天南星-生姜药对的抗炎镇痛活性研究*

炎症过程引起的急慢性疼痛始终是困扰医学界的一个重大难题，激素和非甾体抗炎镇痛药 (non-steroid anti-inflammatory drugs, NSAIDs) 是慢性疼痛病人中使用最广泛的治疗方法之一。NSAIDs（如阿司匹林和吲哚美辛）通过抑制环氧合酶 (cyclooxygenase, COX) 来阻断前列腺素的生物合成途径，从而产生抗炎、镇痛和解热作用

。不良反应是目前限制NSAIDs 临床应用的主要原因。传统的NSAIDs会同时抑制组成型 (cyclooxygenase-1, COX-1) 和诱导型 (COX-2) 两种环氧合酶

，从而导致胃黏膜损伤、胃溃疡甚至出血。而激素类药物引起的全身反应等多重不良反应更使其备受争议。由于炎症性疾病和慢性疼痛综合征经常需要高剂量、长疗程服药，寻找具备满意镇痛抗炎效果和较小不良反应的药物是未来镇痛研究的一个重要方向，具有长远的战略意义。

祖国医学在治疗疼痛方面积累了宝贵的临床经验，但目前中医药镇痛研究不够深入，关注问题较少，挖掘祖国医学在治疗疼痛方面的优势显得极为重要。本课题组在临床中发现大剂量天南星-生姜药对内服在治疗疼痛方面具有显著的效果，并通过生物信息学基础证实了其确实具有镇痛作用

。基于此，本研究拟通过动物实验探究其抗炎镇痛效果。

天南星最早记载于《神农本草经》，是天南星科植物天南星、异叶天南星或东北天南星的干燥块茎。药典记载，天南星性温，味苦、辛，归肺、肝、脾经，具有祛风定惊、燥湿化痰、消肿散结的功能，可用于抗惊厥、镇痛、镇静、抗肿瘤、抗炎等方面

。与其配伍使用的生姜的主要作用是降低天南星的毒性并除去其辛辣刺激的味道。现代研究发现，天南星化学成分较为复杂，目前发现的主要化学成分包括生物碱类、凝集素类、苷类、甾醇类等

。其临床应用也相当广泛，可内服用于呼吸系统

、血液系统

、神经系统

等，外用做成膏剂后可用于各种慢性肌肉骨骼疼痛及风湿性疾病

。根据医书记载及目前临床用药经验发现，天南星-生姜通过加减及配伍可以对炎性疼痛等多种疼痛产生治疗作用，且作用时间持久，不良反应较少。但关于其镇痛作用的基础研究较少，其可能的作用机制尚不明确。因此，本研究通过二甲苯致小鼠耳郭肿胀法、角叉菜胶致大鼠足肿胀法、醋酸扭体实验及热板法来研究天南星-生姜药对抗炎镇痛活性，为其在炎性疾病中的应用提供一定的理论依据。

方 法

1.动物

SPF 级雄性ICR 小鼠160 只，体质量18～22 g；SPF 级雄性SD 大鼠50 只，体质量180～220 g，由维通利华实验动物技术有限公司提供 [许可证号：SCXK（京）2021-0006] 。所有的实验流程均保证了动物伦理和福利，并通过了中日友好医院实验动物医学伦理委员会审核(zryhyy21-21-09-01)。

2.实验药物与试剂

制天南星购于中日友好医院中药房，经中国中医科学院中药研究所鉴定为天南星科植物天南星的干燥块茎，符合中国药典2020年版一部的相关要求。天南星-生姜按1:1 比例，将所有药物浸泡1 h 后，水煎2 次，时间分别为90 min、60 min，合并两次滤液，水溶液蒸发，浓缩药液至每1 ml 含原生药材1 g；按照9 g/(kg·d)（临床等效剂量）进行灌胃。其余药品包括洛索洛芬钠（湖南九典制药股份有限公司，批号210510）、醋酸地塞米松片（浙江仙琚制药股份有限公司，批号20210611）、氨酚羟考酮（国药集团工业有限公司，批号0512C04369）、二甲苯（成都市科隆化工，批号20191011）、角叉菜胶（南京奥多福尼科技有限公司，批号101034）。

