中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在诊断肾性贫血及评估病情中的应用价值

李晓亮, 张 黎

(1.安徽医科大学附属巢湖医院 输血科, 安徽 巢湖, 238001;2.江苏省疾病控制中心 分子诊断组, 江苏 南京, 210009)

肾性贫血(RA)是慢性肾脏病的常见并发症，是由促红细胞生成素(EPO)缺乏、铁代谢异常、骨髓造血功能抑制等因素引起的[1]。早期RA可无任何症状，但其进展与临床预后和生存质量相关[2]。目前，中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)已用于急性肾损伤(AKI)和慢性肾脏病(CKD)的早期发现和疗效评估[3], 但有关血NGAL在RA中的应用研究则较少[4]。本研究分析血NGAL水平在CKD合并不同程度贫血患者中的变化情况及其与贫血指标的相关性，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年12月—2021年10月安徽医科大学附属巢湖医院收治的CKD合并贫血患者86例，所有患者均符合《中国肾性贫血诊治临床实践指南》[5]中的诊断标准。纳入标准: ① 初治患者，年龄>15周岁，一般临床资料及实验室数据完整; ② 血常规提示男性血红蛋白(Hb)<130 g/L, 非妊娠期女性Hb<120 g/L, 妊娠期女性Hb<110 g/L; ③ 患者未合并其他导致贫血的疾病。依据中国贫血诊断标准[6], 将86例患者按照贫血程度分为轻症组(Hb≥90 g/L)54例、中重症组(Hb<90 g/L)32例; 另选取同期CKD未合并贫血患者36例作为对照组。所有患者均符合CKD诊断标准[7]。本研究经本院伦理委员会批准(编号: KYXM-202201-002)。

1.2 仪器、试剂及检测方法

全自动生化分析仪(SIEMENS，型号ADVIA Chemistry XPT)，试剂购自SIEMENS公司，采用肌氨酸氧化酶法检测血肌酐(Scr), 脲酶法检测血尿素氮(BUN); 全自动化学发光仪(北京热景，型号C2000), 试剂购自九强生物技术有限公司，采用磁微粒化学发光免疫分析法检测血NGAL; 全自动血细胞分析仪(SYSMEX, 型号xn-2800), 试剂购自SYSMEX公司，检测红细胞(RBC)、红细胞压积(HCT)、Hb。

所有患者均于清晨空腹8 h状态下抽取7 mL静脉血，其中5 mL置于黄色抗凝管，并以1 500 g离心5 min, 取上清用于血NGAL、Scr和BUN检测; 剩余2 mL置于EDTA-2K抗凝管中充分混匀，用于RBC、HCT和Hb检测。

1.3 统计学分析

采用SPSS 20.0软件进行数据统计分析。符合正态分布的计量资料以均数±标准差表示，不符合正态分布的计量资料采用中位数(四分位数间距)表示; 应用Kruskal-Wallis秩和检验进行多组间差异比较; 采用Spearman进行指标间相关性分析; 多组间比较及受试者工作特征(ROC)曲线均应用GraphPad Prism8进行绘图分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组CKD患者一般资料

在纳入的122例CKD患者中，男65例，女57例，男、女比例为1.14∶1, 患者平均年龄为(63.6±14.3)岁; 按年龄段将患者划分为青少年(≤40岁)8例，中年(41～65岁)59例，老年(≥66岁)55例。各组患者性别分布及年龄比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 各组CKD患者一般资料[n(%)]

2.2 各组CKD患者血NGAL、Scr和BUN水平比较

中重症组血NGAL、Scr、BUN水平高于轻症组和对照组，轻症组血NGAL、Scr、BUN水平高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见图1。

A: 各组血NGAL水平比较; B: 各组Scr水平比较; C: 各组BUN水平比较。

2.3 CKD合并贫血患者血NGAL与各项检测指标的相关性分析

Spearman相关分析显示，CKD合并贫血患者的血NGAL与RBC、HCT和Hb呈显著负相关(P<0.05), 与Scr和BUN呈显著正相关(P<0.05)。见表2。

