宫颈癌组织中S100P、VEGF及E-cad的表达水平及意义

张镇健

信宜市人民医院 病理科，广东 茂名 525300

0 引言

近年来，宫颈癌发病年龄有年轻化趋势，作为妇科常见的恶性肿瘤，严重威胁女性生命健康，随着宫颈细胞学筛查的普遍应用，宫颈癌的发病率和死亡率均得到有效控制。而恶性肿瘤的发生、发展和转移是不可控的，诱发因素复杂多样，有研究表明，恶性肿瘤的不同发展阶段，不同蛋白表达协同作用，促使疾病的进一步发展[1]。S100P可对恶性肿瘤生长、增殖情况进行调控，在多种肿瘤组织中均呈现高表达水平[2]，VEGF是刺激血管生长的重要细胞因子，与肿瘤的发生、发展密切相关，近年来逐渐成为恶性肿瘤治疗的靶点[3]，E-cad则普遍存在于各种上皮细胞，增加细胞间粘附作用，从而抑制恶性肿瘤细胞浸润转移[4]。为进一步促进临床医务工作者对宫颈癌疾病分期的精准判断，辅助治疗方案的制定与选择，本研究通过比较宫颈癌患者和正常人员宫颈组织中各指标表达水平及分析其表达水平和宫颈癌临床病理特征关系，旨在研究宫颈癌组织中S100P、VEGF及E-cad的表达水平及意义，为临床宫颈癌诊断及疾病分期、发、浸润等判断提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年8月-2020年5月信宜市人民医院收治的宫颈癌患者65例为研究组，按疾病分期分为Ⅰ期组（33例）和Ⅱ期组（32例），其中Ⅰ期组年龄为33～56岁，平均（52.17±3.26）岁，孕次1～2次，平均（1.5±0.4）次；Ⅱ期组32～55岁，平均（51.64±3.43）岁，孕次1～2次，平均（1.6±0.3）次。并选取同期健康体检志愿者30例为对照组，年龄为34～57岁，平均（51.75±3.93）岁，差异无统计学意义（P＞0.05）。

纳入标准：①研究组患者经宫颈刮片细胞学检查、宫颈活组织检查等检查结合临床症状确诊为宫颈癌，符合相关诊断标准[5]，分期标准参考国际妇产科联盟FIGO分期方法[6]；②无其他重要组织器官严重损伤；③初次以癌症相关疾病入院；④意识清楚，无认知障碍或精神疾病；⑤患者及其家属了解研究内容并签署知情同意书。排除标准：①伴有其他妇产科相关疾病；②曾接受过放疗、化疗等；③处于妊娠期、经期或哺乳期。本研究经本院伦理委员会审核批准。

1.2 检测方法及结果判断

①S100P表达水平检测：取宫颈组织切片放于无菌干燥玻片，滴加3%过氧化氢，于35℃左右孵育5min，再使用蒸馏水、PBS冲洗，干燥后滴加S100P抗体，37℃孵育4h后滴加二抗再孵育30min，最后DAB染色，镜下观察显色状况，200倍光镜下选择视野，双盲法判断，发现胞浆及细胞核黄染者视为阳性；②VEGF表达水平检测：切片标本于酒精、二甲苯脱水后置于枸橼酸钠中加热，过氧化氢孵育，滴加VEGF单克隆抗体作为一抗、生物素标记的羊抗鼠IgG为二抗，镜下观察细胞质内出现黄色或者棕褐色颗粒时则判定该结果为阳性；③E-cad表达水平检测：取宫颈组织切片，已知阳性片为阳性对照，标本固定、封闭、干燥、孵育、染色均严格按照试剂盒说明书执行，镜下观察细胞-细胞交界处呈黄色或棕黄色染色，或围绕细胞膜呈线性较强棕黄色染色为阳性。

1.3 统计学分析

本研究所收集数据均采用统计学软件SPSS 19.0进行计算与分析，年龄等计量资料采用（）表示，采用独立样本t检验；计数资料以百分率（%）表示，采用χ2检验；多因素分析采用Logistic多因素回归分析，均以P＜0.05为差异显著或具有统计学意义。