3.仪器

土地资源承载力一般是指一定地区的土地所能持续供养的人口数量，即土地资源人口载量，其实质是研究人口消费与食物生产、人类需求与资源供给间的平衡关系问题[19]。由于近年来农村居民点复垦在耕地补充以及促进农村可持续发展的重要性越来越明显，因此在区域农村居民点复垦分区研究中，进行土地资源承载力评价就显的十分必要。区域土地资源力越小，表明当地的人地矛盾越突出，通过农村居民点复垦增加耕地的需求越迫切，应进行优先复垦；相反，则进行适度复垦。

4. 方法

（1）抗炎活性实验：角叉菜胶致大鼠足肿胀：SD 大鼠48 只，称重后随机分为6 组，每组8 只，即空白组、模型组、阳性药物组和天南星-生姜高、中、低剂量组。空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃，每日1 次。阳性药物组给予醋酸地塞米松(1.2 mg·kg

)腹腔注射，天南星-生姜组分别给予天南星-生姜药液，高、中、低剂量依次为9、4.5、2.25 g/(kg·d)灌胃，每日1 次，连续7 天，在第7 天用数显测厚规测量各大鼠左后足跖的厚度，记录每只大鼠给予角叉菜胶前的足跖厚度。于末次灌胃给药后0.5 h，在空白组大鼠左后足跖处皮下注射0.9%氯化钠溶液0.1 ml，然后分别在其他组大鼠左后足跖处皮下注射1%角叉菜胶悬液0.1 ml 致炎。随后分别在皮下注射后0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h 测定左后足跖厚度并记录。

大多数地方的水利基础设施建设资金主要靠政府投入，没有充分研究如何利用市场和有效的机制来筹集。部分地区基层群众对社会办水利缺乏足够的认识。“三提五统”“两工”政策取消、政府公共财政投入的不足及“一事一议”制度的有限性，使农村急需的基层水利基础设施建设、管理与“三农”经济发展不相适应。国家投入为主、地方配套和受益群众自筹为辅的建设模式比较适合农田水利建设，但相当一部分群众对进行大规模农田水利建设的紧迫感不强，多数乡村无论是修建小农水工程、维修饮水安全工程或是排水渠道清淤等都等着国家投资，“谁受益、谁负担”的观念没有深入人心，既不出钱又不出工，“等、靠、要”的依赖思想占主导，影响了水利建设和管理。

（2）镇痛活性实验：醋酸扭体实验：取ICR 小鼠60 只，随机分为6 组，每组10 只，即空白组、模型组、阳性药物组和天南星-生姜高、中、低剂量组。空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃，每日1 次。阳性药物组给予洛索洛芬钠(19.5 mg·kg

)，天南星-生姜组分别给予天南星-生姜药液，高、中、低剂量依次为13、6.5、3.25 g/(kg·d)灌胃，每日1 次，连续用药3 天，于最后一次用药后1 h 各小鼠腹腔注射1%冰醋酸(10 ml·kg

)，5 min 后待小鼠行为稳定，观察并记录15 min 内小鼠扭体次数。计算药物的疼痛抑制率（其中用药组包括阳性药物组和天南星-生姜组）。

中医对疼痛的认识早在《内经》中便有记载，“经脉流行不止，环周不休，寒气入经而稽迟，泣而不行，客于脉外则血少，客于脉中则气不通，故卒然而痛”，在此基础上凝练出“不通则痛”以及“不荣则痛”的理论，并沿用至今。天南星具有燥湿化痰、软坚散结、祛风止痛等功效

，与“实则泻之”和“通则不痛”的治疗原则相符。现代药理学研究发现，制天南星中的均一多糖ARPA 和ARPB 具有明显的抗炎活性，可降低大鼠血清中的炎症因子，且模型中关节滑膜组织切片中免疫细胞数量和炎性浸润都明显减少

。而搭配了生姜之后，即缓和了天南星燥烈之性，也可以和胃降逆，调理脾胃。现代药理学研究发现，天南星的毒性主要源于其凝集素蛋白和毒针晶，而生姜中所含的姜辣素则可以拮抗天南星的毒性成分，同时还能发挥一定的抗炎、镇痛作用

