谢禄松
(重庆市巴南区天星寺镇农业服务中心 401318)
猪圆环病毒最早在1974 年于加拿大被首次报道[1],而后迅速传播至加拿大、法国、意大利、西班牙等多个国家和地区,2000 年郎洪武等在我国22 个规模化生猪饲养场进行了猪圆环病毒检测,发现感染率高达42.9%,其中主要病原为猪圆环病毒2 型。猪圆环病毒感染后会导致猪群免疫抑制,进而使其他病原微生物更容易侵入机体,造成猪圆环病毒病与猪瘟、猪支原体性肺炎、猪链球菌病、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸障碍综合征等多种疾病混合感染,给养猪业造成巨大的威胁。
猪圆环病毒是无囊膜结构的DNA 病毒,粒子直径为17nm,呈二十面体对称结构,其基因组为独特、单股共价闭合环状,长度为1.7kb,属于圆环病毒科成员,是已知最小的动物病毒之一。目前已确认的猪圆环病毒有3 种基因型,分别是1 型、2 型、3 型,当下有1 种新发现的猪圆环病毒,暂时命名为猪圆环病毒4 型[2],其中1~3 型猪圆环病毒具有相似的理化性质,1 型圆环病毒没有致病性。猪圆环病毒2 型为主要导致生猪疾病的基因型,可分为5 种血清亚型,分别为a 型、b 型、c 型、d 型、e 型,猪圆环病毒2 型可在猪肾细胞、睾丸细胞、肺泡巨噬细胞内生长。该病毒对环境抵抗能力较强,在pH=3时仍有一定的抵抗能力,70℃的环境中可存活15min,在氯仿作用下不失活,但对苯酚、季铵盐类化合物和氢氧化钠比较敏感。
猪圆环病毒2 型对生猪免疫系统有非常明显的影响,患病猪单核细胞明显增多,且出现少量没有成熟的粒细胞,B 淋巴细胞和T 淋巴细胞中CD4+的数量减少。这是由于猪圆环病毒2 型能侵袭猪的单核细胞系统,导致淋巴组织、肺脏、肝脏等主要组织器官产生炎性反应,同时与其他病原微生物共同作用于机体后,干扰了细胞的正常增殖,导致生猪免疫系统彻底遭到破坏,从而形成免疫抑制。因此,淋巴细胞缺失、淋巴组织巨噬细胞浸润是猪圆环病毒2 型感染后的病理损害和基本特征。
在我国,多名学者已通过血清学、流行病学的调查证实了猪圆环病毒2 型感染在各地区的规模化生猪养殖场内广泛存在,成为我国危害生猪养殖行业的重要免疫异型性疾病之一。猪圆环病毒2 型的宿主谱相对较窄,生猪为该病毒的天然宿主,哺乳期仔猪和育成期生猪最易感染,尤其是5~12 周龄仔猪[3]。猪圆环病毒2 型的主要传染源是患病猪和带毒猪,这部分生猪的粪便、鼻腔分泌物、唾液、尿液中均有大量病毒,排出体外后会对周围饲料、水源和环境造成污染,此外,康复猪、公猪的精液、流产胎儿均可成为本病传染源。猪圆环病毒2 型可经呼吸道、消化道或垂直传播进行感染,感染4~5 周后出现临床症状。有学者认为,野猪、牛、老鼠等也可感染猪圆环病毒2 型,且牛感染后会形成牛出血性疾病综合征,但在血清学研究中没有任何证据显示猪圆环病毒可以感染其他动物[4],以上动物感染猪圆环病毒2 型后在流行病学上是否有意义还是个未知数,仍需下一步的研究与探索。
虽然在多个国家和地区均有猪圆环病毒2 型的发生,但流行状况有较大差异。在加拿大,大多数农场仅呈散发或小范围流行,患病猪主要表现为猪皮炎与肾病综合征、心肌炎和繁殖障碍综合征等。在美国,猪圆环病毒2 型常与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流感病毒混合感染,但症状相对轻微,发病较慢,症状缓和,死亡率为10%~15%,哺乳仔猪的死亡率仅在2%。在英国,猪圆环病毒2 型的流行非常广泛,且呈逐年上升趋势,发病率为25%~40%,造成的经济损失比口蹄疫和猪瘟还要高。
