奶牛布鲁氏菌病的实验室诊断和防控路径

吴旭峰

（内蒙古乌兰察布市化德县动物疫病预防控制中心 013350)

布鲁氏菌病（以下简称布病）是一种常见的畜禽类疾病，尤其在家猪、牛羊饲养过程中极易发生，主要传染源都是携带病菌的家畜或者患病的畜禽。这种病菌可以借助畜禽的排泄物、乳汁等途径传播和感染。尤其是病母牛患病后容易出现流产症状，在流产或分娩的过程中，布病可以借助胎衣或者子宫分泌物进行传染，从而形成新的传染源。除此之外，布病也可以通过消化道进行传播，因此，一旦饲养用的工具、饲料或者水源被污染后，基本能导致该病的大规模暴发。另外，此病还能通过血液进行传播，因此，吸血昆虫和皮肤破损也成为疾病传播的途径之一。布鲁氏菌病多见于奶牛牛犊，且发病速度快、病情较为严重，极易死亡。

1 临床症状

一般情况下，奶牛妊娠6～8 月，是布鲁氏菌病的高发期。在感染病症后，病牛大多会出现子宫炎症，并且出现分娩预兆现象，同时病牛大多卧立不安，并且伴有明显的食欲缺乏症状，存在乳房肿大或者外阴肿大的症状。对病牛进行检查后发现，病牛的阴道黏膜存在小结节，呈现红色粟粒状，并且会产生灰白色的分泌物[1]。病牛流产后，有时会出现伴有脓样的浑浊胎水，甚至会存在胎衣滞留的现象，尤其以妊娠晚期的病牛最为突出。病牛在流产后，还会在2 周时间内继续排出棕红色的分泌物，且分泌物伴随恶臭。

对于妊娠早期的奶牛，流产的牛犊一般已经死亡；而一些妊娠晚期的奶牛，虽然能够顺利生下成活的幼崽，但是这些牛犊的身体状况较差，无法顺利存活，在一段时间后也会逐渐死亡。很多奶牛在患病后导致第一次流产，但随之病症会逐渐消失，这代表此病一定的治愈性。在进行奶牛饲养过程中，虽然不少奶牛并没有患病，但是同样携带病菌，虽然没有明显的临床症状，但是携带的病菌也增加了传染的风险，对布鲁氏菌病的防控工作增加了难度。公畜的布鲁氏菌病临床病症主要包括睾丸炎和附睾炎，患病后会出现睾丸疼痛、肿胀的情况，甚至会有坏死的可能，严重影响公牛配种[2]。

2 病理变化

布鲁氏菌病的特征性病变是胎膜水肿，严重的病牛甚至会出现充血水肿的现象，并且存在出血点，导致子宫黏膜炎症。在病症早期表现为卡他性，随后会出现脓肿、化脓等症状，并且伴有严重的子宫黏膜充血现象，导致子宫内出现较多的绒毛膜坏死物，引发胎膜水肿，同时伴有黄色的浸润现象，并且可能导致淋巴结肿大症状，还可能带来肝脾等脏器的损伤[3]。同时，病牛体内可能存在坏死灶，也可能产生肺炎病灶。除此之外，病母牛还可能产生输卵管炎、乳房炎、卵巢炎等疾病。公畜患病后，也可能导致精囊出血的现象，也极有可能导致体内出现坏死病灶，引发睾丸或附睾存在肿大现象，出现脓性病灶，导致阴茎红肿症状等。

布鲁氏菌共有三种抗原分别为M、A、G，牛种Ⅰ型含M抗原与A 抗原之比为1：20。布鲁氏菌具有较强的抵抗能力，存活时间也各不相同，在胎衣中存活时间可达4 个月，在干燥的胎衣中存活时间约为4～9d，在牛乳中存活时间约为20～60d，在尘埃中存活时间约为15～40d，在皮毛、土壤和水中存活时间可达数月；布鲁氏菌对热敏感，在80℃的温度中存活时间约为7～19min，在100℃的温度中存活时间约为1～4min；布鲁氏菌对低温的抵抗性较强；布鲁氏菌较为敏感的消毒药物主要包括：3%漂白粉、3%苯酚、3%来苏水、2%苛性钠、1%甲醛等。

3 实验室诊断

3.1 细菌学诊断

在实验室诊断中，分离布鲁氏杆菌是最准确和可靠的方法之一。工作人员应采取病牛的胎衣、乳汁、尿液、阴道分泌物、血液、脓汁等组织，制成检测涂片，并采用沙黄亚甲蓝鉴别染色法对涂片进行染色，采用油镜对涂片进行检测，在观察视野中，可以清晰地看到布鲁氏杆菌呈现红色，而其他细菌则呈现蓝色。

