EZH2Δ/Δ小鼠中的EZH2缺陷型Tregs细胞在淋巴结和胸腺中的比率会增加，而在血液和脾脏中没有增加。此外，老年Treg.EZH2Δ/Δ小鼠的表面蛋白CTLA-4、PD-1、CD103和GITR的表达水平高于老年Treg.EZH2Δ/+小鼠。同时，在所有非淋巴组织中的Treg细胞比例都显著降低，这些树突状细胞的抑制肿瘤的能力受到损害，不能维持免疫稳态[22,33]。

Tregs细胞中 EZH2 的功能障碍也会改变肿瘤微环境，导致炎症和活化的 T 细胞富集。在Treg.EZH2Δ/Δ小鼠中 EZH2 的稳定或瞬时缺失均会导致 TIL 中激活的 CD4+和CD8+T细胞的比例增加，类似于用 EZH2 抑制剂CPI1205 治疗的结果。然而，肿瘤往淋巴结转移的结果存在争议，Wang 等人发现[32,34]，与对照小鼠相比，EZH2表达缺失的小鼠肿瘤生长速度显着降低。EZH2缺失的小鼠表现出增强的TIL功能，其特征是 IFNγ、TNF-α和IL-2 的产生增加，但CD4+和CD8+T细胞产生的IL-10 减少。

因此，单独使用特异性靶向Tregs的EZH2抑制剂，或联合免疫检查点抑制剂（如CTLA-4、PD-1和GITR）阻断肿瘤生长，将是一种很有前途的抗肿瘤免疫治疗方法。

4.2 免疫耐受需要EZH2

小鼠实验中所有Tregs细胞的EZH2位点被抑制或缺失的小鼠均未能维持免疫耐受，导致与大量T细胞活化，同时细胞因子产生系统性自身免疫毒性，这与EZH2缺乏的Tregs细胞表现出促炎症表型的发现一致，并发展为多器官自身免疫[22,32,33]。相比之下，雌性 Foxp3YFP-cre/Foxp3WT；携带野生型和EZH2缺陷型Treg细胞的EZH2fl/fl小鼠没有表现出自身免疫症状。Wang 等人发现一个有趣的结果[33]，相比于耗竭体内Treg细胞， EZH2 缺陷型Treg细胞在小鼠模型中赋予肿瘤的保护作用更强，这表明破坏EZH2 的功能比单纯减少Treg细胞更有效。Goswami等人报道[31]，在接受易普利姆玛（一种抗CTLA-4 抗体）治疗后，所有人类CD4+Teff细胞、CD8+T细胞和Tregs细胞中的EZH2表达均增加。这一发现再次引发了这样一个假设，即靶向抑制Tregs细胞中的EZH2与免疫抑制治疗药物易普利姆玛组合可能会增加抗CTLA-4治疗的有效性，并且这一假设在鼠模型中得到证实。

5 EZH2和TFH/TFR细胞

在抗原呈递期间，一些活化的CD4+T细胞分化为Tfh细胞[35]。Tfh细胞是一种依赖于B细胞淋巴瘤（BCL）6的细胞，主要作用为促进细胞成熟、细胞类别转换以及浆细胞分化来启动和维持生发中心反应[36-38]。Tfr细胞和Tfh细胞的起源相似。Tfr细胞是一种调节性效应T细胞的亚群，大部分与nTreg前体无关。在细胞微环境中，Tfr细胞的功能与Tfh细胞相反，Tfr细胞会抑制B细胞效应，所以Tfh和Tfr细胞是免疫激活和免疫耐受平衡不可缺少的细胞。不受控制的Tfh或Tfr活性可导致免疫耐受的丧失和高水平的自身抗体，从而导致自身免疫。据报道，在非淋巴样肿瘤中Tfh细胞浸润与免疫抑制减少有关，数据表明Tfh细胞浸润程度与患者生存率呈正相关，这意味着Tfh细胞存在一定的保护作用[39]。

5.1 EZH2在早期细胞承诺期促进Tfh分化

EZH2在Tfh细胞中的表达在不同时期有所不同。Chen等人[40]观察到，在急性淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒感染的小鼠模型中，早期病毒特异性Tfh细胞与Th1细胞相比，Tfh细胞中EZH2会高度表达且存在相关的H3K27me3修饰。然而，EZH2的表达会在Tfh细胞分化过程中下降到平均水平。