。

PE34 型冷热板痛觉测痛仪（美国IITC Life Science）；BCE124-1CCN 电子天平（德国赛多利斯，精度0.01 mg）；YSHG30-5610 型数显测厚规（西安研硕仪器设备有限公司，精度0.003 mm）；其他设备包括注射器、灌胃针头、计数器、移液枪、打孔器、眼科剪、试管、煎药壶、镊子、药品研磨器等。

进行产业风险评价有助于合理分配信贷资源，优化信贷资源结构。根据产业风险的不同，对不同产业的信贷投放权重进行更科学地制定：对于风险较小、新兴高科及政策扶持力度较大的产业可以加大信贷资源投放力度，对于风险较大、产能矛盾较大的产业则加以控制，并考虑到产业间的联动性风险，对风险较易传播的产业的信贷投放加强管理和后续跟踪追进。这样在进行授信时合理分配信贷资源，优化信贷投放结构，从而提高改善银行信贷业务的收益。

5. 统计学分析

采用SPSS 23.0 软件进行统计分析，实验数据以均数 ± 标准差 (

±

) 表示。多组间计量资料进行两两比较时采用单因素方差分析，并检验数据是否符合正态性分布，随后用LSD 检验方差齐性，若方差不齐则用Dunnet T3 检验。其中角叉菜胶致足跖肿胀实验及热板试验采用单因素重复测量方差分析，若满足球形度检验，则可直接比较；若不满足，可通过Greenhouse-Geisser 校正。

＜ 0.05 为差异有统计学意义。

热板法：取ICR 小鼠，采用热板仪测定每只小鼠的痛阈值（受热后出现舔后足的时间），筛选出符合要求的小鼠共35 只（痛阈在5～30 s 内），然后随机分成5 组，每组7 只，即空白组、阳性药物组和天南星-生姜高、中、低剂量组。空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃，每日1 次。阳性药物组给予氨酚羟考酮(42.9 mg·kg

)，天南星-生姜组分别给予天南星-生姜药液，高、中、低剂量依次为13、6.5、3.25 g/(kg·d)灌胃，每日1 次，连续用药3 天，于末次用药后30 min、60 min、120 min分别测定小鼠的痛阈值，如果到60 s 仍无反应，按60 s 计算，并移开小鼠避免烫伤。

结 果

1. 抗炎活性试验

（1）角叉菜胶致大鼠足肿胀实验：天南星-生姜药剂对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响结果见表1。空白组注射0.1 ml 生理盐水后，可见左后足有轻微肿胀，模型组较空白组有明显肿胀(

＜ 0.05)，说明角叉菜胶致炎效果明显，模型建立成功。球形度检验结果显示(

＜ 0.05)，不满足球形度假设。经过Greenhouse-Geisser 校正后 (

＜ 0.01)，提示不同时间点测量的足跖厚度有差异(

= 1670.278,

＜ 0.01)，足跖厚度有随时间变化的趋势；时间与组别之间的交互作用有统计学意义(

= 116.628,

＜ 0.01)，说明不同组别的足跖肿胀程度随时间变化的趋势存在差异；组别之间比较差异也有统计学意义(

=40.818,

＜ 0.01)，说明不同的干预措施对各组足跖肿胀度的影响不同。

（2）二甲苯致小鼠耳郭肿胀实验：天南星-生姜药剂对二甲苯致小鼠耳郭肿胀的影响结果显示，模型组与空白组相比肿胀明显，空白组几乎无变化，说明二甲苯能有效的诱导小鼠耳郭肿胀。不同组之间两两比较的结果显示，与模型组相比，阳性药物组（洛索洛芬钠）与天南星-生姜高剂量组均能显著抑制小鼠耳郭肿胀(

