■杨 玄 程林丽
(中国农业大学动物医学院,北京 100094)
中草药饲料添加剂是指以饲料添加剂的形式通过添加于饲料中给药的一类中(兽)药方剂。中草药作为饲料添加剂在我国有着悠久的历史,早在西汉刘安所著的《淮南子万毕术》就记载有:“取麻子三升,捣千余杵,煮为羹,以盐一升,著中;和以糠三斛,饲豚,则肥也”的“麻盐肥豚豕法”。但中草药饲料添加剂研究和应用的广泛开展,却始于20世纪70年代末。如今,由于养殖业对于抗生素的滥用、抗生素类药物在动物源性食品中的残留以及大量耐药菌的出现使得各国开始减少抗生素在养殖业中的使用,我国更是于2020年颁布实施了“饲料无抗、养殖减抗”的相关政策,替代抗生素产品的研究开发十分迫切。而中草药饲料添加剂因其资源丰富,毒副作用小,不易在肉、蛋、奶等畜禽产品中残留而愈来愈受到国内外的重视,愈来愈多的研究者在努力开发可以用于替代抗生素的新型饲料添加剂[1]。目前已有很多研究表明中草药饲料添加剂有着提高畜禽生长性能和动物免疫功能、预防和治疗疾病等作用,具有替代抗生素的巨大潜能[2]。
研究旨在分析中草药饲料添加剂对断奶仔猪和生长育肥猪生长性能的影响。试验筛选了近20年来中草药饲料添加剂对于猪生长性能的高质量文献,采用Meta 分析方法,从统计层面分析中草药饲料添加剂对断奶仔猪及生长育肥猪平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、饲料转化率(FCR)以及断奶仔猪腹泻率的影响,从而为“减抗”大环境下生猪的养殖提供一定的科学依据。
表1 检索策略
文章检索了CNKI、万方数据、PubMed 和Web of Science 数据库发表的各类中草药饲料添加剂对断奶仔猪和生长育肥猪生长性能影响的相关论文和期刊文章。获得的检索策略及结果如表1 所示。随后从此检索策略中检索出的文献中选取2001 年1 月1 日至2021 年12 月31 日之间与研究相关的高质量文献进行数据提取、敏感性分析和偏倚分析。
若研究符合以下标准,则可将其纳入分析:①研究以随机对照试验进行开展;②研究对象为断奶仔猪或生长育肥猪,且为普通商品代猪(或有明确品种说明的地方品种猪);③中草药饲料添加剂的成分在文献中有较为明确的说明;④研究中的生长性能指标包括ADG、ADFI和FCR,部分关于断奶仔猪的文献录入腹泻率;⑤生长性能的相关指标中至少ADG是以“平均值±标准差(mean±SD)”来呈现的,且对试验组(基础日粮+中草药饲料添加剂)及对照组(基础日粮)的样本量有明确说明。若研究有以下情况可将其排除:①研究对象为妊娠母猪或哺乳仔猪;②数据不以标准格式呈现或数据处理方法未明确说明;③文献里关于中草药饲料添加剂的成分没有较为明确说明;④试验方法不明确、指标不全面以及与同类文章差异过大。根据以上纳入和排除标准对检索到的文献由两位独立的分析者进行筛选并检查所选文献之间的差异性,最后对符合条件的文献提取数据并进行Meta分析。
从所筛选的文献中提取以下数据与信息:作者信息(为第一作者及发表年份)、中草药饲料添加剂类型及其成分与剂量、试验猪生长阶段(断奶仔猪、生长育肥猪)、样本量、初末体重及生长性能相关指标(ADG、ADFI、FCR、腹泻率以及相应的标准差)。并根据“合并报告标准声明”中所述标准和Cochrane Collaboration工具来评估偏倚风险[3]。
试验采用Meta分析对相关文献中提取出的118条数据(包括1 166 头猪的数据)进行研究。通过Rev-Man 5.4 进行数据处理,将ADG、ADFI、FCR 及腹泻率的分布绘制成森林图,并使用随机效应模型计算平均差(MD)及95%置信区间(CI)的估计值。并根据I2检验来评估不同文献间的异质性,若在I2检验中I2>50%,且P>0.05 则认为文献间存在显著的异质性,反之亦然。若存在显著异质性时,则通过亚组分析或敏感性分析(包括逐一剔除文献、剪补法等)来寻找异质性的来源,同时采用随机效应模型(RE)进行分析(反之则用固定效应模型分析)[4]。并根据漏斗图来评估发表偏倚。最后将各项指标的MD、95%CI和Z值(包括P值)合并以全面对比分析[3]。
从前述的数据库中共搜索到相关文献132篇,去除重复发表的文章、按照纳入及排除标准逐一筛选全文后共有20篇文献纳入到此次Meta分析中。最后纳入研究的文章质量较高,包含17篇中文文献和3篇英文文献,其中有9篇是关于断奶仔猪的(其中有5篇提及腹泻率),其余11篇则是关于生长育肥猪的。具体信息和相关数据见表2。
