微藻油对鸡蛋中ω-3 多不饱和脂肪酸沉积的影响

王维维，张运强,3，周昭彬，向 玮，刘自逵,3*

1.湖南啄米生物技术有限公司，长沙 410300；2.湖南农业大学动物医学院，长沙 410128；3.湖南加农正和生物技术有限公司，长沙 410300

随着我国人民生活水平的提高，注重品质和个性的“三高（高收入、高学历、高职位）”人群成为消费主力军，他们更加精致化、美学化、健康化。因此，对具有保健功能的优质食品更加关注。ω-3 PUFA（ω-3 polyunsaturated fatty acid，ω-3 多不饱和脂肪酸）包括ALA（α-亚麻酸）、EPA（二十碳五烯酸）和DHA（二十二碳六烯酸）。其中，DHA 由于其强大的功能以及无明显副作用从ω-3 多不饱和脂肪酸脱颖而出。DHA 占大脑PUFA 总量的40%以上，能介导细胞存活、神经炎症、神经发生和参与信号转导的调节[1]，大量研究结果表明大脑需要循环DHA 持续不断的供应，以此来取代信号分子产生过程中代谢掉的DHA，同时维持支持其他神经生理过程所需的DHA[2-3]。DHA 代谢也有助于促进视网膜的发育[4]，人体大脑所需的DHA 虽然可由ALA 转化，但ALA 在局部合成DHA 的能力有限，进入大脑的ALA 仅0.2%转化为DHA[3]。而中国孕产妇及婴幼儿补充DHA 共识专家组根据FAO 专家委员会和国际围产医学会专家委员会建议中国孕妇每日摄入DHA 不少于200 mg[5]。因此，为保证人体每日所需DHA，需额外通过富含DHA 的食物来进行补充。鸡蛋被誉为全营养食品，富含蛋白质、脂肪、矿物质和多种维生素[6]，鸡蛋蛋黄中含有甘油三酯、磷脂和胆固醇等脂质，占比99%以上，磷脂较多，DHA 在鸡蛋中主要与磷脂中的sn-2 位结合，因此鸡蛋中的DHA 为磷脂型DHA[7]。目前，关于富含DHA 的鸡蛋大多为ω-3 PUFA 鸡蛋，而ω-3 PUFA 中的EPA 对婴幼儿凝血功能、生长与智力发育有不利影响；EPA 会显著地抑制婴幼儿体内内源性花生四烯酸（ARA）的生物合成并导致婴幼儿生长缓慢，具有促进儿童性早熟的副作用风险[8]。因此，低EPA 含量、高DHA 含量的DHA 成为孕妈、宝妈与婴幼儿补充DHA 的首选食品。本试验以大午金凤产蛋高峰期蛋鸡为研究对象，研究裂殖壶微藻油对蛋鸡采食量、产蛋率以及蛋中ω-3 PUFA 沉积的影响，旨在为微藻油在蛋鸡使用以及蛋中DHA 富集提供相关的科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

微藻油（蛋黄金）：批号20210516，由湖南啄米生物技术有限公司提供，实测DHA 含量占比为36.5%～39%。

1.2 试验动物及分组

试验地点在加农正和北园蛋鸡场进行，蛋鸡及饲料均由湖南普泰养殖场提供。试验选择单因素完全随机试验设计，试验随机选用34 周龄体况良好的大午金凤蛋鸡60 只，随机分为4 个组，每组15只鸡。其中，C 组为对照组，对照组饲喂基础饲粮（不额外补充DHA），T1、T2 和T3 组分别在基础日粮中添加微藻油0.3%、0.6%和0.9%。预试验为7 d，正式试验30 d，于试验第20 天和第30 天每组随机挑选9 个鸡蛋进行ω-3 多不饱和脂肪酸含量检测。

1.3 试验饲粮

蛋鸡日粮为玉米豆粕型基础日粮，由湖南普泰养殖场提供，其组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.4 饲养管理

