李成凤,王莹,屈元启,汪强,李玲
(湖北神丹健康食品有限公司,湖北 孝感 432600)
由于种公鸭需要经过适当训练后才能采出精液且精液量较少,因此为了节省成本,满足现代鸭群的生产,需要对原精液进行稀释后再进行人工授精更好。在稀释液加入不同的能源物质和具有缓冲作用的弱有机盐,不仅为精子在体外存活提供了必要的能量,而且能中和精子代谢过程中产生的有害物质,延长精子在体外的存活时间,提高种蛋的受精率[1]。过去,常见做法是用生理盐水对精液进行1:1稀释后直接输精,受精率相对较低。近年来很多学者对稀释液进行了较多研究,同时也发现稀释比例1:1时对原精液进行稀释所获得的受精率有提高趋势。沈洪民等利用生理盐水对番鸭公鸭的精液进行1:1稀释,平均受精率为73.8%[2]。喻婷等在骡鸭的人工授精中用生理盐水对福建番鸭公鸭精液按照1:1稀释对丽佳鸭母鸭输精0.1 mL,种蛋平均受精率为54.28%[3]。林如龙等在使用不同稀释液和稀释比例对半番鸭受精率的影响研究中发现,相同稀释比例的情况下自配稀释液I(谷氨酸钠1.65 g,柠檬酸钠0.85 g,果糖0. 85 g,KCl 0.20 g,MgCl20.20 g, 青霉素8万~10万U,蒸馏水100 mL)的受精率(82.24%)要高于生理盐水(76.85%)和自配稀释液Ⅱ(77.12%);相同的稀释液对原精液按1:1进行稀释的种蛋授精率(82.30%)最高[4]。段元彬等利用四种不同的稀释液(生理盐水、单糖添加量为1 g的1号稀释液、单糖添加量为0.2 g的2号稀释液、单糖添加量为1.4 g的3号稀释液)以及三种不同的稀释比例(2:1、1:1、1:2)对黑羽番鸭的原精液进行稀释,结果发现1号稀释液对原精液1:1稀释时的精子质量以及受精率最高[5]。杨胜林等用蛋黄葡萄糖(蛋黄占比20%、5%的葡萄糖占比80%)、葡萄糖氯化钠(生理盐水占比50%、5%的葡萄糖占比50%)、5%葡萄糖和生理盐水4种不同的稀释液按照2:1的比例对公鸭原精液稀释后进行人工授精,不同稀释液对受精率影响较大,其中以葡萄糖氯化钠的效果最好(80.5%),其次为生理盐水(70.8%)、5%葡萄糖(65.9%),最低为蛋黄葡萄糖(58.5%)[6]。辛清武等用自配液B(氯化钾、氯化镁、葡萄糖、柠檬酸钠、谷氨酸钠等)、生理盐水、自配液A(葡萄糖、柠檬酸钠、谷氨酸钠等)对优质中型肉鸭精液1:1稀释时,自配液B的受精率最高,为95.5%;自配液A的受精率为82.64%,生理盐水的受精率为89.29%[7]。
本研究选用缙云麻鸭为研究对象,通过使用生理盐水和自配稀释液对精液进行1:1稀释,探究不同的精液稀释液对蛋种鸭受精率影响,为生产中提高缙云蛋种鸭受精率和胚胎的生长发育提供一定的参考。
试验选择湖北神丹健康食品有限公司种鸭场的39周龄缙云公鸭90只和缙云母鸭720只。母鸭产蛋性能好、精神状态好、腹部柔软;公鸭精神状态好,健康、有活力,发育良好,性反射好、精液质量好。
试验鸭按照饲养管理规程进行饲养,单笼养殖,饮水自由,每日自动喂料2次,光照时间为白天8 h强光,晚上及其它时间弱光。试验前一周进行采精训练,每隔一天采精一次。
试验公鸭在采精前剪掉泄殖腔周围的羽毛,以免影响采精。采精时间为上午9点左右。采精方法为背部按摩法,输精方法为阴道口外翻法,输精量为每只母鸭100 μL,输精深度为4 cm,输精间隔为4 d。
蔗糖4 g,葡萄糖1 g,醋酸钠(分析纯)1 g,碳酸氢钠0.15 g,加蒸馏水溶解混匀定容至100 mL,pH控制在7.1。
将720只母鸭分成2组,设为对照组和试验组,每组3个重复,每个重复120只。对照组,采用生理盐水对精液进行1:1稀释;试验组,采用稀释液对精液进行1:1稀释。对各组合格种蛋做好标记,同时放入孵化机内,孵化第6天照检受精率,并观察胚胎发育情况。
使用SPSS分析软件进行数据分析,受精率平均值利用T检验分析,以P<0.05为差异显著判断。
受精率数据统计见表1。对照组受精率88.3%,试验组受精率93.8%,较对照组高5.5个百分点,且差异显著,表明与生理盐水相比,自配稀释液能显著提高种蛋受精率。
表1 受精率对比结果
试验组胚胎发育第6天,可看见明显的胚体及血管,对照组的胚体及血管不明显,发育较试验组慢。详细见图1、图2。
图1 对照组胚胎发育第6天的情况
图2 试验组胚胎发育第6天的情况
在家禽人工授精中,精液要经过稀释液稀释后再使用是生产上的普遍做法[8]。精液稀释液需要满足三个条件,一是给精子提供能量;二是稀释液的渗透压与原精液的渗透压相同;三是pH值在6.5~7.5之间。因此,用稀释液对精液进行适当稀释可以提高混合后的精液量,以免粘在集精杯上的原精液无法使用而造成浪费;同时,还能够有效利用稀释液给精液补充能量物质,而且精液稀释液还能够有效中和精子在代谢过程中所分泌的乳酸等多种有害物质,增加精子在体外的成活时间[9]。由于公鸭没有副性腺,精液中含有的各种营养物质浓度相对较低,精子自身具有的各种内源性的能量储备也很少,即使在体外保存的时间非常短,精液品质也会大打折扣,精子在体外的成活时间也受到了很大的影响[10]。因此,使用含有营养物质的精液稀释液无论对精液品质、受精率还是对后续的孵化率的提高都有益处。
精液稀释液的渗透压以及pH值应该与公鸭精液的渗透压和pH值保持相近;新鲜的精液pH介于6.5~7.0之间,所以精液稀释液的pH值也应该处于6.5~7.5之间,精子在代谢活动中产生的乳酸会影响精液的pH值,从而对精液的品质有所影响,所以稀释液中可以适量加入一些具有缓冲功能的如醋酸盐、柠檬酸盐等弱有机盐[11]。稀释液的渗透压应该和原精液的渗透压保持一致。稀释液的渗透压如果偏低或偏高均会影响到精子的质量,研究表明与渗透压高的精液稀释液相比,渗透压低的稀释液对精子的影响更大。因此,使用含有缓冲盐的精液稀释液能更好地保护精子[12]。
本试验使用蔗糖、葡萄糖、醋酸钠、碳酸氢钠配制的精液稀释液与生理盐水相比,受精率可提高5.5个百分点;而且与对照组相比,第6天的胚胎可看到胚体及血管非常明显,发育速度更快。