不同生理阶段的生猪感染猪圆环病毒2 型后临床症状有一定差异,被损害的部位也不相同,可分为断奶仔猪多系统衰竭综合征、新生仔猪先天震颤、猪皮炎与肾炎综合征、猪增生性坏死性间质性肺炎、怀孕母猪繁殖障碍等。
该类型的患病猪主要见于断奶1 周左右的仔猪,患病仔猪精神沉郁、食欲减退、厌食、消化功能受到抑制,饲料利用率降低、消瘦、生长发育速度迟缓、被毛粗乱、呼吸困难、体温升高、咳嗽、有持续性腹泻。部分患病猪有明显的贫血症状,皮肤苍白,随着发病时间的延长,仔猪出现多器官功能衰竭,较为严重的仔猪会迅速死亡,即使有部分仔猪能耐过,生长发育也会受到严重影响,称为僵猪。该病的发病率为5%~50%,死亡率为8%~35%。
剖检患病猪能看到肺脏肿胀,类似于橡皮状,有明显的间质性肺炎,脾脏肿胀,肝脏质硬,肾脏、肠道有不同程度的炎症反应。血液学检测可发现CD4+、CD8+等淋巴细胞显著减少,且单核细胞数量明显增多。
先天震颤仅发生于新生仔猪,同窝仔猪发病率较高,呈广泛发生,但整体为散发性疾病,主要是由患病母猪垂直传播导致。患病仔猪的头部、四肢出现不同程度的双侧性震颤,往往发生震颤的仔猪无法正常哺乳,因机体无法摄取到能量而饿死,耐过1 周后多可康复,也有少部分新生仔猪发生先天震颤后转变为终身震颤。当周围环境迅速改变或受到剧烈此时,症状有所加重,但震颤可能会在卧倒后消失。
多见于8~18 周龄的公猪,患病猪主要表现为体温升高,精神不振,消瘦、厌食,表皮出现皮疹。患病猪的后肢、耳部、胸部和腹部皮肤有不同形状的隆起,而后融合成条状或斑状瘢痕,呈红色或紫红色,随着时间的延长,逐渐变为黑色。体表有不同程度的淤血或水肿,观察可见细小的斑点,患病严重的猪常常几天内死亡,也有部分猪可痊愈,但皮肤上的隆起形成结痂后脱落会有明显的疤痕。
剖检患病猪可以看到脾脏肿胀,肾脏肿大,肾脏皮质中有出血或淤血,表面有白色的半点,呈肾小球肾炎或间质性肾炎样改变,淋巴结出血、肿大。
本病主要危害生长发育期的育肥猪,患病猪表现为生长发育速度减慢,饲料利用率明显降低,采食量下降,有厌食表现,体温升高、咳嗽、呼吸困难、嗜睡、被毛粗糙、皮肤苍白。
剖检患病猪,增生性坏死性间质性肺炎是本病的主要病理变化,肺脏肿胀、坚硬并伴随炎症反应,肺脏间质变宽,表面有灰色、散在的大小不一的红色斑点。其组织学病变为炎性肺泡内有大量的坏死细胞、巨噬细胞和蛋白样物质,Ⅱ型泡内有大量多核巨细胞、单核细胞浸润,肺泡隔因此变厚。
怀孕母猪在感染猪圆环病毒2 型后会因感染时间的不同表现出不同的临床症状,怀孕早期感染后可表现为胎儿死亡,怀孕后期感染后可表现为流产、产出死胎、弱胎、木乃伊胎等,此外还会表现为呼吸困难、精神沉郁、生产性能下降,不孕等。娩出的新生仔猪容易死亡,剖检死亡仔猪可见,肝脏有慢性淤血,心脏心肌肥大,有非化脓性、坏死性或纤维素性心肌炎,可在各组织器官中分离到圆环病毒粒子。
除以上症状外,猪圆环病毒2 型还可导致生猪出现肉芽肿性肠炎,造成患病猪腹泻,且抗生素治疗基本不能取得效果。当感染猪圆环病毒后很容易造成其他病原的混合感染,当混合感染葡萄球菌后,可能表现为仔猪渗出性皮炎。当猪圆环病毒与猪瘟、猪支原体性肺炎、猪链球菌病、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸障碍综合征等多种疾病混合感染时,生猪的临床症状会更加明显,对机体的损伤程度、发病率和死亡率也会明显提高。