表2 纳入研究的特征与数据
逐篇仔细阅读相关文献,对纳入的文献进行质量评估,结果如图1A所示。在随机分配方法偏倚方面,全部文献都为低风险偏倚;在分配方法隐藏偏倚方面,有1 篇文献因为没有明确完全指出分配方法,故将该文献定义为不明确;在实施参与者双盲法偏倚方面,有两篇文献被定义为高风险,其他均为低风险;在结果评估盲法偏倚方面,有1 篇文献被定义为高风险,其他均为低风险;在结果数据不全偏倚与选择性报道偏倚方面有几篇文献未以标准形式呈现某些生长性能指标的数据而被定义为高风险,其他为低风险偏倚;而在其他偏倚方面,有3 篇文献的中草药添加剂与其他组相差过大而定义为高风险,其余大多为不明确风险;其他偏倚包括了猪的品种、中草药类型以及饲养条件等因素。总体来说,纳入研究的文献质量较高。中草药添加剂对不同生长阶段猪ADG影响的漏斗图(图1B)表现出可见的不对称性,可能存在发表偏倚或各组间数据差异较大等因素的干扰;而中草药添加剂对不同生长阶段猪的ADFI与FCR影响的漏斗图(分别为图1C、图1D)是基本对称的,意味着未观察到发表偏倚。
图1 偏倚风险评价与发表偏倚评估
表2(续1) 纳入研究的特征与数据
如图2及表3所示,与基础日粮相比各类中草药饲料添加剂能极显著地提高断奶仔猪与生长育肥猪的ADG(P<0.01)。在不同生长阶段上,相较于基础日粮组,中草药饲料添加剂对断奶仔猪ADG(MD=0.06 kg/d,95%CI为[0.05,0.07])的提升上低于对生长育肥猪ADG(MD=0.10 kg/d,95%CI为[0.06,0.14]。但无论是断奶仔猪组还是生长育肥猪组都表现出了显著异质性,且两个亚组间也表现出了高异质性,逐一剔除文献及剪补法进行敏感性分析后并不能降低其异质性。这说明不同研究间还是存在一定差异的,另外也不能直接将断奶仔猪与生长育肥猪一起分析。在不同中草药饲料添加剂类型的亚组分析中得知(见图3),相比复方中草药添加剂,中草药提取物对于生长育肥猪ADG的影响基本与其相似,而发酵中草药却能更好地促进断奶仔猪ADG(MD=0.07 kg/d)的提升,这与武洪志等[11]的研究结果一致。从亚组分析结果(异质性检验:I2=40.9%<50%且P=0.17>0.05;呈现出较高的同质性,可不必进行亚组分析)可知不同中草药饲料添加剂类型对断奶仔猪或生长育肥猪ADG的增长影响近似。
图2 中草药饲料添加剂对断奶仔猪和生长育肥猪ADG影响的森林图
图3 各类中草药添加剂对断奶仔猪和生长育肥猪ADG影响亚组分析的森林图
表3 各类中草药饲料添加剂对猪生长性能影响汇总
由图4可知,与基础日粮相比各类中草药饲料添加剂能极显著地提高断奶仔猪ADFI(MD=0.05 kg/d,95%CI为[0.01,0.09])(P<0.01),但对生长育肥猪ADFI无显著影响(P=0.24>0.05)。而研究间的异质性极高,经逐一排除文献的敏感性分析后可知须再对各类中草药的亚组进行分析。亚组分析结果如图5所示,可知复方中草药饲料添加剂能显著地(0.01<P<0.05)提高断奶仔猪的ADFI(MD=0.06 kg/d,95%CI为[0.01,0.10]);而复方中草药饲料添加剂对生长育肥猪ADFI以及发酵中草药对断奶仔猪ADFI 的影响均不显著(这与纳入研究的大部分文献结果相符);中草药提取物则能显著地(0.01<P<0.05)提高生长育肥猪的ADFI(MD=0.12 kg/d,95%CI为[0.01,0.22])。
图4 中草药饲料添加剂对断奶仔猪和生长育肥猪ADFI影响的森林图
图5 各类中草药添加剂对断奶仔猪或生长育肥猪ADFI影响亚组分析的森林图
表2(续2) 纳入研究的特征与数据
由图6 可知,与基础日粮相比各类中草药饲料添加剂均能极显著地降低断奶仔猪(MD=-0.40,95%CI为[-0.61,-0.19])和生长育肥猪(MD=-0.23,95%CI为[-0.28,-0.18])的FCR(P<0.01)。但各组各研究间异质性较高,逐一排除文献后并不能降低异质性,故对其进行不同种类中草药添加剂的亚组分析,结果如图7所示,可知复方中草药饲料添加剂可显著地降低断奶仔猪FCR(MD=-0.39,95%CI为[-0.73,-0.04])(P<0.05);发酵中草药饲料添加剂则能极显著地(P<0.01)降低断奶仔猪的FCR(MD=-0.42,95%CI为[-0.73,-0.11]);复方中草药饲料添加剂及中草药提取物饲料添加剂均能极显著地降低生长育肥猪的FCR(P<0.01)。
