吉色曲伍,李英林,李 维,惹及拉呷,沙马子哈,周可磊,徐文福,杜 宁
(1.四川省凉山州动物疫病预防控制中心,四川 西昌 615000;2.四川省美姑县农业农村局,四川 美姑616450)
县级兽医实验室承担着辖区内动物疫病诊断、监测和动物流行病学调查工作,为动物疫情风险预警评估提供有力的科学依据和决策依据,所以实验室检测数据的准确性至关重要[1]。为准确评估凉山州县级兽医实验室的检测能力和水平,科学指导各县(市)提升实验室能力建设,凉山州动物疫病预防控制中心组织开展了县级兽医实验室检测能力比对工作。全州17 县(市)参加了此次比对,采用RT-PCR、ELISA、虎红平板凝集试验等3 种方法对255 份盲样进行非洲猪瘟、猪瘟和布鲁氏菌病检测。
1.1 比对项目 比对项目设置为3 个,1 个病原学检测项目和2个血清学检测项目。非洲猪瘟病毒核酸检测采用荧光RT-PCR 方法,猪瘟病毒抗体检测采用ELISA 方法,布鲁氏菌病抗体检测采用虎红平板凝集试验方法。
1.2 比对方法、标准等 2021 年凉山州县级兽医实验室比对方法、标准及结果判定见表1。
表1 比对项目、方法、标准及结果判定
1.3 比对样品 每个比对项目设5 份盲样,由3份阴性、2 份阳性组成。样品由相应的试剂公司提供,经凉山州动物疫病预防控制中心验证、编号和封装后,由参与比对的17个县(市)兽医实验室派专人在指定时间统一领取,并要求在24 h内送达参与比对的实验室。
1.4 比对试剂 参与比对的17 个县(市)兽医实验室采用的试剂均来自同一厂家、同一批次,由凉山州动物疫病预防控制中心统一发放(见表2)。
表2 比对试剂名称、厂家及批号
2.1 整体情况 全州17县(市)均在规定时间内上报了检测结果。对本次比对试验结果进行统计,结果显示:共检测盲样255 份,结果准确的有246份,平均准确率为96.47%。其中,非洲猪瘟病毒核酸检测试验共检测85 份,结果准确的有80份,准确率为94.12%,13 个县(市)检测结果完全准确,占比76.47%;猪瘟抗体检测试验共检测85份,结果准确的有81 份,准确率为95.29%,13 个县(市)检测结果完全准确,占比76.47%;布病抗体检测试验共计检测85份,结果准确的有85份,准确率为100.00%,17 个县(市)检测结果完全准确(见表3)。
表3 2021年凉山州县级兽医实验室检测能力比对结果
2.2 不同县(市)检测能力比对结果 3 种比对试验完全准确的县(市)有12个,占70.59%,出现1种比对试验不准确的县(市)有2个,出现2种比对试验不准确的县(市)有3个(见表4)。
表4 2021年凉山州不同县(市)兽医实验室检测能力比对结果
3.1 结果分析 2021 年凉山州比对结果整体准确率达到95%以上,说明兽医实验室检测能力整体处于较高的水平,能满足非洲猪瘟、猪瘟等重大动物疫病及布鲁氏菌病等人畜共患病检测的需要。本次比对试验采用的3种方法都是兽医实验室常见的病原学和血清学检测方法。虎红平板凝集试验方法的准确率(布鲁氏菌病抗体检测100%)明显高于荧光RT-PCR 方法和ELISA方法的准确率(非洲猪瘟病毒核酸检测94.12%、猪瘟病毒抗体检测95.29%),这是因为虎红平板凝集试验的操作方法简单,且2021 年凉山州动物疫病预防控制中心组织了数次布鲁氏菌病专项检测技术培训。
3.2 存在的问题
3.2.1 实验室闲置 个别县(市)对兽医实验室重视不够,动物疫病监测经费无法落实,造成实验室闲置,没有发挥应有的作用。
3.2.2 实验室无专职技术人员 大部分县(市)实验室由于编制问题,无专职技术人员,且存在一人多岗、调动和借用频繁等情况,造成检测技术参差不齐,检测结果不准确等。
3.2.3 实验室人员的操作不熟练 荧光RT-PCR方法和ELISA 方法是兽医实验室常用的病原学和血清学检测方法,但由于个别县(市)部分实验室检测技术人员对实验仪器设备及操作步骤不熟练,尤其是对移液器使用不规范等,会导致检测结果不准确[2]。
3.2.4 实验室仪器设备准确性差 荧光定量RT-PCR 仪和酶标仪是兽医实验室常用设备,个别县(市)实验室由于长时间没有启用仪器设备,也没有按期进行校正,也会造成检测结果不准确。
3.2.5 实验室管理不规范 个别县(市)由于事业单位机构改革、人员变动、实验室整体装修升级改造等因素,造成实验室管理不规范,从而影响检测结果的准确性。