表2 CKD合并贫血患者血NGAL与各检测指标的相关性分析

2.4 血NGAL在RA中的诊断价值

ROC曲线分析结果显示，血NGAL水平诊断RA的曲线下面积(AUC)为0.729, 灵敏度为80.2%(95%CI: 70.6～87.3), 特异度为61.1%(95%CI: 44.9～75.2), 最佳临界值为134.62 ng/mL。见图2。

图2 血NGAL诊断RA的ROC曲线

3 讨 论

RA在慢性肾脏病中普遍存在，各期均可出现，且多表现为轻度至中度贫血[8]。一项横断面调查[9]显示, CKD患者的贫血患病率高达51.5%, 且随着病情发展，患病率会逐渐增高。随着贫血程度的不断加重, RA患者会发生心血管并发症、贫血并发症以及肾衰竭，甚至会导致死亡[10]。

NGAL是脂质沉积蛋白超家族中的一种25 kDa蛋白，这种蛋白在各种病理状态下由免疫细胞、肝细胞和肾小管细胞表达和分泌[11]。研究[12]表明，血NGAL与贫血有关联，是其重要的调控因素。本研究中, CKD合并贫血患者的血NGAL水平显著高于未合并贫血患者，且贫血患者的血NGAL水平随着贫血程度的加重而显著升高，提示血NGAL水平升高是导致RA的关键因素，其水平高低与贫血轻重程度密切相关。血NGAL作为一种铁代谢调节因子，长期升高可通过抑制RBC生长和破坏铁稳态而导致贫血的产生[13]。当机体出现贫血时，会上调NGAL的表达，导致骨髓前体中NGAL增多，进一步抑制RBC的生成，从而加重贫血[14]。本研究发现, RA患者的Scr和BUN水平显著升高，且随着贫血程度的加重而逐步上升，提示患者贫血程度加重不仅受血NGAL水平上升影响，还受肾功能减退的影响。YIN P等[15]报道CKD患者发生贫血的同时会出现肾功能损伤。医学调查[16]显示, CKD患者贫血会加剧肾功能恶化，而肾功能恶化又会加重贫血。RA的发生发展与血NGAL水平和患者肾功能情况有着密切的联系，其可能机制是CKD患者患病初期出现肾功能损伤，肾脏局部炎症刺激肾小管细胞分泌NGAL, 进而导致贫血的发生。随着病情逐渐发展，肾小管上皮不断受损并大量分泌NGAL, NGAL通过抑制RBC生成、破坏铁稳态等方式加重贫血。随着肾功能的不断减退，患者容易出现恶心、呕吐、食欲减退等症状，导致造血原料摄入不足; 此外，尿毒症患者体内产生的毒素会干扰红细胞的正常代谢，抑制骨髓造血，也会进一步加重贫血。

YANG H等[17]研究显示, NGAL是一种可以评价肾功能损伤程度的生物学标志物。本研究也发现血NGAL与Scr和BUN呈正相关，表明血NGAL水平能间接反映患者的肾功能损伤情况。从目前RA的临床诊断情况来看，其诊断指标有Hb、RBC、HCT等，但多数CKD患者在透析前或发病早期忽视了血常规检测，且患者早期Hb未出现明显异常，因此经常被忽视。有学者[18]提出，血NGAL对评估CKD贫血有一定的价值，且其在CKD常规检测中应用较广，或可用于CKD非透析患者的贫血筛查。本研究中, ROC曲线分析发现血NGAL对RA有良好的诊断能力，血NGAL诊断RA的最佳临界值为134.62 ng/mL, 临床上可以通过检测血NGAL水平来辅助诊断RA。

本研究仍存在一定的不足，例如调研时间较短、样本数量偏少，尤其是重度贫血患者数量较少; 患者多为中老年人，青少年人群较少，年龄分布不够平衡。因此，后续研究应进一步扩大范围、均衡年龄后进行深入论证。

综上所述，血NGAL是RA发生和病情发展的关键因素，其水平与贫血程度密切相关，血NGAL对RA有良好的诊断能力，动态监测血NGAL水平可为RA的临床诊断和病情评估提供参考依据。