本试验采用地面平养方式，根据该品种蛋鸡产蛋高峰期饲养管理进行，自然光照加人工补光（16 h/d），光照强度15～20 lx，舍温（20±2）℃，相对湿度50%～60%，自然通风。试验期间自由采食和饮水（槽式自动饮水器饮水，每天清洗饮水槽），每天喂料2次（07:00、15:00），添加量以料槽内略有剩余为准，每天捡蛋1 次（18:00）。

1.5 测定指标及方法

1）生产性能指标。预试验开始，每天16:00 统计采食量、产蛋数、死淘数，并按照公式计算平均日采食量、产蛋率，以7 d 为1 个周期，计算平均值。平均日采食量=总耗料量/总蛋鸡羽数；产蛋率=总产蛋数/总蛋鸡数×100%。

2）鸡蛋中ω-3 多不饱和脂肪酸含量检测。在试验第20 天与第30 天各组分别取9 枚鸡蛋、3 枚鸡蛋混匀为1 个检测样品，每组检测3 个样品，每组获得3 个DHA 含量数据。检测方法采用中华人民共和国农业行业标准NY/T2068-2011《蛋与蛋制品中ω-3 多不饱和脂肪酸的测定气相色谱法》[9]。

1.6 数据统计

试验数据采用WPS 软件进行初步收集和整理后，用SPSS 22.0 软件进行单因素方差分析（One-ANOVA），采用Duncan’s 法进行多重比较。试验结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 微藻油对蛋鸡产蛋率的影响

如表2 所示，第1-4 周的整个试验期间，T1 组产蛋率与CON 组（对照组）相比均没有显著差异，但空白期T1 组蛋鸡产蛋率显著低于CON 组，因此，饲料中添加0.3%微藻油可提高蛋鸡产蛋率。空白期、第1-4 周乃至全期，T2 组产蛋率均显著低于CON 组，但全期与空白期相比，CON 组蛋鸡产蛋率提升了13.45 个百分点，而T2 组升高了21.66 个百分点，因此，饲料中添加0.6%微藻油能在一定程度上增加蛋鸡产蛋率。与CON 组相比，整个试验期间，T3 组产蛋率均没有显著差异，但T3 组从空白期到试验全期产蛋率仅增加了6.42 个百分点，而CON 组产蛋率升高了13.45 个百分点，表明饲料中添加0.9%微藻油可能对蛋鸡产蛋率产生负面影响；空白期，T3 组产蛋率显著高于T1 组，而第1-4 周乃至全期，T3 组产蛋率均和T1 组相比无显著差异，也证实添加0.9%微藻油对蛋鸡产蛋率有不良影响。

表2 微藻油对蛋鸡产蛋率的影响 %

2.2 微藻油对蛋鸡平均日采食量的影响

如表3 所示，全期T1 和T2 组蛋鸡平均日采食量与CON 组相比均没有显著差异，但空白期T1、T2组蛋鸡平均日采食量显著低于CON 组，因此，饲料中添加0.3%和0.6%微藻油可提高蛋鸡平均日采食量。与CON 组比较，T3 组空白期和全期平均日采食量没有显著差异，表明饲料中添加0.9%微藻油不影响蛋鸡采食量。

表3 微藻油对蛋鸡采食量的影响 g

2.3 微藻油对蛋黄中ω-3 多不饱和脂肪酸含量的影响

由表4 可知，第20 天时，与CON 组比较，T1、T2和T3 组鸡蛋中ALA 含量有升高的趋势，T3 组ALA含量低于T2 组，但差异不显著；第30 天时，T1 和T2组鸡蛋中ALA 含量显著高于CON 组，T3 组与CON组比较没有显著差异；与CON 组相比，20 天和30 天时，T1 组EPA 含量没有显著差异，T2 和T3 组EPA含量显著高于CON 组；T1、T2 和T3 组鸡蛋中DHA含量均显著高于CON 组。以上结果表明，饲料中添加微藻油能使鸡蛋中富集ALA、EPA 和DHA。

