不孕女性维生素D水平与卵巢储备功能的相关性研究

徐 上，栗嘉明，马 娟

维生素D是一种类固醇衍生物，在血循环中主要以25(OH)D3形式存在，通过与受体(维生素DR)结合发挥重要的生理功能[1]。女性缺乏维生素D可影响自然受孕，且降低体外受精-胚胎移植治疗成功率[2-3]。已有研究[4]报道，女性日晒时间与绝经年龄有关，日晒时间较短者绝经年龄更早，表明维生素D可能与女性卵巢功能有关。抗苗勒氏管激素(AMH)、促卵泡激素(FSH)是参与卵泡发育的重要激素，二者与窦卵泡计数(AFC)均为反映卵巢储备功能的主要指标。国外研究[5]报道，补充维生素D能够明显提高AMH水平。但也有研究[6]认为，女性维生素D水平与AMH、AFC等指标不存在相关关系，缺乏维生素D并不会影响卵巢储备功能或者损害卵细胞。考虑到上述不同证据，为进一步明确维生素D与卵巢储备功能的关系，本研究以不孕女性为研究对象，分析维生素D水平对卵巢储备指标的影响。现作报道。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020年7月至2021年12月我院收治的不孕女性80例，纳入标准：(1)临床诊断为不孕症；(2)年龄20～41岁。排除标准：(1)合并内分泌代谢性疾病；(2)存在染色体异常；(3)有卵巢手术史；(4)有生育障碍家族史；(5)6个月内服用过维生素D补充剂；(6)6个月内接受过激素或促排卵治疗。

1.2 方法 (1)一般资料收集：查阅病人电子病历，记录病人体质量、身高、体质量指数(BMI)、年龄、不孕年限等相关资料。(2)血清25(OH)D3与基础内分泌指标测定：所有病人于月经第2～4天空腹抽静脉血2 mL，离心分离血清，-80 ℃保存。采用化学发光法检测25(OH)D3、AMH、FSH、雌二醇(E2)和促黄体素(LH)水平，使用罗氏cobas e 602化学发光免疫分析仪及配套试剂。(3)AFC测定：所有病人于月经后2～4 d采用超声彩色多普勒诊断仪(开立S12型)进行阴道超声检查，记录双侧卵巢直径2～9 mm的基础 AFC。

1.3 维生素D水平标准 参照北美内分泌协会《维生素D缺乏治疗及预防的临床实践指南》[7]：血清25(OH)D3<20 ng/mL为维生素D缺乏；20～30 ng/mL为不足；>30 ng/mL为充足。

1.4 统计学方法 采用χ2检验、方差分析和多元线性回归分析。

2 结果

2.1 不同维生素D水平不孕女性的相关指标比较 80例不孕女性中，维生素D缺乏26例(32.50%)，不足19例(23.75%)，充足35例(43.75%)。3组年龄、BMI、不孕年限、不孕原因和AMH、AFC、FSH等临床指标差异均无统计学意义(P>0.05)(见表1)。

表1 不同维生素D水平不孕女性的相关指标比较

2.2 不孕女性维生素D水平与AMH、AFC、FSH的相关分析 以AMH为因变量，25(OH)D3、年龄、BMI、不孕原因为自变量进行多重线性回归分析，结果显示，AMH与25(OH)D3水平、年龄、BMI、不孕原因均无明显相关关系(P>0.05)(见表2)。以AFC为因变量，25(OH)D3、年龄、BMI、不孕原因为自变量进行多重线性回归分析，结果显示，AFC与25(OH)D3水平、年龄、BMI均无明显相关关系(P>0.05)，与不孕原因呈负相关关系(P<0.05)(见表3)。以FSH为因变量，25(OH)D3、年龄、BMI、不孕原因为自变量进行多重线性回归分析，结果显示，FSH与25(OH)D3水平、BMI、不孕原因均无明显相关关系(P>0.05)，与年龄呈正相关关系(P<0.05)(见表4)。

表2 AMH与维生素D及其他因素的线性回归分析

表3 AFC与维生素D及其他因素的线性回归分析

表4 FSH与维生素D及其他因素的线性回归分析

3 讨论

维生素D可能参与女性生殖系统功能的调节，已有研究[8]发现，维生素D受体广泛分布于卵巢、子宫以及子宫内膜等组织中，在人类卵巢颗粒细胞的细胞核以及细胞质中均可检测到VDR，表明它可能在性激素合成与卵泡发育过程中起着一定作用。有研究[9]报道，维生素D可影响AMH信号通路，提高FSH敏感性，同时还可增加3β-羟基类固醇激素脱氢酶mRNA的表达水平，影响孕酮的合成与释放，表明维生素D可能参与卵泡生长与黄素化过程。维生素D还可增强芳香化酶活性水平，提高卵巢细胞中孕酮、雌激素、雌酮等多种激素水平[10]。维生素D3的活化形式1,25-(OH)2D3能够刺激人黄素化颗粒细胞合成更多的孕酮，从而改善子宫内膜环境，有利于胚胎着床[11]。1,25-(OH)2D3还通过影响子宫内膜基质细胞HOX基因(主要是HOXA10/11基因)的表达，从而调节子宫内膜的容受性，促进胚胎的种植[12]。但近期一项前瞻性研究[13]观察了283例不孕女性的维生素D与AMH、AFC水平，发现维生素D与二者并无相关性。鉴于女性维生素D水平对其生殖功能影响作用的不确定性，本研究回顾分析我院80例不孕女性的临床资料。

本研究结果显示，80例不孕女性中，维生素D缺乏或不足45例，占56.25%，表明维生素D缺乏或不足在不孕女性中发生率较高，应该引起重视。李施施等[14]研究报道不孕女性维生素D缺乏与不足高达87.86%，明显高于本研究，可能与不同研究的具体检测方法，或不同地区人群的生活习惯差异有关。本研究中多重线性回归分析结果显示，经调整年龄、BMI、不孕原因等相关混淆因素后，25(OH)D3水平与AMH、FSH、AFC指标均无明显相关，与DRAKOPOULOS等[13]研究结论一致。本研究中对维生素D水平与不孕症病因的相关性分析中显示，不同维生素D水平的3组病人卵巢储备功能下降比例无明显差异，进一步证实维生素D水平并非影响女性卵巢储备功能的因素。

有研究[15-16]认为，维生素D水平存在季节性差异。PEARCE等[17]以高加索不孕女性为研究对象，观察到夏季维生素D水平高于冬季，但AMH水平未出现明显的季节性变化，因此推测维生素D水平的季节性差异对女性卵巢储备功能影响不明显。AREFI等[4]研究则发现，印度女性病人中，维生素D不足可导致卵巢储备功能降低。上述研究结果的分歧可能与样本的种族不同，以及不同地区日照强度与时间差异有关。本研究由于样本较小，未能对不同季节维生素D的变化情况以及对卵巢功能的影响进行分析，还有待今后深入探讨。

综上，不孕女性病人维生素D水平与其卵巢储备功能不存在明显相关关系，这提示补充维生素D可能无法改善不孕女性的卵巢储备功能。但由于维生素D的生理作用不仅与其血清水平有关，还同时取决于VDR基因多态性等因素[18]。因此，关于维生素D对女性生殖系统功能的影响作用及其具体分子机制，还需进一步深入研究。