脐血PCT、单核细胞表面髓系细胞触发受体、脂多糖受体联合胃液细菌培养在诊断早产儿早发性感染中的价值分析

吴琦梁，王斌，陈欣欣，欧阳学军

早发性感染是指出生72 h 内发生的感染，早产儿早发性感染发生率约占活产儿的1%，具有病情危重、进展迅速、病死率高等特点，早期诊断并选取科学有效的治疗方案是降低病死率的关键［1-2］。目前临床尚无理想的诊断方案，胃液细菌培养、降钙素原（procalcitonin，PCT）检测是诊断早发性感染的常用方式，但均存在一定假阳性、假阴性，影响诊断结果准确性。脐血是新生儿血液循环的一部分，可能与外周血相关生化指标检测早发性感染具有相似价值，单核细胞表面髓系细胞触发受体（MONO-TREM1）、脂多糖受体（MONO-CD14）在早发性感染患儿中异常表达［3］。由于目前临床尚无脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 水平联合胃液细菌培养诊断早产儿早发性感染的研究报道，本研究以早发性感染早产儿35 例及同期未发生早发性感染早产儿70 例为研究对象，首次分析四者联合的诊断价值，为临床诊疗提供指导。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性选取2018 年1 月至2021 年1 月南方医科大学珠江医院早发性感染早产儿35 例为观察组，其中消化道感染13 例，呼吸道感染7 例、泌尿道感染9 例、败血症6 例。以1∶2 配对原则选取同期未发生早发性感染早产儿70 例为对照组。2 组孕周均＜37 周，观察组出生72 h 内确诊为感染，符合以下诊断标准中的（1），且同时符合（2）、（3）、（4）项中的任一项：（1）有以下临床表现：体温波动明显或发热、皮肤发花或末梢循环不良、皮疹、吃奶减少、嗜睡、反应差、少动、腹胀、黄疸加重、心率增快、肝脾增大等；（2）血培养阳性；（3）脑脊液培养、尿培养、便培养、外周分泌物培养或胸片检查显示有肺炎等；（4）各项培养阴性，但至少有以下指标之一者：外周血白细胞计数（white blood cell count，WBC）＞30×109/L或＜6×109/L，血小板计数（platelet count，PLT）＜100×109/L，末梢血未成熟中性粒细胞与中性粒细胞总数比值（I/T）＞0.16，C 反应蛋白（c-reaction protein，CRP）＞8 mg/L。对照组出生72 h 内未发生感染。一般资料见表1。

表1 观察组与对照组一般资料比较

1.2 方法

1.2.1 胃液细菌培养 早产儿出生1 h 内在喂水、进食、给药前通过无菌操作放置胃管，抽取胃液2 ml，培养基由北京北纳创联生物技术研究院提供，35 ℃下培养48 h 后观察生长情况，采用MODERNWATER 微生物分析仪按照《全国临床检验操作规程》［4］要求分离鉴定菌株。

1.2.2 脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 水平检测 早产儿出生后脐周常规消毒，10 min 内在脐带端抽取脐血4 ml，离心，取血清，均分为2 份，其中一份采用美国贝克曼库尔特AU5800 型全自动生化分析仪及配套试剂盒以电化学发光法检测PCT 水平，另一份采用美国BD FACSCantoⅡ型流式细胞仪以双抗体夹心酶联免疫吸附法测定MONO-TREM1、MONO-CD14平均荧光强度（mean fluorescence intensity，MFI）比值。

1.3 观察指标

对比2 组脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14；Logistic 回归方程分析脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 与早产儿早发性感染的关系；分析胃液培养结果；脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14、胃液细菌培养单独及联合诊断早产儿早发性感染的结果。PCT≥0.5 μg/L 为阳性，MONOTREM1≥8.61 MFI 为阳性，MONO-CD14≤130.20 MFI 为阳性，联合诊断均为阳性则判断为阳性。

1.4 统计学处理

采用SPSS21.0 统计分析软件分析所得数据，符合正态分布的计量资料以±s表示，组间比较采用t检验；计数资料以百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验，Logistic 回归方程分析变量间关系。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 水平比较

观察组脐血PCT、MONO-TREM1 水平高于对照组，MONO-CD14 水平低于对照组（P＜0.05）。见表2。

表2 观察组与对照组脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 比较（± s）

表2 观察组与对照组脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 比较（± s）

注：PCT 为降钙素原，MONO-TREM1 为单核细胞表面髓系细胞触发受体，MONO-CD14 为脂多糖受体，MFI 为平均荧光强度

指标PCT（μg/L）MONO-TREM1（MFI）MONO-CD14（MFI）观察组（n=35）1.59±0.25 10.10±1.08 126.49±62.81对照组（n=70）0.34±0.12 7.36±1.12 178.06±69.34 t/χ2 值34.701 11.957 3.704 P 值＜0.001＜0.001＜0.001

