蒲公英总黄酮对大口黑鲈生长性能、体组成及血液生化指标的影响

■牛小天 李 民 邹记兴 高 杰 徐炆鑫 焦思琦 彭 雷 王桂芹*

(1.吉林农业大学动物科学技术学院，吉林长春 130118；2.华南农业大学海洋学院，广东广州 510642；3.辽宁省克达饲料有限公司，辽宁沈阳 110200）

蒲公英（Taraxacum mongolicum）是一种药食同源草本植物，富含多种功能性成分，具有较高的食用及药用价值[1]。其主要成分蒲公英黄酮是一类具有较强活性的物质，具有增强免疫力[2]，抗肿瘤[3]、抗氧化[4]、抗炎[5]、降低血脂和血糖[6]等功效。近年来，蒲公英在动物上的应用越来越广泛。孙珊珊等[2]经过提取蒲公英花、叶和根的总黄酮活性成分发现，其部位不同总黄酮含量不同，其中蒲公英花的总黄酮含量最高，且对小鼠的体液免疫效果最强。刘佳慧等[7]研究发现，在小鼠的日粮中添加150～300 mg/kg的蒲公英根黄酮能够提高其抗氧化力。李玉荣[8]研究发现当蒲公英干粉在育肥猪饲料中的添加量为500 g/t时，能够显著提高生长性能及品质。彭小玉[9]研究发现鲫鱼饲料中添加4%的蒲公英水提物能够改善其生长性能及血清生化指标。但目前国内外关于蒲公英总黄酮在大口黑鲈上的研究尚未见到报道。

大口黑鲈是一种淡水凶猛肉食性鱼类，原产于美国西部的加利福尼亚州[10]。在20世纪60年代美国开始集约化养殖大口黑鲈[11]，80年代被引进中国大陆开始繁殖与养殖[12]，现已成为很多国家的饲养对象[13]。其具有肉质肥美、营养价值高、适应能力强、生长周期短、易起捕等优点，深受养殖户和消费者青睐，已成为我国主要养殖的淡水名贵肉食性鱼类之一。但在养殖过程中，由于冰鲜鱼投喂、操作技术不规范及水质环境恶化等原因导致鱼体疾病频发，已严重影响大口黑鲈的健康及其养殖业的可持续发展。因此，探寻高效安全的疾病防治添加剂就成为亟待解决的重要问题。本试验以大口黑鲈为研究对象，评估蒲公英总黄酮对其生长性能、体组成和血液生化指标的影响，以期为蒲公英总黄酮在大口黑鲈健康养殖的应用提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验饲料

蒲公英总黄酮购于西安泽郎生物科技有限公司（提取于蒲公英，浓度99%）。试验饲料分别以鱼粉和发酵豆粕为蛋白源，鱼油和豆油为脂肪源，配制蒲公英总黄酮添加量分别为0、0.01%、0.02%、0.03%和0.04%的5 种饲料（分别为T1、T2、T3、T4、T5）。将各原料粉碎后，过60 目筛网，按饲料配方（见表1）称重混匀并利用绞肉机加工成粒径1.2 mm 的颗粒饲料，风干后保存于-20 ℃冰箱。

表1 试验饲料组成及营养水平（风干基础）

1.2 试验设计

大口黑鲈购自山东泰丰鸿基农业科技开发有限公司，饲养在吉林农业大学的水产养殖试验室。选取鱼体健壮、规格均一[初始体重为（14.69±0.11）g]的大口黑鲈450 尾，随机分到15 个水族箱中（半径32 cm、高110 cm，养殖水体积为220 L），每个水族箱30 尾，并将15个水族箱随机分成5组（每组3个重复）。暂养2周后开始试验，暂养期投喂T1组饲料。

1.3 饲养管理

养殖试验为期60 d，每天定时饱食投喂2 次（8：30 和17：00），增氧泵24 h 充气。水中氨氮含量＜0.01 mg/L，溶解氧含量＞6.5 mg/kg，pH 6.3～7.2，水温23～25 ℃。每天定时排污及换水，换水量为1/3。

1.4 样品采集

采样前，对试验大口黑鲈24 h 饥饿处理，统计每个试验水族箱中活鱼尾数及饲料总投喂量。每个水族箱中随机选取11尾鱼，用麻醉剂MS-222处理后，用纱布吸干鱼体表面水分后称重和测体长。其中6尾鱼保存在-20 ℃冰箱，用于全鱼体成分检测。其余5尾利用尾静脉采血法采集其血液于抗凝管中，轻轻摇匀后立即用全自动血液生化分析仪（VetScan VS2）进行检测。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 生长性能与饲料利用指标

