Rh血型主要抗原配合性输注的可行性研究及效果分析

李 莺，朱永亮，许进明，王雨潇，周小玉

南京医科大学第一附属医院输血科，江苏 南京 210029

截至2021年2月，经国际输血协会研究确认的人类红细胞表面表达的血型抗原系统共有43 种。在众多血型系统中，ABO血型系统的抗原最强且天然存在缺失抗原对应的抗体，是输血前相容性检测最重要的部分。而恒河猴（Rhesus，Rh）血型系统抗原表位众多、复杂，其在临床输血中的重要性仅次于ABO血型系统，具有重要的临床意义。截至2021年2月，国际输血协会确认的Rh血型系统抗原达55个，其中主要的五抗原即为D、C、E、c、e。与ABO 血型系统不同，Rh 血型系统很少存在天然抗体，其产生的抗体多为经输血或妊娠的免疫性刺激而产生的IgG 型血型抗体，临床输血中产生的不规则抗体多为Rh 系统的血型抗体［1］。Rh 血型系统抗原免疫原性强，由Rh 血型不合的输血或妊娠产生的Rh 血型抗体有可能导致严重的溶血性输血反应或新生儿溶血病［2］。故此，重视Rh血型系统，有效减少Rh血型抗体的产生机会、避免Rh血型系统抗原与抗体反应给临床输血带来的不良反应和困扰，是大势所趋。对输血患者常规检测Rh 系统五抗原表型及进行Rh 血型配合性输血是保障精准输血及患者安全的重要基础。本研究针对南京医科大学第一附属医院已开展的对患者及献血员的Rh 血型表型检测及配合性输注工作进行总结，为精准安全输血积累基础。

1 对象和方法

1.1 对象

献血员及患者Rh血型D、C、E、c、e抗原检测采用微柱凝胶法，由全自动血型分析仪（无锡中济万泰生物医药有限公司）完成检测并读取、分析、储存结果。Rh 血型鉴定卡（批号：201912008、202002006、202004004、202005005、202006008、202007008、202009006、202010006、202010014、202011001、202101008、202103001、202103014，无锡中济万泰生物医药有限公司）；IgM抗⁃D单克隆抗体试剂（批号：20191810、20201810，上海血液生物医药有限责任公司）；IgG 抗⁃D 单克隆抗体试剂（批号：20200102、20210420，无锡中济万泰生物医药有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 一般资料获取

全自动血型分析仪检测献血员及患者Rh 血型抗原，获得的结果均由仪器直接传输至南京医科大学第一附属医院自主研发的临床输血信息管理系统，通过此系统回顾性统计分析本研究所有Rh血型抗原表型结果。126 782 例中江苏省血液中心发往南京医科大学第一附属医院的献血员32 872 例，本院患者93 910 例（其中男性患者51 651 例，女性患者42 259 例，年龄15～97 岁）。RhD 阴性献血员RhD 阴性确证试验由江苏省血液中心完成，RhD 阴性患者经RhD 阴性确证试验认定为RhD 阴性血型。本研究得到了南京医科大学第一附属医院医学伦理委员会的批准（2022⁃SR⁃187），所有输血患者均签署了知情同意书。

1.2.2 Rh血型配合性输注方案

来自江苏省血液中心的献血员红细胞入库后完成献血员Rh血型检测，并将结果输入临床输血信息管理系统的献血员库存信息中，献血员血袋信息中自动标示出其Rh 血型分型结果。所有入院患者根据开立医嘱均检测ABO 及Rh 血型，结果自动输入临床输血信息管理系统。对本院择期手术备血及治疗输血均在完成常规输血前相容性检测的基础上进行Rh配合性输注。

1.3 统计学方法

以Hardy⁃Weinberg平衡定律评价Rh血型分布，计算方法见参考文献［3］。计算基因频率及单倍体频率采用参考文献［4］的方法。率的比较采用卡方检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Rh血型表型分布

南京地区Rh 血型表现型共检出15 种，献血员血型12 种，患者血型15 种。主要分布表型两者之间无差异（P＞0.05），DCCEE、ddccee、ddCcee、ddc⁃cEe、ddCcEe、ddccEE等表型患者人群较献血员分布多（P＜0.05）。126 782 例Rh 血型总计分布最多为DCCee（42.274%），其次为DCcEe（35.705%），DCcee（9.010%），DccEE（7.562%）。分布符合Hardy⁃Wein⁃berg 定律。DCCEE 为较罕见表型，共检出7 例（0.006%），全部为患者人群。主要常见的Rh 表型中，患者及献血者人群中未见差异（P＞0.05），而在部分罕见表型中，患者与献血者之间存在差异，如DCCEE、ddccee、ddCcee、ddccEe、ddCcEe 及ddccEE等（P＜0.05，表1）。

表1 126 782例Rh血型表型分布 ［n（%）］

2.2 Rh血型D、C、c、E、e抗原频率及基因频率

南京地区126 782例Rh血型主要五抗原频率及基因频率如表2、3 所示。其中D 抗原频率99.57%（126 243/126 782）＞e 抗原频率92.18%（116 873/126 782）＞C抗原频率88.03%（111 610/126 782）＞c抗原频率57.06%（72 347/126 782）＞E 抗原频率48.00%（60 855/126 782）。D 基因频率为93.48%，C基因频率为65.48%，c基因频率为34.52%，E基因频率为27.90%，e 基因频率为72.09%。患者及献血员Rh主要抗原频率及基因频率均无差异（P＞0.05）。