如表4 所示，空白对照组中的ALA 与DHA 含量在30～40 mg/100 g，不含EPA。随着微藻油添加比例的增加，DHA 的含量出现梯度上升，ALA 与EPA 没有富集上升趋势。随着微藻油添加时间的增加，鸡蛋中的DHA 含量相应增加，且数据表明，蛋鸡在摄入微藻油后20 d，鸡蛋中则可大量富集DHA，且在30 d DHA 富集含量与20 d 相比差值低于前20 d 的富集量，ALA 与EPA 在30 d 的富集含量与20 d 无显著性差异。因此，推断蛋鸡在摄入微藻油后30 d，多不饱和脂肪酸富集含量趋于稳定。当微藻油添加比例为0.3%，使用20 d，鸡蛋中DHA 含量可达到150 mg/100 g 以上；0.6%添加比例使用20 d，鸡蛋中DHA 含量可达到200 mg/100 g 以上；0.9%添加比例使用20 d，鸡蛋中DHA 含量可达到300 mg/100 g 以上。

表4 微藻油对鸡蛋中ω-3 多不饱和脂肪酸含量的影响 mg/100 g

3 讨 论

3.1 微藻油对蛋鸡产蛋率的影响

产蛋率是反映蛋鸡生产性能的指标，微藻油中主要成分为DHA。王钧艺等[10]研究发现，饲粮中添加DHA 复合添加剂可提升蛋鸡产蛋率；付兴周等[11]研究也表明，DHA 复合添加剂有升高蛋鸡产蛋率的趋势。本试验中，饲粮中添加0.3%和0.6%的微藻油均可提高蛋鸡产蛋率，与前人研究一致。Sorbera 等[12]研究表明，DHA 能刺激卵母细胞成熟，这是饲粮中添加0.3%和0.6%微藻油提升产蛋率的直接原因。此外，微藻油还能通过增加蛋鸡抗氧化酶活性和抗体水平，升高产蛋率[13]。本试验中，饲粮中添加0.9%的微藻油会对蛋鸡产蛋率产生负面影响，可能是因为此时饲粮中油脂含量过高。王爱民[14]研究证实，饲粮中添加过高脂肪酸会造成肝脏损伤，不利于血糖代谢。因此，饲粮中添加0.3%和0.6%微藻油较为适宜。

3.2 微藻油对蛋鸡采食量的影响

杨蕊等[15]研究发现，饲粮中添加微藻DHA 能提高蛋鸡平均日采食量。与杨蕊等[15]研究一致，本试验中，与CON 组相比，饲料中添加0.3%和0.6%微藻油可提升蛋鸡采食量。饲粮中添加0.3%和0.6%的微藻油可能是通过促进鸡“三胃”发育从而使蛋鸡采食量增加[16]。此外，本试验中，与CON 组比较，添加0.9%微藻油对蛋鸡采食量影响不显著，可能是因为添加0.9%微藻油致使饲粮中脂肪酸含量过高，而高脂会损伤胃壁细胞[17]，同微藻油的保护作用产生协同作用维持胃壁细胞平衡状态，继而使得蛋鸡采食量保持稳定。

3.3 微藻油对鸡蛋中ω-3 多不饱和脂肪酸含量的影响

ALA 具有抗炎、抗氧化和调节肠道菌群等作用[18]，EPA 具有抗抑郁和降血脂等作用[19-20]，DHA 能够促进脑和视网膜发育、增强免疫力[21-22]。因此，食用ALA、EPA 和DHA 含量适当的鸡蛋，对人体具有积极作用。此外，鸡蛋中ALA、EPA 和DHA 的富集也可以改善蛋品质，维持鸡蛋储存期间的氧化稳定性[23]。因此，鸡蛋中ALA、EPA 和DHA 的富集具有重要意义。吴永保等[24]研究发现，饲粮中添加微藻可提升鸡蛋中ω-3 多不饱和脂肪酸含量；冯嘉[25]研究也表明，藻油可显著升高鸡蛋中DHA 和总ω-3 多不饱和脂肪酸含量。与前人研究一致，本试验中，与CON 组相比，饲粮中添加不同比例的微藻油均能增加鸡蛋中ALA、EPA 和DHA 含量。