存活率（SR，%）=100×试验结束时鱼尾数/试验开始时尾数

增重率（WGR，%）=100×（终末体重－初始体重）/初始体重

特定生长率（SGR，%/d）=100×（ln终末体重-ln初始体重）/试验天数

饲料系数（FCR）=饲料总摄食量/试验鱼增重量

蛋白质效率（PER）=试验鱼增重量/蛋白质摄入量

1.5.2 体成分指标

全鱼体成分粗脂肪（EE）、粗灰分（Ash）、水分和粗蛋白（CP）含量的测定分别根据国标法（GB/T 6433—2006、GB/T 6438—2007、GB/T 6435—2006 和GB/T 6432—1994）进行检测。

1.5.3 血液生化指标

采用全自动血液生化分析仪检测尿素氮（BUN）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、球蛋白（GLB）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、葡萄糖（GLU）含量和谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性。

1.6 数据分析

数据结果以“平均值±标准误（SD）”的形式来表示，利用SPSS 22.0 统计软件进行单因素方差分析及Duncan’s多重比较，显著性水平为P＜0.05。

2 结果与分析

2.1 蒲公英总黄酮对大口黑鲈生长性能的影响（见表2）

表2 蒲公英总黄酮对大口黑鲈生长性能的影响

由表2可知，饲料中蒲公英总黄酮水平对各组大口黑鲈的FBM、WGR、SGR、FCR和PER均无显著性影响，但是FBM、WGR、SGR和PER随着蒲公英总黄酮水平的升高均呈现先升高后平缓的趋势，而FCR呈现先降低后平缓的趋势。试验组T2、T3、T4和T5之间的SR无显著性差异（P＞0.05），但均显著高于T1（P＜0.05）。

2.2 蒲公英总黄酮对大口黑鲈体成分的影响（见表3）

表3 蒲公英总黄酮对大口黑鲈鱼体成分的影响（%）

由表3可知，饲料中蒲公英总黄酮水平对各组大口黑鲈的Ash、水分和CP 均无显著性影响。试验组T3、T4 和T5 的EE 均显著高于对照组T1（P＜0.05），而T2与T1、T3、T4和T5之间无显著差异（P＞0.05）。

2.3 蒲公英总黄酮对大口黑鲈血液生化指标的影响（见表4）

由表4可知，饲料中蒲公英总黄酮水平对各组大口黑鲈的ALB 和BUN 均无显著性影响；对TP、GLB、GLU、TG 和TC 均有影响。其中试验组T2、T3、T4 和T5的TP和GLB均显著高于对照组T1（P＜0.05），T2显著低于T3、T4和T5（P＜0.05），T3、T4和T5之间无显著性差异（P＞0.05）。试验组T2、T3、T4 和T5 的GLU 均显著低于对照组T1（P＜0.05），T2 显著高于T3、T4 和T5（P＜0.05），而T3、T4 和T5 之间无显著性差异（P＞0.05）。试验组T3、T4和T5的TG和TC均显著低于对照组T1（P＜0.05），而T3、T4 和T5 之间无显著性差异（P＞0.05）；T2 与T1、T3、T4 和T5 均无显著性差异（P＞0.05）。试验组T2、T3、T4 和T5 的AST 均显著低于对照组T1（P＜0.05），T2、T3、T4 组和T5 组之间无显著差异（P＞0.05），却呈现先下降后上升的趋势。试验组T3、T4 和T5 的ALT 均显著低于对照组T1（P＜0.05），T3、T4、T5 之间无显著差异但呈现下降趋势（P＞0.05）；T2与各组间均无显著性差异（P＞0.05）。

表4 蒲公英总黄酮对大口黑鲈血液生化指标的影响

3 讨论

3.1 蒲公英总黄酮对大口黑鲈生长性能的影响

蒲公英是一种药食同源草本植物，含有多种活性成分[14]，对动物具有双向调节作用[15]。有研究发现给生长期的肉鸡饲料中添加蒲公英叶可以提高其生长性能[16]。蒲公英多糖可以提高月鳢的肌肉组成和抗氧化力[17]。彭小玉等[9]研究发现饲料中添加2%～4%蒲公英水提物能够提高鲫鱼的生长性能和免疫力。饲料中添加2～3 g/kg 的蒲公英叶可以提高虹鳟的生长性能和饲料利用[18]。本试验随着大口黑鲈饲料中蒲公英总黄酮添加水平的升高，各试验组的FBM、WGR、SGR、PER 和SR 相对于对照组均升高，而FCR降低。其中T3的WGR比T1高出8.30%，随后趋于平缓。此结果与上述研究结果相类似，表明蒲公英总黄酮对大口黑鲈的生长性能与饲料利用具有正面效应。