据报道，EZH2可抑制CDKN2A以促进Tfh细胞存活和分化，抑制EZH2表达可损害Tfh细胞分化和Tfh转录程序的激活。在病毒特异性CD4+T细胞中通过基因沉默抑制EZH2表达，从而破坏了Tfh特异性染色质状态，显著减少了早期定性的Tfh细胞群。然而，EZH2对晚期已分化的Tfh细胞和记忆性Tfh细胞没有这种作用。所以，在早期Tfh细胞定型期间是否沉默EZH2 与Tfh谱系分化相关基因的表达有关。EZH2 位于Tfh谱系分化相关基因簇的启动子处，如 BCL6、诱导性T细胞共刺激物(ICOS)、Maf和 IL-21，或位于CXCR5的上游区域和内含子区域的ICOS。Tfh细胞的产生依赖BCL6，EZH2作用于BCL6上游以促进Tfh细胞分化。有趣的是，所有这些EZH2占据的基因位点都显示出强烈的H3K27乙酰化信号，对应于较少基因位点中EZH2介导的H3K27me3修饰。因此，在通过EZH2靶向免疫疗时，应考虑额外补充Tfh细胞[40-41]。

5.2 EZH2是Tfr细胞抑制B细胞功能所必需的

FoxP3能促进Tfh细胞向Tfr样功能状态转化。丧失FoxP3表达的Tfr细胞会变为Tfr细胞前体，并表现出抑制B细胞功能能力受损。Tfr细胞中EZH2 缺陷的基因子集与 FoxP3 下调或缺失的基因子集重叠，因此EZH2和FoxP3在调节Tfr细胞的分化和抑制功能方面存在部分功能重叠。[42]EZH2缺失促进Tfr细胞的增殖，但削弱了Tfr细胞对B细胞的抑制功能。EZH2fl/flFoxp3Cre小鼠表现出Tfr细胞比例增加，但Tfr细胞向B细胞滤泡的迁移能力增强，增强了向IgG1的类别转换重组和抗体分泌，结论表明通过靶向Tfr细胞中的EZH2可以进行免疫治疗的假设。

6 EZH2和HSCs

造血干细胞（HSCs）可以分化成各种血细胞亚型并维持自我更新的能力。在胚胎和成体HSC中，PcG蛋白，包括PRC1和PRC2，通过3种机制调节HSC的静止、自我更新和分化：（Ⅰ）抑制细胞周期抑制剂P16INK4A防止细胞周期异常和p53介导的细胞死亡，（Ⅱ）维持对发育调节基因的抑制以阻止分化，以及（Ⅲ）当细胞分化时抑制替代细胞谱系。

EZH2是HSCs的重要组成部分。PRC2被认为是转录基因沉默的标志物，PRC2是胚胎发育和胚胎体存活所必需的。在胚胎发生过程中，任何成分的丢失都是致命的，特别是在原肠胚形成阶段。[43-45]PRC2复合体包括EZH1或EZH2，两者都含有相似的SET结构域。EZH2和EZH1是HSC的关键表观遗传调节因子，但表现出不同的抑制作用。[46-47]HSC中EZH2的表达水平随着年龄的增长而降低，而其同源物EZH1的表达水平则随年龄增加。EZH2表达的降低可以通过其同源物 EZH1得到部分补偿，这对于防止成人HSC的衰老至关重要。由于EZH1补偿，成人BM中的EZH2特异性缺失对 HSC 的影响很小[46,48-50]。在早期B细胞和T细胞发育的分化过程中对EZH2 的需求很大，当EZH2表达不足且EZH1代偿不足时，可能会导致B细胞和T细胞分化不足，造成免疫异常。

