FTO在胃腺癌患者癌组织中的表达及临床意义*

刘 超

延安大学附属医院胃肠外科，陕西延安 716000

胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤，具有恶性程度高、侵袭性强和转移率高等临床特点，进展期胃癌患者的5年生存率常不及30%[1]。胃腺癌是胃癌中最常见的病理类型，由胃腺体细胞恶变而来，约占胃癌的95%[2]。脂肪和肥胖相关蛋白(FTO)起初被报道与肥胖性疾病关系密切，后来发现它还是一种N6-甲基腺苷(m6A)去甲基化修饰酶，在细胞增殖、凋亡和分化等生物过程中发挥着重要作用[3]。近年来的研究发现FTO参与了乳腺癌、子宫内膜癌和急性髓性白血病等多种癌症的发生与发展[4-6]。但目前关于FTO在胃癌中的研究并不多见。本研究通过免疫组织化学法(IHC)检测FTO在胃腺癌患者癌组织中的表达情况，并分析其表达水平与患者临床病理特征及预后的关系，旨在为胃癌的诊断和治疗提供新思路、新靶点。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2014年1月至2016年6月在延安大学附属医院普外科行手术治疗的胃腺癌患者的癌组织及匹配的癌旁组织标本。纳入标准：(1)患者行根治性手术，不论术前是否接受过新辅助治疗；(2)术后病理确诊为TNM Ⅰ～Ⅲ期胃腺癌；(3)患者临床资料完善且随访依从性好。排除标准：(1)术前或术中发现肿瘤远处转移，或无法行根治性手术；(2)本研究涉及的相关指标缺乏；(3)患者术后不能配合随访调查。本研究最终纳入102例胃腺癌患者作为研究对象，其中男60例、女42例，平均年龄(61.0 ±5.8)岁。研究对象中远端胃切除术84例，近端胃切除术8例，全胃切除术10例；研究对象术后病理显示TNM分期Ⅰ期9例，Ⅱ期48例，Ⅲ期45例。所有研究对象术后随访5年，计算总生存时间；并根据患者术后5年内是否死亡分为预后不良组和预后良组。

1.2免疫组织化学检测 采用IHC方法检测102例胃腺癌患者的癌组织及匹配的癌旁组织标本中FTO水平。所有标本由石蜡包埋固定并连续切片，HE染色和光镜下确认后行常规IHC。SP试剂盒和DAB试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，兔抗FTO单克隆抗体(货架号为ab124892，稀释比为1∶100)购自上海艾博抗贸易有限公司，各步骤严格按照试剂盒操作说明书进行操作。IHC评判标准：高倍镜视野(×400)下随机选择5个视野，观察每个视野中100个细胞。根据FTO染色强度分为0(无色)、1(淡棕色)、2(棕黄色)及3(棕褐色)分；根据染色阳性细胞比例分为1(<25%)、2(25%～<50%)、3(50%～<75%)及4(≥75%)分。两项得分相乘，分值>4分判定为高表达，分值≤4分判定为低表达。

1.3统计学处理 采用SPSS22.0统计软件进行数据分析。计数资料以例数和百分率(%)表示，组间比较采用χ2检验。采用单因素分析预后不良组和预后良组间临床病理指标的差异，再将单因素分析中差异有统计学意义的指标纳入Cox回归模型进行多因素生存分析。用Kaplan-Meier曲线分析FTO高表达、低表达患者的预后。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1胃腺癌和癌旁组织中FTO的表达 IHC显示，FTO主要表达在细胞质中，部分表达在胞核内，在胃腺癌患者癌组织中染色以棕黄色多见，而在癌旁组织中主要呈淡棕色或不表达。102例胃腺癌患者的癌组织和癌旁组织中FTO高表达率分别为67.6%(69/102)和37.3%(38/102)，差异有统计学意义(χ2=18.889,P<0.001)，见图1。

2.2FTO高表达与胃腺癌临床病理特征的关系 FTO高表达率在不同TNM分期、不同淋巴结转移情况、不同肿瘤分化程度或不同脉管侵犯情况的胃腺癌患者中比较差异有统计学意义(P<0.05)；但FTO高表达率在不同年龄、性别、肿瘤位置及幽门螺杆菌感染间比较差异无统计学意义(均P>0.05)，见表1。

表1 FTO高表达与胃腺癌临床病理特征的关系[n(%)]

2.3FTO表达与胃腺癌患者预后的关系 术后5年内有67例(65.7%)胃腺癌患者死亡，判定为预后不良组，仍存活的35例(34.3%)患者归为预后良组。单因素分析显示年龄、TNM分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度、脉管侵犯和FTO水平在预后不良组和预后良组的分布比较差异有统计学意义(均P<0.05)，见表2。将上述结果引入Cox多因素分析，显示高龄、TNM分期晚、淋巴结转移阳性、肿瘤分化差及FTO高表达是患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05)；FTO高表达的死亡风险是FTO低表达的1.95倍(95%CI:1.39～2.41;P=0.005)，见表3。Kaplan-Meier曲线也显示FTO高表达的患者预后显著差于FTO低表达，差异有统计学意义(P<0.05)，见图2。

表2 胃腺癌患者预后不良的单因素分析[n(%)]

续表2 胃腺癌患者预后不良的单因素分析[n(%)]

3 讨 论

我国胃癌的发病率和病死率均高居恶性肿瘤第2位。尽管目前采用多学科诊疗模式，但近50%的胃癌患者在治疗后仍会发生复发或远处转移，严重威胁着人类健康[1-2]。FTO可以通过降低原位癌和(或)抑癌基因mRNA的m6A甲基化水平以调节该蛋白的表达，在肿瘤发生、转移和耐药产生等方面均发挥着重要角色[3]。

既往有研究利用TCGA等数据库进行分析，显示FTO mRNA在胃腺癌患者癌组织中呈高表达[7]。本研究结果显示，从蛋白层面进一步表明FTO在胃腺癌患者癌组织中的表达明显高于癌旁组织；FTO高表达率在不同TNM分期、不同淋巴结转移情况、不同肿瘤分化程度或不同脉管侵犯情况的胃腺癌患者中比较差异有统计学意义(P<0.05)，这提示FTO可能参与了胃癌的发生、进展和转移，也揭示其作为诊断标志物的应用价值。

另外，本研究结果显示，FTO高表达是胃腺癌患者预后不良的独立危险因素，这有助于临床制订个体化治疗方案，以提高其生存率。NIU等[4]发现FTO高表达有助于增强乳腺癌细胞的增殖与迁移能力，并且是乳腺癌患者预后不佳的预测因子。LI等[6]报道FTO在急性髓性白血病中呈高表达，通过降低ASB2和RARA的m6A修饰水平阻止了全反式维甲酸介导的细胞分化，进而发挥促癌作用。有研究揭示FTO可以通过调控caveolin-1的m6A甲基化修饰和线粒体能量代谢来促进胃癌的生长和转移[8]。但关于FTO在胃癌中的作用机制仍知之甚少，有待进一步研究，这也将为FTO作为胃癌治疗潜在新靶点提供依据。

综上所述，FTO在胃腺癌患者癌组织中异常高表达，并与预后不良相关，对患者的预后判断和诊疗具有重要的临床应用价值。