3.2 蒲公英总黄酮对大口黑鲈体成分的影响

本试验饲料中蒲公英总黄酮添加水平的升高对各组大口黑鲈全鱼的Ash、水分和CP没有影响，但EE的含量却显著下降（T2除外）。Mostafavi等[18]在虹鳟饲料中添加蒲公英花的研究中发现，随着添加水平的升高能够提高虹鳟全鱼的粗蛋白和水分，降低粗脂肪和粗灰分。Tan等[19]在鲳鱼饲料中添加蒲公英根提取物的研究中发现，随着添加水平的升高能够提高全鱼的粗蛋白和水分，降低粗脂肪，对粗灰分没有影响。这与本试验的结果不完全一致，可能是所用的蒲公英部位或其提取物活性成分不同造成的结果，有待深入研究。

3.3 蒲公英总黄酮对大口黑鲈血液生化指标的影响

TP、ALB 和GLB 能够调节动物机体的免疫力[20]，且TP 和GLB 还能反映出动物体内蛋白质的代谢水平[21]。李美菊[22]在对罗非鱼的研究中发现蒲公英提取物能降低血液中GLB 的含量，而对TP 和ALB 没有影响。而Tan等[19]的研究结果却发现鲳鱼饲料中添加适量的蒲公英根提取物能够提高血液中的TP。本试验结果显示大口黑鲈血液中的TP 随着饲料中蒲公英总黄酮添加水平的升高而升高；当添加量为0.02%～0.04%时，TP 和GLB 含量最高；但对ALB 却没有影响。此结果与Tan等[19]的研究结果相类似。结合本试验的饲料利用和全鱼粗蛋白含量的研究结果表明，随着蒲公英总黄酮添加水平的升高对大口黑鲈体内蛋白质代谢没有显著影响，却能提高其免疫力。

TC从外周组织被运输至肝脏，并参与脂质代谢与机体组织的构成[23]；TG是动物体内能量的主要贮存形式[24]；GLU在动物机体内一部分进入肝脏参与代谢，一部分进入血液[25]。其中TC和GLU为机体的生长直接提供了能量和间接供给各种激素的前体物质与组成细胞的必要组分[26]。李美菊[22]研究发现蒲公英提取物能够降低罗非鱼血液中TC和TG含量。Mostafavi等[18]研究发现虹鳟饲料中添加蒲公英花能够降低其血液GLU含量。本试验结果显示，当饲料中蒲公英总黄酮添加量为0.02%～0.04%时，大口黑鲈血液中TC、TG和GLU含量最低，而GLU随着蒲公英总黄酮添加水平的升高而降低。此结果与上述报道结果相一致。表明蒲公英总黄酮能够降低血液中的TC、TG和GLU。

动物体内物质代谢，蛋白质和氨基酸的终产物是BUN，且饲料中蛋白质浓度及氨基酸利用率与之呈显著负相关[27]。本试验结果显示，饲料中添加蒲公英总黄酮对大口黑鲈血液BUN 没有显著影响，表明蒲公英总黄酮对鱼体内蛋白质代谢的调控作用不显著，这也间接验证了本试验的饲料利用和全鱼体粗蛋白含量的结果。

ALT和AST是肝功能标志酶，其主要分布在肝细胞内，并随肝细胞的受损程度两者的活性均升高[28]。本试验大口黑鲈血液中ALT 和AST 随着饲料中蒲公英总黄酮添加水平的升高而降低。Mostafavi 等[18]的研究发现当虹鳟饲料中蒲公英花的添加量达到3 g/kg时，鱼体血液的ALT和AST最低。而本试验蒲公英总黄酮的添加量为0.02%～0.04%时ALT 和AST 活性最低，分析造成添加量不同的原因：一是鱼种不同，二是蒲公英提取物不同。本结果表明饲料中添加蒲公英总黄酮可能起到保护加州鲈肝脏损伤的功能，这有待于结合肝脏组织学加以证明。

4 结论

综上所述，体重为（14.69±0.11）g的大口黑鲈，其饲料中添加蒲公英总黄酮能够提高存活率，并有效改善鱼体组成及血液生化指标，当饲料中添加蒲公英总黄酮0.02%时效果最佳。