许崇友 韩勇
(1.山东省日照市东港区动物疫病预防控制中心,山东日照 276800;2.山东省日照市动物疫病预防控制中心,山东日照 276800)
鸡白痢是由鸡白痢沙门氏菌引起的鸡细菌性疫病,在鸡群中广泛存在[1-2]。鸡白痢沙门氏菌感染可造成雏鸡严重白痢,有的呈急性败血症,发病率和死亡率较高。成年鸡感染后多呈慢性或隐性感染,可长期带菌[3]。鸡白痢既可水平传播,也可垂直传播,不仅给家禽养殖业带来严重危害和经济损失[4-5],而且威胁到畜产品质量安全和公共卫生安全[6]。目前,国内规模鸡场鸡白痢感染水平较高,2017—2019 年李照伟等选取31个规模化鸡场抽检1340 份鸡血清样品,采用鸡白痢抗体平板凝集试验,结合鸡场生物安全措施及净化情况,开展了鸡白痢血清学调查,结果显示,鸡白痢平均场群阳性率为83.87%,个体阳性率为13.43%[7],感染情况严重。
日照市家禽种业丰富,既有日照麻鸡优良地方品种,又有白羽肉鸡等引进品种,鸡白痢净化难度较大。为了解日照市日照麻鸡和白羽肉鸡的鸡白痢流行状况,为净化提供技术支撑。本研究对全市种鸡场和规模场开展了基础调查,建立了全市抽样框。对鸡场分类建立档案,每个场建立净化方案,推进鸡白痢净化工作。自2017—2021 年连续开展鸡白痢流行病学调查,采用流行病学采样方式,对全市的原种鸡场、祖代场、父母代和规模场进行抽样检测,掌握了鸡白痢的流行状况。
依托胶东半岛和山东省高致病禽流感无疫区建设,对全市禽场进行摸底调查,对种鸡场、规模鸡场和养鸡户建立抽样框。
根据建立的抽样框,将全市鸡场按照原种、祖代、父母代、商品代进行建档,原种和祖代场群全部抽样,商品代场随机抽样。场群确定后群内采用流行病学抽样方式,由于采用实验室检测,考虑检测方法的敏感性,即检测到阳性动物,按照中国动物卫生与流行病学中心设计的Epi Sampling Calculator 软件,以估计流行率的抽样方法进行抽样检测,抽样样本量计算公式[8]为:
式中n 为抽样个数,CL 为置信水平,D 为群中的阳性动物数(等于群内个体数与预定流行率的乘积),N 为群内个体数,Se 为检测方法的敏感性。
每个场点按照群内阳性率10%,置信水平95%,每个场点随机抽样30 份。由于原种场阳性率较低,扩大了抽样数量,每个场随机抽样100 份。
2017—2021 年,在日照市采集20 个鸡场样品进行检测,其中包括原种鸡场2 个、祖代/父母代场6 个、商品代场12 个,采样情况见表1。
表1 日照市种鸡场和规模场采样情况
平板凝集试验抗原及阳性、阴性血清购自哈尔滨国生生物科技股份有限公司。生物安全柜购自新西兰公司,超纯水纯化系统(Cascada)购自美国PALL 公司,移液器购自Eppendorf公司。
1.4.1 样品采集用酒精棉球或碘酒进行消毒后,用针头刺破鸡的肱静脉、鸡翅静脉或冠尖,用移液器或针管取血适量进行试验。
1.4.2 检测方法
用移液器吸取抗原0.05mL,垂直滴于玻板上,然后取血0.05mL,与抗原混合均匀,并涂散至直径2cm 的液面,2min内判定结果。发生50%(++)以上凝集者为阳性,不发生凝集者为阴性,介于上述两者之间者为可疑。同时设阳性、阴性血清对照,分别滴加抗原混匀,在2min 内,阳性血清应出现凝集,阴性血清应不凝集。
2017—2021 年,连续对全市20 个种鸡场开展监测,其中日照麻鸡场9 个,白羽肉鸡11 个。结果显示,经过多年持续的净化,鸡白痢总体感染率呈明显下降趋势,但部分祖代和父母代鸡场阳性率仍较高,仍需继续坚持净化。
2017—2021 年,对9 个日照麻鸡场和11 个白羽肉鸡场进行监测,鸡白痢群体阳性率和个体阳性率呈明显下降趋势,净化成效显著。但日照麻鸡的感染情况较白羽肉鸡严重,提示应需继续加强净化力度。
经过多年的监测净化,日照麻鸡原种场在2021 年未检测出鸡白痢,净化成效明显,但日照麻鸡祖代/父母代、商品代场的阳性率仍较高,个体阳性率均超过5%,感染情况不容乐观。白羽肉鸡的鸡白痢感染情况较日照麻鸡轻,但商品代场的个体阳性率也接近5%,感染情况也较严重(见表2、表3)。
表2 2017—2021 年日照麻鸡和白羽肉鸡群体阳性率检测情况
表3 2017—2021 年日照麻鸡和白羽肉鸡个体阳性率检测情况
鸡白痢既可水平传播,也可垂直传播,其中垂直传播方式随种群繁育会造成病原扩散,造成危害扩大的继代效应。因此,种禽场的净化显得尤为重要。日照市种禽场品种资源丰富,既有地方优良品种日照麻鸡,又有白羽肉鸡等引进品种,鸡白痢净化任务难度较大。为做好日照市鸡白痢净化工作,2017—2021 年课题组采用流行病学抽样方式,考虑检测方法的敏感性,以估计流行率的抽样方法,抽检20 个养禽场开展净化监测。结果表明,日照市鸡白痢总体感染率呈明显下降趋势,表明净化成效显著。但部分祖代和父母代鸡场阳性率仍较高,尤其是日照麻鸡的祖代和父母代场阳性率较高,仍需继续加大净化力度。
日照麻鸡是山东省地方优良品种,抗病力强、耐粗饲、肉质风味好、产蛋多,属肉蛋兼用型品种,深受广大消费者的欢迎。1978 年,被列为山东地方家禽良种,2009 年被山东省畜牧兽医局列入《山东省畜禽遗传资源保护名录》[9]。日照市政府高度重视日照麻鸡的保种和推广工作,投入大量资金用于日照麻鸡核心群的发展建设,目前日照麻鸡存栏原种5000 余只,祖代鸡3 万套,年产父母代鸡苗100 万套,配套品种接近20 个。20 世纪八九十年代,由于外来品种的引进和杂交改良,日照麻鸡感染鸡白痢的病例报道逐渐增多,净化工作刻不容缓。本次监测也发现日照麻鸡的鸡白痢感染率比白羽肉鸡要高,尤其祖代/父母代、商品代场的个体阳性率均超过5%,在今后的净化工作中要加强种源净化,尽早解决鸡白痢对日照麻鸡这一优良地方品种的威胁,达到国家净化标准。
鸡白痢不但可以垂直传播,也可以水平传播,因此,在做好种源净化的基础上,还应在孵化期间减少种蛋在孵化过程中污染风险,同时在运输期间加强消毒灭源,在饲养环节中强化人员、物资、笼具、饮水、饲料的管理以及消毒灭源等风险环节的管控[10]。