＜ 0.01)，中剂量组与低剂量组与模型组也可以抑制小鼠耳郭肿胀(

＜ 0.05)；阳性对照组与天南星-生姜高剂量组相比差异无统计学意义，高剂量组较中、低剂量组相比，耳郭肿胀抑制更加明显（

＜ 0.01，见表2）。

足跖肿胀厚度在不同时间点以及不同组之间两两比较结果表明，与模型组相比，阳性药物组（地塞米松）在给药1 h 后可以明显抑制足跖厚度，且随后的时间里均能起效(

＜ 0.01)；天南星-生姜高剂量组在给药1 h 后能显著抑制大鼠足跖肿胀度（

＜ 0.01，见图1）。

草33区块处于构造高部，含水率较低，原始地层压力为12.3MPa，蒸汽吞吐4周期后，地层压力下降到6.5MPa。随着吞吐周期的增加，区块压力下降，亏空加大，边水将逐渐侵入［2］。为保持地层压力，抑制边水侵入，需要在该区块开展蒸汽驱。根据国内外经验，转驱压力5MPa左右效果最好。目前草33区块地层压力为5～6MPa，满足蒸汽驱压力要求。

例1～例5“非”修饰谓语，两部文献中“非”最多的就是此种用法，例6、例7“非”修饰数词，例8“非”也与“不”连用，构成双重否定，表肯定后更有强调意味，仅在《齐》中见2例。

其中,和分别是人为定义的QRS波向量环的起点和终点,分别指R波波峰前后大小为R波波峰70%的点;eT1表示最大T波电轴,SQRS(i)表示和间第i个QRS波电轴,∠(eT1,SQRS(i))表示eT1与SQRS(i)之间的夹角。

2. 镇痛活性实验

（1）小鼠扭体试验：由实验结果可知，与模型组相比，阳性药（洛索洛芬钠）组动物的扭体次数明显减少(

＜ 0.01)，天南星-生姜高、中、低剂量组与模型组相比，小鼠扭体次数均明显减少(

＜0.01)；高剂量组与洛索洛芬钠组相比，两者对小鼠扭体次数的抑制效果未见明显统计学差异。从各给药组扭体抑制率来看，阳性药物组的扭体抑制率是最高的，达到61.4%；其次为天南星-生姜高剂量组，为55.1%；中剂量组与低剂量组的扭体抑制率较低，分别为28.3%和26.5%。说明天南星-生姜对冰醋酸所致小鼠扭体的抑制效果存在剂量依赖性，随着药物浓度的提高，其作用效果也会增强（见表3）。

（2）小鼠热板试验：天南星-生姜对热板致痛的镇痛作用结果见图2，在给药0.5 h、1 h、2 h 三个时间点变化一致，结果均显示阳性药物组可明显提高小鼠痛阈值。但高、中、低剂量组与空白组相比，差异无统计学意义，说明天南星-生姜不能有效抑制热板引起的热痛觉。

讨 论

疼痛抑制率 =（模型组扭体次数-用药组扭体次数）/空白组扭体次数 × 100%。

二甲苯致小鼠耳郭肿胀：ICR 小鼠60 只，称重后随机分成6 组，每组10 只，即空白组、模型组、阳性药物组和天南星-生姜高、中、低剂量组。空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃，每日1 次。阳性药物组给予洛索洛芬钠(19.5 mg·kg

)，天南星-生姜组分别给予天南星-生姜药液，高、中、低剂量依次为13、6.5、3.25 g/(kg·d)灌胃，每日1 次，连续3 天，在第3 天末次用药后1 h，于空白组小鼠的右耳正反两面各滴20 μl 蒸馏水，其余小鼠右耳正反两面各滴同等剂量的二甲苯致炎，所有小鼠左耳均不做处理，作为自身对照。1 h 之后，颈椎脱臼处死小鼠，迅速剪下小鼠双耳的对称部位，并沿边缘相同区域用打孔器打下9 mm 耳片并称重，计算肿胀度。肿胀度 = 右耳耳片重量-左耳耳片重量。

为了探究天南星-生姜抗炎镇痛的机制，本研究选择二甲苯致小鼠耳郭肿胀实验及角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验来研究其抗炎活性。角叉菜胶致大鼠足跖肿胀是一种公认的急性炎症实验模型。该模型对于评估通过干扰炎症介质而发挥抗水肿的化合物具有重要的预测价值