根据患病猪的临床症状结合流行病学特点可进行初步判断,但想要进行确诊应借助实验室诊断技术。病毒分离鉴定是猪圆环病毒2 型的诊断方法之一,该病毒可在猪肾细胞上连续传代,无菌条件下采集患病猪、病死猪的组织样品,经研磨后接种在单层猪肾细胞中,可对病毒进行分离培养,但由于本病毒在猪肾细胞内不产生细胞病变,因此,可在分离后借助免疫荧光、电子显微镜、聚合酶链式反应等手段进行进一步的诊断。间接免疫荧光试验能对猪圆环病毒进行检测和基因型判断,酶联免疫吸附试验是较为常用的血清学诊断方法,这一方法的检出率可达99.58%,比免疫荧光试验更为敏感,且适合用于大规模的猪圆环病毒2 型检测。聚合酶链式反应是一种快速、便捷且特异性较高的诊断方法,也有不少学者建立了多重PCR检测手段,可同时检测出两种或两种以上的DNA 病毒,这对容易造成混合感染的猪圆环病毒的诊断有十分重要的临床意义。
目前没有治疗猪圆环病毒2 型的特效药物,且抗生素治疗效果非常不明显,但在实践生产中经常使用抗生素类药物预防继发感染,这对降低猪圆环病毒2 型病死率有一定作用。当发生猪圆环病毒2 型后,应先隔离患病猪,而后将其使用过的圈舍、用具等进行彻底消毒,切断传播途径;再使用黄芪等免疫增强类药物提升患病猪的抗病毒能力,配合注射维生素C、维生素B 等,提高患病猪体质,同时使用盐酸林可霉素、阿莫西林等抗生素类药物,以防止继发感染,有其他症状的患病猪可使用相应的药物进行对症治疗。也有学者认为,使用干扰素、白细胞介素、免疫球蛋白、转移因子、高免血清等药物可控制猪圆环病毒2 型的感染,同时配合中草药抗病毒药物能取得明显的治疗效果,但在实际生产中尚无实际数据的支持。
6.2.1 疫苗控制
截至目前,还没有高效的商品化疫苗可完全控制猪圆环病毒病的发生,市场上常用的猪圆环病毒佐剂灭活疫苗能在一定程度上降低猪圆环病毒2 型的发病率,弱毒疫苗、基因工程疫苗仍处于研发阶段。猪圆环病毒2 型灭活疫苗是将猪圆环病毒感染的细胞培养物进行处理,使培养物丧失感染性,但同时还能保持良好的免疫原性,而后加入佐剂进行乳化,这种疫苗免疫应答较快,我国已获得猪圆环病毒2 型疫苗新兽药证书的企业有37 家,但由于市场上疫苗质量参差不齐,导致养殖户在使用圆环病毒2 型疫苗过程中实际效果存在差异[5]。弱毒疫苗由于圆环病毒的返毒能力较强,强毒株致弱的评价比较困难,距离实际使用仍有很长距离。基因工程疫苗包括亚单位疫苗、重组猪圆环病毒2 型活载体疫苗、核酸疫苗、嵌合疫苗、标记疫苗、合成肽疫苗等[6],目前保护效果仍需进一步研究和证实。
6.2.2 加强饲养管理
由于本病没有特效药物可供治疗,也没有高效的疫苗可以使用,因此,在生产中应不断加强饲养管理,给生猪提供洁净、安全的生活空间,提高猪群抵抗力,降低疾病的发生。应尽可能坚持全进全出,两批猪之间要彻底消毒,饲养过程中要及时清理粪污,定期使用化学消毒药品进行消毒,消毒药品应选择猪圆环病毒较为敏感的药物,且两种或两种以上的消毒药品轮替使用,严格控制饲养密度,改善圈舍内的空气质量,将圈舍温湿度控制在合理范围内。另外,由于猪圆环病毒容易造成免疫抑制,且和其他疾病发生混合感染,因此,在生猪养殖过程中要建立完善的免疫程序,并严格执行,特别要重视猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪流行性腹泻等常见疾病免疫接种工作。密切观察猪群,一旦发现生猪有异常表现,应第一时间隔离、诊断、治疗,减少疾病传播风险,将经济损失控制在最小范围内。
猪圆环病毒2 型给生猪养殖业的健康发展带来较大阻碍,积极预防本病,改善饲养环境,做好免疫接种工作,提高猪群抗病性能很好地降低猪圆环病毒的发病率。各生猪养殖场应当结合自身实际情况,制定可实施的猪圆环病毒预防措施,保障生猪健康状况和生产性能,为生猪产业的可持续健康发展贡献力量。