7 EZH2和NK细胞

NK 细胞对于不依赖主要免疫复合物的先天免疫系统至关重要，它可加速免疫反应，包括先天抗肿瘤反应[51-52]。NK细胞识别并清除目标细胞的机制不同于T细胞，NK细胞通过选择性杀伤和裂解靶细胞实现免疫清除作用，例如通过分泌穿孔素和颗粒酶直接杀死靶肿瘤细胞从而抑制肿瘤发生和肿瘤进展，并通过产生大量不同的细胞因子间接抑制肿瘤发生和进展。有肿瘤研究表明使用活化的NK细胞或带有CAR结构的NK细胞来增强机体抗肿瘤活性的过继免疫疗法有一定效果[53]。然而，NK细胞也在免疫系统中起调节细胞的作用。

EZH2是NK细胞表型变化、增殖、活化和细胞毒性活性的关键因素。与CD8+T细胞相反，EZH2负性调节NK细胞的增殖和活化。Yin等人[54]报道，造血细胞中缺失EZH2的EZH2f/fl小鼠均表现出脾脏、肝脏中NK细胞数量的增加。Nagel等人的早期研究描述PRC2会通过调节HOXA9和HOXA10在NK细胞分化过程中产生影响。随后的研究表明，EZH2失活或EZH2缺失都会通过促进NK细胞前体的存活而增强NK细胞表达。进一步的机理研究表明，EZH2增加NK细胞的增殖活化和细胞毒性的同时IL-15受体CD12和NK细胞活化受体NKG2D均会上调。

此外，EZH2 阻断剂通过诱导NK组2D(NKG2D)、IL-2受体β（也称为CD122）、TLRs和根除肿瘤细胞所需的颗粒酶的表达增加从而增加成熟 NK 细胞的活性。Bugide等人[55]证明在肝细胞癌的小鼠模型中，EZH2通过阻止NKG2D配体的转录会使肿瘤细胞逃脱NK细胞的免疫识别，从而使肿瘤细胞具有对NK细胞的抗性，这被认为是逃避NK细胞介导的细胞毒性的可能机制。EZH2是NKG2D配体的转录抑制因子。与这些观察结果一致，EZH2抑制剂治疗和EZH2基因缺失均以 NKG2D 配体（如ULBP1，MICA和MICB）依赖性表达增多的方式增强了NK细胞介导的杀肿瘤效果，而NKG2D缺陷降低了测试的小分子 EZH2抑制剂的抗肿瘤作用。同样，在肌肉浸润性膀胱癌模型中抑制EZH2不仅在KDM6A和SWI /SNF突变的情况下限制了肿瘤细胞的增殖，而且还促进了NK细胞活性，上调包括MIP-1α，ICAM1，ICAM2和CD86在内多种靶点，以及增加IFN-γ的表达。此外EZH2还参与了淋巴瘤细胞CD58的表观遗传沉默，该靶点丢失是淋巴恶性肿瘤中肿瘤免疫逃逸的常见机制。这意味着NK细胞中EZH2的破坏代表了一种潜在有效的免疫疗法。

8 EZH2和B细胞

B细胞是体液免疫的主要效应细胞。它们可以通过与Tfh细胞的相互作用，渗入肿瘤组织并影响肿瘤的生长和进展。体内产生大量的T细胞和B细胞被认为是良好临床治疗结果的标志物[56]。B细胞通过以下几种机制调控肿瘤：（i）与Tfh细胞相互作用，B细胞分化为浆细胞，分泌免疫球蛋白并通过抗体依赖性细胞毒性或补体依赖性细胞毒性抑制肿瘤进展[57]；(ii）B细胞作为抗原呈递细胞发挥作用，促进肿瘤微环境中的T细胞应答[58]；（iii）与CD8+T细胞类似，活化的B细胞可直接杀死肿瘤细胞，同时增强B细胞中GZMB和TNF相关凋亡诱导配体的表达。[59]然而，与调节性T细胞一样，调节性B细胞也被报道通过免疫抑制细胞因子（如IL-10和TGF-β）促进肿瘤形成和进展[60]。