图6 中草药饲料添加剂对断奶仔猪及生长育肥猪FCR影响的森林图
图7 不同种类中草药添加剂对断奶仔猪或生长育肥猪FCR影响亚组分析的森林图
由图8可知,与基础日粮相比中草药饲料添加剂能极显著地降低断奶仔猪的腹泻率(P<0.01)。但各研究间的异质性较高,经逐一排除文献的敏感性分析亦不能降低异质性。
图8 中草药饲料添加剂对断奶仔猪腹泻率影响的森林图
以上文献检索和分析可知,目前国内外已有不少关于中草药饲料添加剂促进仔猪和生长猪生长性能的研究报道,但关于其具体作用机理还有待深入研究。中草药饲料添加剂提高动物生长性能可能在于其营养作用与对机体代谢物质的影响等方面[25]。如党参含有18种氨基酸,含量高达5.17%;山楂含有大量有机酸、维生素C、糖和蛋白质等;松针粉含粗蛋白8.96%、粗脂肪11.10%以及多量的维生素C和维生素E等;也有研究表明有些中草药可提高机体代谢率、有机
物代谢率及氮表观沉留率等,并能提高血液中的蛋白质、微量元素等物质的浓度[26]。要想获得优质、高效和性能稳定的相关中草药饲料添加剂,对这些中草药饲料添加剂进行成分解析和作用机理研究急待加强。
从Meta 分析结果来看,与基础日粮相比,各类型中草药均能极显著地提高断奶仔猪和生长育肥猪ADG(P<0.01);但在ADFI方面,除复方中草药饲料添加剂能较为显著地(0.01<P<0.05)提高断奶仔猪ADFI以及中草药提取物能较为显著地(0.01<P<0.05)提高生长育肥猪的ADFI 外,发酵中草药添加剂对断奶仔猪以及复方中草药添加剂对生长育肥猪ADFI的影响不显著,这一点与原始纳入研究的特征有所区别(在大部分文献里的数据都表明各类型中草药饲料添加剂对断奶仔猪或生长育肥猪ADFI 的影响无显著差异,这可能是Meta 分析只能对纳入数据做一个定量分析,而不同文献数据间还是有一定差异);而在FCR分析中,各类型中草药饲料添加剂均能极显著地降低断奶仔猪和生长育肥猪的FCR(P<0.01);对此,在料重比较低的同时必然有经济效益的提高,故在官丽辉等[17]的研究中就有提及对经济效益的提高;而在腹泻率方面,从纳入分析的数据来看可知中草药饲料添加剂能极显著地降低断奶仔猪腹泻率(P<0.01),但在这方面的样本量较少,各研究间的异质性较高,未来还需更多的研究来补充对这一方面更充分的认知。
本研究中的关于中草药对生长性能指标ADG、ADFI、FCR及腹泻率的Meta分析均呈现出高异质性,这可能是中草药饲料添加剂类型多样且配方复杂,猪的品种、试验环境、操作人员、养殖设备、动物福利等的差异所致,但又无法通过逐一排除文献的敏感分析以及分类进行亚组分析而降低异质性。在猪的品种方面,本次研究纳入的品种主要是商品代猪,但也有关于藏香猪以及香猪的有关研究,旨在表明中草药饲料添加剂对我国当下的大多数猪品种的生长性能均有一定的促进作用。另在未纳入研究的文献中,麻延峰等[27]也研究了中草药饲料添加剂对金华猪生长性能的影响,结果也显示出了对金华猪ADG 有显著性地提高。从总体来看,养殖试验的各研究间还是具有高异质性的且难以避免,但各研究间的高异质性并不影响合并结果的可信度[4]。本次研究选取了近20年关于中草药饲料添加剂对断奶仔猪和生长育肥猪生长性能影响的文献,结果显示出中草药饲料添加剂相较于基础日粮在提高断奶仔猪和生长育肥猪生长性能方面有较好的促进作用,为“减抗”大环境下生猪养殖中添加中草药提供了定量参考。但是,若要继续考虑中草药能否完全替代抗生素使用还需要进一步研究证明。
Meta 分析结果显示:与基础日粮相比,各类型中草药饲料添加剂总体上能极显著地提高断奶仔猪和生长育肥猪ADG(其中发酵中草药饲料添加剂对断奶仔猪ADG 的提高强于复方中草药饲料添加剂)(P<0.01),并极显著降低断奶仔猪FCR(P<0.01)、腹泻率以及生长育肥猪FCR,但对ADFI 无显著影响。本次Meta 分析对2001—2021年的相关高质量文献的结果进行合并,从统计层面上为中草药饲料添加剂的生产实践及相关研究方向提供了一定的参考指示,也将对中草药饲料的规模化运用起到一定的推动作用。