2.2 早产儿早发性感染的相关分析

以是否发生早发性感染作为因变量（赋值：发生=1，未发生=0），以PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14（赋值：＜均值=1，≥均值=2）作为自变量，进行多因素Logistic 回归方程分析，结果显示，校正妊娠期感染、羊水胎粪污染、胎膜早破等混杂因素后，PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 仍与早产儿早发性感染有关（P＜0.05）。见表3。

表3 早产儿早发性感染相关因素分析

2.3 胃液培养结果比较

105 例早产儿经胃液培养检出阳性38 例，38 株病原菌中大肠埃希菌14 株（36.84%），凝固酶阴性葡萄球菌9 株（23.68%），金黄色葡萄球菌7 株（18.42%），B 族链球菌6 株（15.79%），其他2 株（5.26%）。观察组胃液培养阳性率65.71%（23/35）高于对照组胃液培养阳性率21.43%（15/70），差异有统计学意义（χ2=19.816，P＜0.001）。见表4。

表4 观察组与对照组胃液培养结果比较［例（n%）］

2.4 诊断结果

脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14、胃液细菌培养联合诊断早产儿早发性感染特异度（91.43%）高于各指标单独诊断结果，误诊率（8.57%）低于各指标单独诊断结果（P＜0.05）。见表5、6。

表6 单独诊断与联合诊断结果比较（%）

3 讨论

近年来随着医疗技术的发展及医疗环境优化，国内新生儿感染发病率有所减少，但仍是引起新生儿病死的重要因素［5-6］。而早产儿由于机体防御能力较差，加之各种侵入性操作，致使早发性感染风险增加，但其临床表现隐匿，因此探究更为科学、高效的诊断方案尤为重要。

正常情况下，早产儿胃内是无菌状态，但出现胎膜早破、羊水污染或宫内感染时，细菌可于胃内定植并大量繁殖，此后可因食管反流而被吸入呼吸道内引发呼吸系统感染，部分细菌会透过胃黏膜屏障进入血液系统，引发肠源性感染［7］。因此，早产儿胃液培养越来越受到临床医师重视，其可明确显示胎儿出生前羊膜腔内环境及出生后胃内情况，且具有无创性，家长易于接受。本研究胃液培养结果显示，105 例早产儿经胃液培养检出阳性38 例，38 株病原菌，以大肠埃希菌（36.84%）、凝固酶阴性葡萄球菌（23.68%）为主，且观察组胃液培养阳性率（65.71%）高于对照组（21.43%），表明早发性感染患儿胃内细菌定植率更显著。但胃液培养结果仅可直观显示细菌定植情况，但定植细菌可能不引起感染，导致出现假阳性。因此对于胃液培养无法准确诊断的早产儿，建议联合其他检测指标进一步确诊。

PCT 是诊断细菌性感染的常用标志物，在不同感染性疾病中的诊断价值已在国内外多项研究中得到证实［8-12］。PCT在新生儿出生0～6 h 时一般＜2 ng/mL，18～30 h 内达到生理性高峰（正常情况下＜21 ng/mL）。本研究抽取脐血检测PCT水平，不仅能快速获得血标本，避免出生后生理性增高，还可避免因抽血操作对患儿造成的痛苦。但早产儿若出现围生期低氧血症、羊水污染、宫内窘迫，或母亲伴有子痫前期、妊娠期糖尿病等因素均会导致脐血PCT 水平异常升高，同时脐血PCT 水平会受胎龄大小影响［13-14］。故对于出现上述影响因素者需进一步采用其他方案确诊。TREM 是免疫球蛋白超家族成员，TREM1 是其激活受体之一，在MONO 等髓系细胞中表达，可为蛋白酪氨酸激酶提供对接点，通过细胞外信号调节激酶重新排列肌动蛋白细胞骨架和激活转录因子，继而促进促炎细胞因子表达［15-16］。CD14 是脂多糖（LPS）受体表面抗原，属于细胞表面糖蛋白家族成员之一，能识别并结合LPS 诱导细胞酪氨酸磷酸化，参与机体免疫、防御等一系列生物学过程［17-18］。相关研究表明，CD14 通过识别革兰阴性杆菌产生的内毒素，在脓毒症的发病过程中发挥关键作用［19］。早产儿早发性感染是多种因素作用的结果，本研究发现妊娠期感染、胎膜早破、羊水胎粪污染均可能引发早发性感染，进一步校正混杂因素后发现，PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 仍与早产儿早发性感染有关（P＜0.05），可作为临床诊断的客观指标。为进一步提高诊断效果，本研究尝试将脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 与胃液细菌培养联合，发现四者联合诊断早产儿早发性感染特异度可提高至91.43%，误诊率降至8.57%，对临床诊治具有重要价值。

综上所述，早产儿脐血PCT、MONO-TREM1、MONOCD14 异常表达可能参与早发性感染的发病，对于胃液细菌培养阳性但临床表现不明显的早产儿，可结合脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 检测水平进行判断，以提高诊断效能，指导临床合理应用抗生素。本研究的不足之处在于，未明确脐血PCT、MONO-TREM1、MONO-CD14 与早产儿感染范围、感染严重程度的关系，可作为今后研究方向。