3.2 血清学诊断

随着血清学诊断的快速发展，检验布鲁氏菌病的血清学方法有很多，例如试管凝集反应、平板凝集反应、补体结合反应、虎红平板凝集反应等等。当奶牛感染布鲁氏菌病后，通过凝集反应，血液中会存在凝集素，大约在患病后一周之内出现，并且凝集滴度会逐渐增高，凝集素的存在时间可达两年或者更久。对于一次感染布鲁氏菌病的牛进行采血工作，并通过虎红平板血清凝集测试等方法进行检验，如果牛试管凝集价达到1 : 100（++）则代表阳性，如果凝集价为1 : 50（++），则代表疑似。补体结合试验具有较强的特异性和敏感性，在奶牛布鲁氏菌病的检验中发挥着重要作用。对于刚刚感染病菌的牛而言，补体结合反应的检测效果可能会比凝结反应更快，而对于一些病症表现较为缓慢的阳性牛而言，即便血清凝集反应的结果呈现疑似甚至阴性，补体结合的检测结果仍然为阳性。因此，补体结合检测方法能够极大地提高奶牛布鲁氏菌病临床检测结果的准确性。

4 防控措施

4.1 加强检疫，净化牛群

为了进一步有效控制奶牛布鲁氏菌病的传播，在省内应该提倡自繁自养，尽可能减少从外地购买奶牛的频率。当购入新的奶牛或家畜后，应该采用隔离观察的方法，并对新家畜进行布鲁氏杆菌检疫，一个月后如果家畜没有明显的病症且检疫结果为阴性，才可以混入畜群进行饲养。每年需要对配种公畜进行检疫，确保公畜身体健康后才能进行配种。同时要做好整个养殖场的检疫防控工作，当场内出现感染病畜后，应该立即对其进行扑杀，做好净化工作，并且对于病牛的流产胎儿、分泌物和排泄物也应尽快做好净化处理。同时需要注意对病牛的牛床和食槽进行严格的消毒工作，采用10%石灰乳、10%漂白粉、2%烧碱进行消毒，每年对牛床和食槽进行1 次消毒，牛舍和饲养工具每天进行1 次消毒，运动场地每天进行1 次消毒并持续3～5d，并将病牛接触过的垫料和饲料进行无害化处理，以减少交叉感染的可能。

4.2 定期注射疫苗

目前我国市场上针对布鲁氏菌病的家畜疫苗分为三种，分别是牛19 号疫苗、羊5 号疫苗和猪2 号疫苗。这三种疫苗对布鲁氏菌病的防控都有很好的效果。牛19 号弱毒菌疫苗采用皮下注射的方式注射5mL，接种反应较小，且保护期可达八年之久，但需要注意不能对妊娠期的奶牛注射。羊5 号疫苗可以在每年母牛配种前的2 个月时间内进行注射250 亿活菌，室内气雾应含250 亿活菌，室外气雾应含400 亿活菌，免疫期约为1 年左右，且具有很好的免疫效果，副作用也较少。猪2 号疫苗可以实现口服免疫，剂量为500 亿活菌，对于妊娠期的母牛是很好的防疫选择，除此之外如果采用其他方法对妊娠期母牛进行免疫，都极有可能导致母牛流产。除此之外，还可以选择亚单位苗进行疫苗接种，主要包括OMP 类、LPS 类和CW 类、核糖体类，目前针对活载体苗、抗独特性苗、基因工程苗也在研究之中，并积极推动布鲁氏菌DNA 免疫苗的研究。

4.3 培育健康犊牛

奶牛养殖场要建立独立的犊牛培育舍，并且要与母牛养殖划分开来。安排专业人员对牛犊进行饲养管理，使用固定的饲养工具。在犊牛出生后，应该采用3%～5%来苏尔溶液对犊牛进行全身消毒，消毒完成后才可放入培育舍内。犊牛出生后应该采用健康牛的初乳进行喂养，同时要做好牛犊培育舍环境的消毒工作，工作人员在进出前后都要进行完备的消毒。在牛犊出生20d、120d 和6 个月时进行布鲁氏菌病的检疫工作，一旦发现阳性牛应及时进行处理，并完成相应的消毒净化工作。

5 养殖场工作人员做好防护

在奶牛饲养过程中，养殖场的工作人员应做好平日的自我防护工作，坚持安全生产的原则，把安全、卫生放在首位，在日常工作中要时刻把无菌工作的意识贯彻到每一个环节中，严格按照程序进行工具、饲料和场地的消毒工作，同时要检验消毒工作的完成情况，确保消毒完善、彻底、严格，不能留下病毒传播的隐患。饲养人员在进入牛场进行日常工作前，需要做好防疫措施，严格穿好防护服和防护手套，戴好口罩和头部的防护工具。工作人员在处理牛场的病牛及其排泄物、饲料等物品时，要小心谨慎地按照流程规定进行操作，避免操作失误沾染病菌带来疫病风险，同时注意处理的密封性，避免造成病菌的传播。在完成牛场工作后，工作人员应该及时将防护工具更换下来，并统一进行处理，绝对不能存有侥幸心理，不能不做任何防护措施就进入存在疫情风险的牛场进行工作，并及时洗澡清理身体，做好消毒保护工作。工作人员每年也要按照规定定期去医院进行体检，检查自己的身体状况，确保自己处于健康状态，便于及时发现疫情传染的风险，为布鲁氏菌病的防控工作提供有效信息。

6 小结

奶牛布鲁氏菌病作为奶牛饲养的常见病症，饲养人员应积极做好消毒和预防工作，对病牛及时扑杀，避免病菌传染。饲养人员还应加强对奶牛的检疫防控工作，从源头上杜绝病菌传染的可能性，为人民群众提供健康的畜牧产品。