。将角叉菜胶注射到大鼠足跖部后，会导致组织液和血浆蛋白渗出增加，中性粒细胞外渗，花生四烯酸通过环氧合酶和脂氧合酶途径代谢，最终引起炎症和水肿

。有研究认为这种过程可细分为三个阶段。在早期（约前90 min）主要是组胺和5-羟色胺的释放；在中期(90～150 min)主要改变为激肽介导的炎性反应；

最后阶段（180 min 后）则主要由前列腺素所介导

。实验的结果显示，天南星-生姜药剂在前中期能对肿胀有较好的抑制作用，提示其可能是通过抑制组胺和5-羟色胺的合成或释放达到抑制肿胀的效果。而二甲苯作为常用致炎试剂，可以诱导组胺、激肽等炎性介质的释放，从而导致局部毛细血管通透性改变，出现炎性水肿

。本研究结果提示高剂量天南星-生姜药剂可以产生略优于经典非甾体抗炎药洛索洛芬钠的抗炎作用，其作用机理可能和非甾体抗炎药类似，通过抑制组胺等炎性介质的合成或释放达到抗炎的目的。根据上述两个炎性动物模型的实验结果可以发现，天南星-生姜药剂具有良好的抗炎作用，且随着剂量的增加，其抗炎能力逐渐增强。其物质基础可能是天南星及生姜含有的大量甾醇类化合物如β-谷甾醇、甘露醇、豆甾醇等

。

一是研究制订更加有效的政策，扶持“金属表面无磷处理”“中水回用”“再生水、雨水综合利用”等项目，以发挥示范项目的作用；二是通过 “多水源、多用户的优化配置”等方面研究，进一步加强水资源管理能力；三是继续加大农村供水管网改造力度，2014年将完成城区及乡镇26个村的老旧供水设施的改造,将农村供水管网漏损率降低到22%；四是加快实施居民自来水阶梯水价制度，创建一批节水型示范机关、学校、企业、医院、居民小区；五是加快新建、扩建4个集镇污水处理厂，将全市的污水日处理能力从现在的9.5万t提高到22万t。

镇痛药物按照其作用部位和机制可以分为中枢神经系统镇痛药和外周神经系统镇痛药。本研究因此选择了两种不同的疼痛动物模型，以明确天南星-生姜潜在的外周或中枢镇痛作用。冰醋酸扭体作为内脏痛动物模型，是一种敏感度较高且能揭示药物在一定剂量下的外周镇痛能力的方法

。实验结果表明，天南星-生姜药剂可以明显减少冰醋酸所致小鼠扭体的次数，且一定范围内药物浓度越高扭体次数越少。研究表明，小鼠出现扭体与机体对前列腺素敏化有关

，因此可以推断出天南星-生姜可能通过抑制前列腺素合成从而达到外周镇痛的作用。众所周知，非甾体抗炎药通常不会提高正常机体的痛阈，而麻醉类药品（如吗啡等）中枢镇痛药则可以

。研究表明，热刺激产生的疼痛是由中枢介导的

。在热板实验中，药物对跳跃或舔足反应潜伏期的影响代表了药物对中枢系统的镇痛作用。热板试验结果表明，天南星-生姜药剂对小鼠痛阈值较模型组有所提高，但整体提高并不显著。随药物作用时间的增加，小鼠痛阈值略有增加，但考虑到反复测试很可能使小鼠对热刺激表现出一定的适应性，药物效果随时间的量效关系可忽略不计。由此可见天南星-生姜并非中枢起效的镇痛药物。

本研究属于对天南星-生姜药对抗炎镇痛的初步探究，在接下来的深入实验中，本课题组将从分子生物学、病理学、免疫学角度探究该药对对主要炎症因子、炎性细胞浸润的影响，同时明确其安全性。并试图探究其对特殊类型疼痛的治疗机制，为最终探索出某类疼痛特效药物而努力。本实验通过临床大剂量天南星-生姜药对治疗疼痛病人显效后，采用动物实验方法初步验证了其抗炎镇痛的疗效，遵循了基础科研为临床服务的原则，首次探究了大剂量天南星-生姜药对在抗炎镇痛的作用，为进一步的机制和相关成药研究奠定了坚实的基础。

综上所述，天南星-生姜药剂可以抑制角叉菜胶所致足跖肿胀及二甲苯诱发的耳郭肿胀，同时可以减少冰醋酸所导致的小鼠扭体次数，表明天南星-生姜药剂具有明显的抗炎及外周镇痛效应，且存在一定的剂量依赖性。

利益冲突声明：作者声明本文无利益冲突。

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