成都市2021年秋季重组禽流感（H5＋H7）三价灭活苗免疫抗体水平的监测与分析

陈 雯，林 鑫，王凤艺，雷 玉，黄云川，李桂黎，李 敏

（四川省成都市动物疫病预防控制中心，四川 成都 610041）

禽流感（Avian Influenza，AI）是A 型流感病毒引起的禽类呼吸系统症状的传染性疾病综合征，按照病毒致病力的差异，该病可分为高致病性、低致病性与无致病性三类［1］。高致病性禽流感主要包括H5和H7两种，不仅对养禽业危害巨大，还能够感染人，被我国列为一类动物疫病。当前，在全国推广使用的高致病性禽流感病毒疫苗主要是重组禽流感（H5 ＋H7）三价灭活苗（H5N1 Re-11 株＋Re-12 株，H7N9 H7-Re3 株）和重组禽流感（H5 ＋H7）三价灭活苗（H5N2 rSD57 株＋rFJ56 株，H7N9 rLN79 株），针对的是我国主要流行毒株H5亚型2.3.2.1d分支、2.3.4.4d分支和H7亚型，其总体防控效果较好。

根据全国高致病性禽流感疫情动向，成都市于2021 年初开始逐步更换接种重组禽流感（H5＋H7）三价灭活苗（H5N2 rSD57 株＋rFJ56株，H7N9 rLN79 株），为评估更换后疫苗的免疫效果，笔者从15 个区（市）县的部分规模化养殖场、散养户中采集禽血清样本进行了抗体水平监测，现将监测结果报告如下：

1 材料与方法

1.1 样品采集 2021 年11 月，随机抽查成都市15个区（市）县中小规模（禽存栏量500～5 000羽）饲养场，从24 个规模化养殖场中采集禽血清720份，30个散养户中采集禽血清600份，共计1 320份。

1.2 样品处理 用真空采血管（或一次性注射器）抽取一定量静脉血，45°斜放于37 ℃恒温培养箱中静置20 min，待有黄色血清物质析出后，再以3 000 r/min离心10 min，吸出上清液移至无菌离心管中备用。

1.3 抗体检测方法 禽流感抗体检测实际流程严格依据《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T 18936-2020）方法进行。

1.3.1 血凝（HA）试验 当对照孔的红细胞呈显著纽扣状时判定结果，观察红细胞有无泪珠状流淌，完全无泪珠样流淌（100%凝集）的最高稀释倍数判为血凝效价。

1.3.2 血凝抑制（HI）试验 根据血凝（HA）试验测定的标准抗原的血凝效价，判定4 个血凝单位（即4 HAU）的稀释倍数，以完全抑制4 HAU 抗原的最高血清稀释倍数为该血清的HI抗体效价。

2 结果

2.1 免疫抗体监测结果 对采集的1 320份禽血清进行了H5 亚型禽流感（rFJ56 株和rSD57 株）、H7亚型禽流感（rLN79株）的免疫抗体水平监测，结果如表1 所示。2021 年成都市15 个区（市）县秋季禽流感的整体免疫抗体合格率为93.9%～99.8%，均达到了农业农村部规定的免疫抗体合格率不低于70.0%的标准。H5亚型禽流感（rFJ56株）免疫抗体合格数为1 240 份，总合格率为93.9%，各个地区的免疫抗体合格率为83.0%～100.0%；H5 亚型禽流感（rSD57 株）免疫抗体合格数为1 302 份，总合格率为98.6%，各区域的免疫抗体合格率为95.0%～100.0%；H7亚型禽流感（rLN79株）免疫抗体合格数为1 318份，总合格率为99.8%，各区域的免疫抗体合格率为98.0%～100.0%。

表1 2021年成都市各区（市）县秋季禽流感免疫抗体监测结果

2.2 免疫抗体定点监测结果 从定点监测结果（表2）可以看出，24 个规模化养殖场共采集了720份样品，H5亚型禽流感（rFJ56株和rSD57株）和H7 亚型禽流感（rLN79 株）的场点免疫合格率分 别 为93.6%（674/720）、99.0%（713/720）和99.7%（718/720）；随机抽取30 个散养户的600 份样品检测，结果三项禽流感免疫抗体合格率分别为94.3%（566/600）、98.2%（589/600）和100.0%（600/600）。规模化养殖场和散养户的H7亚型禽流感抗体水平均高于H5 亚型禽流感，也都大于农业农村部规定的70.0%的标准。

表2 2021年成都市各区（市）县秋季禽流感免疫抗体定点监测结果

3 分析与讨论

3.1 从总体数据分析 从2004 年起，我国开始在全国范围内对人工饲养的禽类进行强制免疫，并将此项工作作为预防控制禽流感流行的重要手段［2］。本次高致病性禽流感的免疫抗体监测是对成都市辖区15 个区（市）县秋季存栏的禽群展开抽检，包括规模化养殖场和散养户，所以涉及范围相对广，对于评估本市高致病性禽流感的防控水平具有代表性。依据总体数据分析，H5 亚型禽流感的整体免疫合格率为93.9%和98.6%，H7 亚型禽流感的整体免疫合格率是99.8%。