在B细胞分化的不同阶段会发生动态的表观遗传修饰。EZH2参与淋巴细胞生成，在增殖的B细胞（如B细胞前体、生发中心B细胞和循环B淋巴细胞）中高表达，而在静止的原始B细胞中表达水平较低。[61-63]在B细胞前体中，EZH2参与VDJ重组（T 细胞和 B 细胞随机组装不同基因片段的过程，称为可变 (V)、多样性 (D) 和连接 (J) 基因）并抑制Igβ转录[64]。EZH2通过抑制细胞周期CDKN1A和CDKN1B促进生发中心B细胞的增殖，但会抑制生发中心B细胞终末分化为抗体分泌细胞(ASC)的过程[63,65-67]。B 细胞对免疫刺激的反应需要充足的EZH2表达。Herviou等人[68]报告，EZH2抑制剂EPZ-6438减少了B细胞的增殖，加速了B细胞到浆细胞的转化，并诱导浆细胞增加免疫球蛋白的分泌。据报道，抑制B细胞中EZH2表达不仅会减少B淋巴细胞的发育和生发中心的形成，还会导致抗体分泌细胞的功能障碍。在炎症的刺激下，EZH2缺陷的抗体分泌细胞增殖受损，免疫细胞的组织因子和炎症因子持续表达，导致抗体分泌细胞的数量减少，这被认为是由于线粒体呼吸减少，糖代谢受损，未折叠蛋白低表达所致。[63]然而，到目前为止，还没有关于EZH2在特定B细胞亚群中的功能的报道。

9 EZH2联合免疫抑制治疗

随着对肿瘤细胞免疫逃逸的研究，研究发现[69]T细胞表面的程序性死亡受体1（Programmed Cell Death 1, PD-1）与肿瘤细胞表面的程序性死亡配体1（Programmed Cell Death Ligand 1, PD-L1）结合后可使下游T细胞信号通路的多个关键分子发生去磷酸化，从而传递抑制性信号，阻碍T细胞的增殖和活化，促进肿瘤细胞的免疫逃逸，且PD-L1在5%-40%的肺癌细胞中呈阳性表达，因此基于阻断PD-1/PD-L1信号通路的免疫检查点抑制剂（Immune checkpoint inhibition, ICI）成为治疗癌症最热门的研究方向，同时有研究表明[70]PD-L1在包括非小细胞肺癌、黑色素瘤、肾细胞瘤及前列腺癌等恶性肿瘤中高表达的同时，浸润入肿瘤的树突状细胞、淋巴细胞、巨噬细胞和Treg细胞中PD-1表达水平也会提高，这类免疫细胞会因为免疫识别障碍抑制免疫细胞分裂，从而导致肿瘤微环境中T细胞功能异常，甚至造成晚期癌症患者对ICI疗法无效，有实验在肺癌组织中证实[71]，EZH2的表达与PD-1/PD-L1的表达水平呈正相关。抑制EZH2表达可以减少肿瘤细胞逃逸免疫检测，还可以降低ICI药物的耐药性。有体外实验证实[72,73]，表观遗传调控联合ICI治疗较单独使用ICI治疗有更明显疗效。在治疗方案上，双重抑制EZH1 / EZH2可能具有更大的抗肿瘤功效，因为当抑制EZH2时EZH1可以补偿。因此，高选择性靶向EZH1 / EZH2双重抑制剂或将高选择性EZH1抑制剂与高选择性EZH2抑制剂联合使用均值得探讨。

10 讨论

上述内容对EZH2在机体免疫过程的逐个步骤进行了分析，表明在获得性免疫过程中EZH2几乎参与了整个过程，这也表明控制EZH2的表达可以有效影响机体的免疫环境。此外，EZH2还有调节脂质代谢、增强化疗药物耐药性等优点。所以进一步开发高效，低毒，高选择性的EZH2抑制剂是未来的方向之一。同时，免疫疗法已证明免疫系统有抵抗恶性肿瘤的重要能力，多项实验成功使用PD-L1/ PD-1通过阻断抗体识别来对抗肿瘤。尽管在临床试验中已证明PD- L1 / PD-1阻断疗法具有显着的效果，但许多晚期癌症患者对抗PD-L1/抗PD-1单一疗法仍无反应。表观遗传药物通过与ICI疗法的组合在很大程度上改善了抗肿瘤效果，并为癌症免疫疗法提供了新的思路。这些表观遗传学组合疗法可以进行最佳整合，以提高PD-L1 / PD-1阻断抗体的反应率，这可以在不久的将来EZH2联合ICI治疗必然会造福于广大患者。