2 结果

2.1 3组人员宫颈组织中S100P、VEGF及E-cad表达比较

Ⅱ期组患者宫颈组织中S100P阳性表达率56.25%＞Ⅰ期组30.30%＞对照组16.67%，Ⅱ期组患者VEGF阳性表达率62.50%＞Ⅰ期组36.36%＞对照组13.33%，Ⅱ期组患者E-cad阳性表达率为18.75%＜Ⅰ期组45.45%＜对照组93.33%，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 3 组人员宫颈组织中S100P、VEGF 及E-cad表达比较[n(%)]

2.2 宫颈癌组织中S100P、VEGF及E-cad表达水平与疾病临床病理特征关系

不同年龄患者宫颈癌组织中S100P、VEGF及E-cad阳性表达率比较差异无统计学意义（P＞0.05），分化程度、淋巴结转移和FIGO分期的宫颈癌组织中S100P、VEGF及E-cad阳性表达率比较差异具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 颈癌组织中S100P、VEGF 及E-cad 表达水平与疾病临床病理特征关系[n(%)]

2.3 宫颈癌疾病分期影响因素分析

Logistic多因素回归分析显示：发生淋巴结转移、S100P、VEGF表达阳性和E-cad表达阴性均为影响宫颈癌分期的独立影响因素（P＜0.05），见表3、表4。

表3 宫颈癌疾病分期的单因素分析

表4 宫颈癌分期的多因素分析

3 讨论

研究发现胞外S100P表现出对多种细胞有多重作用，其在多种恶性肿瘤中高阳性表达，促进癌症分布、侵袭，但部分研究发现S100P在胃部恶性肿瘤中表达水平却明显下调倾向，表现为抑制胃部肿瘤生长[7-8]。VEGF是目前已知最常见的促血管因子，在肿瘤细胞中通过促进肿瘤周围及内部血管内皮细胞产生，使肿瘤血管新生，提供病变组织足够营养，加快疾病进程[9]。E-cad属于钙依赖性跨膜糖蛋白，可通过维持细胞间质粘附能力减少肿瘤细胞扩散[10]。早期宫颈癌常无明显症状和体征，轻微病变部位仍光滑较难与宫颈柱状上皮异位鉴别，而疾病的早期鉴别诊断有助于疾病早治疗以提高预后情况[11-12]。

本研究通过对比正常宫颈组织和宫颈癌组织S100P、VEGF及E-cad表达水平，结果显示，宫颈癌组织中S100P、VEGF及E-cad表达阳性率远高于正常宫颈组织，表示S100P、VEGF及E-cad表达水平检测可作为宫颈癌辅助诊断方式，疾病早期症状轻微，难以鉴别，通过上述蛋白表达水平检测可进一步为临床诊断提供依据。本研究结果还显示分化程度、淋巴结转移和FIGO分期的宫颈癌组织中S100P、VEGF及E-cad阳性表达率比较差异具有统计学意义（P＜0.05），且S100P、VEGF及E-cad表达水平均为影响宫颈癌分期的独立影响因素（P＜0.05），表示通过检测上述表达水平可辅助患者疾病分期，为之后治疗方式的选择提供重要指导价值。当检测发现病变部位E-cad表达水平阳性率显著减少，则提示其病变部位上皮细胞出现功能障碍，细胞间粘附性下降，警惕出现癌症细胞的脱落、转移[13]。在肿瘤缺氧环境中，表达水平较高的VEGF与低氧元件相结合，使VEGF蛋白翻译转录不受抑制，周围血管新生速度增加，促进肿瘤生长浸润，检测病变部位出现高表达的VEGF蛋白，提示肿瘤发展迅速，处于晚期[14-15]。临床治疗可通过增加E-cad合成以增强其对宫颈部位上皮细胞的调节和对肿瘤扩散的抑制情况。

综上所述，检测宫颈癌组织中S100P、VEGF及E-cad表达水平，可辅助判断临床疾病的浸润、发展等情况，可作为宫颈癌疾病分期的判断指标，并有助于后期治疗方式的制定。