根据《兽医公报》公布的数据显示［3-5］，2021年7 月、8 月和9 月全国H5 亚型高致病性禽流感的免疫合格率分别为94.95%、95.5%、95.45%，H7N9流感的免疫合格率分别为94.21%、95.01%、94.78%，相较于全国第三季度禽流感疫苗的免疫抗体水平，成都市秋防的免疫抗体水平并不差，均能达到90%以上。

成都市各辖区禽饲养场严格依据国家动物疫病强制免疫计划［6］，采取春秋两季集中免疫联合定期补免的模式，对规模养殖场（户）等予以程序化免疫，普遍使用国家推广的重组禽流感病毒H5＋H7 二价或三价灭活疫苗开展免疫，所以抗体合格率尚佳。

3.2 从不同毒株的监测数据分析 从不同毒株的免疫抗体水平来看，H7亚型禽流感（rLN79株）的免疫合格率最高，其次是H5 亚型禽流感（rSD57株），H5亚型禽流感（rFJ56株）最低。截至2021 年9 月，重组禽流感（H5＋H7）三价灭活苗（H5N2 rSD57 株＋rFJ56 株，H7N9 rLN79 株）的免疫覆盖率达到了90%，较春防覆盖范围更广，H5、H7 亚型高致病性禽流感疫苗的免疫抗体合格率也提高了5%～8%。综上表明，重组禽流感（H5＋H7）三价灭活苗在成都市家禽中的免疫效果良好，免疫程序有效，禽类个体的抗体水平较高，家禽得到了有效保护。

由于禽流感病毒在自然界中不断进化，抗原性不断发生变异，而已接种的疫苗保护效力有限，需要不断更新疫苗株才能保障疫苗的免疫保护效果。疫苗生产厂家应根据疫情态势变化及时调整疫苗生产用种毒。养殖户在流行季节要注意实时监测气候以及卫生条件变化，完善免疫接种程序以规避潜在的免疫空窗期。兽医部门要建立健全高致病性禽流感监测网络，对禽流感的发生、流行趋势及时做出预测，对可能暴发高致病性禽流感疫情的地区严格执行预警制，并配备相应的应急消杀措施，一经发现立即通报相关机构，严格按照《高致病性禽流感疫情应急实施方案（2020 年版）》［7］等相关法律规定处置。

3.3 从监测场点分析 散养户的免疫效果要略好于规模化养殖场，且各区之间免疫抗体合格率的差异较小，说明散养户防控意识不断增强，对政府采购的疫苗使用率更高，能够积极配合有关防疫部门进行补免工作。辖区规模化养殖场与散养户在使用国家批准的三价苗开展免疫后，满21 d 即开展抗体监测，监测结果确保群体H5、H7亚型高致病性禽流感的免疫抗体水平达到70%以上。禽类中小规模养殖场以及散养户在成都市占有相当大的比例，本次免疫监测检出高水平的禽流感抗体，间接反映出各地强制免疫工作的成效较为显著。

根据《中华人民共和国动物防疫法》，实行预防为主，预防与控制、净化、消灭相结合的方针，全面提升生物安全水平，构建科学、合理的高致病性禽流感防疫体系。各地动物疫病预防控制机构要加强饲养场所纪律管理，鼓励饲养场建设无规定动物疫病生物安全隔离区，同时加强跟踪监测与消毒，防止养殖场周边环境存在病原污染，指导养殖场（户）加强生物安全体系建设，实行封闭管理，完善防鸟、驱鸟设施设备，防止候鸟与家禽接触，从动物来源、运输调运、洗涤消毒、人员控制、投入品控制、强制免疫等方面提升养殖场或养殖区域的生物安全水平［8］。

4 小结

成都市禽类养殖环境已大体建立起了良好的免疫机能屏障，能够有效杜绝高致病性禽流感疫情在秋冬易感季节的暴发和蔓延。虽然高致病性禽流感免疫抗体合格率已达到农业农村部标准，但病毒变异等问题依然存在，防疫工作依旧不容松懈。各区（市）县应深刻认识高致病性禽流感的危害，加强对疫苗质量的管控及后续免疫保护效果的监测和评估，密切关注禽流感疫情相关动向。国家兽医参考实验室、专业实验室、区域实验室和各区域动物疫病预防控制中心要持续跟踪病原变化和流行趋势，为各地免疫方案的制定、疫苗的选择和更新提供技术支撑。动物疫病预防控制机构要根据动物疫病的净化、消灭规划，开展动物疫病净化指导、培训，鼓励和支持饲养场和个人开展动物净化，并对净化效果进行监测和评估。