表2 126 782例Rh血型D、C、c、E、e抗原频率（%）

表3 126 782例Rh血型D、C、c、E、e基因频率（%）

2.3 126 782例Rh血型单倍型频率及比较

南京地区Rh 血型单倍体频率DCe 最高为63.69%，最低为dCE为0，与文献报道的我国上海及山东地区［5］、沈阳地区［5］及邢台地区［6］基本一致（表4）。

表4 126 782例Rh血型单倍型频率及比较（%）

2.4 Rh血型配合性输注效果分析

在检测患者及献血员Rh主要抗原的基础上，对择期手术患者及治疗用血患者均给予Rh 配合性输注（主要抗原同型或相容）。2020 年1 月—2021 年5 月共完成12 569 例患者27 889 例次输注红细胞，共输注红细胞62 118.5 U。经Rh 血型配合性输注，2020 年1 月—2021 年5 月抗体阳性357 例，Rh 系统抗体阳性108 例，Rh 系统抗体阳性占比为30.25%；与往年同期（2018 年1 月—2019 年5 月）未经Rh 血型配合性输注相比（12 335 例患者27 855 例次共输注红细胞65 949.5 U），抗体阳性408例，Rh系统抗体阳性198例，Rh系统抗体阳性占比为48.53%（表5）。Rh系统抗体阳性率显著下降（P＜0.05）。108例Rh系统抗体阳性构成为抗E 45 例（41.7%），抗D 9 例（8.3%），抗C 9例（8.3%），抗c 24例（22.2%），抗e 4例（3.7%），抗cE 12例（11.1%），抗Ce 5例（4.6%）。

表5 Rh血型配合性输注效果分析

3 讨论

在临床输血中，由于ABO以外的血型不合导致的溶血反应是严重输血不良反应［7］，而Rh血型系统重要性仅次于ABO 血型系统［8］。Rh 血型系统的不规则抗体可导致迟发性溶血反应，也与新生儿溶血病密切相关［9］。因此重视Rh 血型系统的抗原抗体检测在输血工作中不容忽视。Rh 血型系统主要抗原表型因地域、人种存在分布差异，本研究以南京地区献血员与患者共计十万余人的Rh血型检测结果进行统计分析，探求本地区Rh配合性输注的可行性基础及已有效果分析，为精准输血积累基础。

检测本地区Rh 血型主要抗原发现，Rh 血型表型分布最多为DCCee（42.274%），其次为DCcEe（35.705%），这与国内多个报道结果一致。126 782例Rh血型共检出15种表型，ddCCEE、ddCCEe及ddCcEE这3种表型未检出，可能原因为Rh阴性患者例数不多。患者人群与献血员人群主要表型分布无差异，几种较为罕见的表型DCCEE、ddccee、ddCcee、ddccEe、ddCcEe、ddccEE 等患者人群中检出多，主要原因可能为患者人群例数大于献血员例数。本研究检出Rh表型分布符合Hardy⁃Weinberg 分布规律，患者人群与献血员主要分布的表型并无差异，这是保障临床Rh 血型配合性输注可行性的重要基础。本研究在获得Rh 表型的基础上进一步计算了主要抗原（D、C、E、c、e）频率及基因频率和单倍体频率，所得结果与国内已有报道基本一致，符合我国华东地区情况。与已有报道的世界范围的其他人种相比，还存在差异［10-11］。

在没有实行Rh系统同型输血的患者中，产生的抗体40%～50%来源于Rh 系统［12-13］。在C、c、E、e 抗原引发的抗体中，抗⁃E 最为常见，其次为抗⁃c。抗⁃E、抗⁃c 抗体产生的几率在中国人群中预期都要高于抗⁃D［14］，本研究结果与之一致，Rh 抗体中抗⁃E 最高，抗⁃c 次之。按照本研究计算，如RhD 阳性患者高频表型CCee 需要反复输血时，给予Rh 随机输注则分别有57.06%及48.00%可能接触到c、E 抗原。一旦患者产生抗体，对高频表型来说，寻找与自身表型相同的血液相对容易，但低频表型如ccEE，甚至更为少见的CCEe或CCEE，则比较困难。所以预先检测患者及献血员Rh 血型表型，将血液合理分配，不仅可减少盲配造成的无效劳动，更能保证患者安全精准输血［15］。本研究检出DCCEE 表型共7例，此表型非常少见，均为患者中发现，对于这类Rh表型非常罕见的患者给予同型或相合血液输注或许很难，但如果优先规避会产生高频抗体的抗原，避免患者接触自身没有但存在率较高的抗原，也有重要意义。

南京医科大学第一附属医院自2020年初至今，在同时检测献血员及患者Rh 表型的基础上开展了Rh 血型系统主要五抗原同型或配合型输血。与往年同时间段相比，Rh 血型配合性输注后，患者不规则抗体阳性例数及Rh 血型系统抗体阳性比例均下降，说明Rh血型系统的配合性输注可以减少不规则抗体的产生，提高红细胞输注的安全性和有效性，能够减少输血不良反应［16］。尽管已获得以上较好的结果，但Rh 血型系统抗体比例仍达30%左右，这可能由于患者有既往或者外院输血史，已输注Rh抗原不相合的红细胞，且产生抗体。对于这类已产生抗体的患者，应给予Rh 同型且配血相合的红细胞，即便体内抗体效价随时间推移而减退，也应避免接触对应抗原。所以，在更大范围内持续推进Rh主要抗原配合性输注，减少人群中Rh血型系统的抗体十分必要且意义深远。