妊娠期高血压疾病患者血清硒及内皮祖细胞检测的意义及与妊娠结局的关系

李 丽,张艳赏,郑 雅

(河北省人民医院,河北 石家庄 050051)

妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy，HDCP)是妊娠20周后常见的并发症之一，孕妇临床表现为头痛、头晕、血压升高、蛋白尿、昏迷、抽搐等，对孕妇和胎儿造成不利影响。HDCP的发病可能与遗传、免疫、营养成分缺乏、胎盘缺氧缺血、氧化应激等因素有关[1]，HDCP孕妇一般伴有血管内皮细胞功能障碍，血管内皮细胞损伤，而血管内皮生长因子(VEGF)有利于修复血管内皮细胞[2]。微量元素作为人体必需的金属元素，参与机体新陈代谢，其中微量元素硒作为谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活化中心，可调控GSH-Px活力，而GSH-Px又可使过氧化氢(H2O2)还原至H2O，从而清除H2O2，减轻氧化应激所致的血管内皮损伤，故机体微量元素含量可能与妊娠结局有关[3-4]。本研究以健康孕妇为对照，观察了HDCP孕妇体内微量元素硒及VEGF、外周血内皮祖细胞变化情况，分析了这些指标与不良妊娠结局的关系，旨在为临床早期诊疗HDCP及预测妊娠结局提供参考。

1 资料与方法

1.1纳入和排除标准

1.1.1HDCP孕妇 纳入标准：①符合HDCP诊断标准；②无语言沟通障碍；③临床资料完整。排除标准：①具有高血压、糖尿病等疾病史者；②严重的心肝肾功能障碍者；③甲状腺功能亢进者；④伴有免疫系统、血液系统疾病者。

1.1.2正常妊娠孕妇 纳入标准：①无饮酒、服药及长期吸烟史；②无肝、心、肾等重要脏器功能障碍；③无自身免疫系统疾病及家族遗传史；④无阴道出血、胎盘前置及早剥等并发症；⑤近期无急慢性感染病史；⑥无高血压、糖尿病、蛋白尿。

1.2一般资料 选取2016年10月—2018年10月在河北省人民医院产科门诊就诊的HDCP孕妇60例为HDCP组，另取同期就诊的正常妊娠孕妇60例为正常组，2组孕妇孕周、年龄、孕次及BMI比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。见表1。本研究经河北省人民医院伦理委员会批准后开展(K-2019-289)。

表1 2组孕妇孕周、孕龄、孕次及BMI比较[M(P25，P75)]

1.3研究方法 比较2组孕妇血清硒、VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比和不良妊娠结局，Logistic回归分析血清硒、VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比与不良妊娠结局(包括胎膜早破、产后出血、产褥感染、胎儿窘迫、巨大儿、早产儿)的关系。

1.3.1血清硒、VEGF水平检测方法 于孕32～33周采集2组孕妇外周静脉血，采用电解质分析仪测定血清硒离子水平，采用ELISA法检测血清 VEGF 水平(试剂盒购自美国 Abcam 公司)，操作按照说明书进行。

1.3.2外周血内皮祖细胞百分比检测方法 于孕32～33周采集2组孕妇外周静脉血10 mL，用肝素抗凝、PBS 缓冲液稀释后，将稀释液按照1∶2 比例均匀铺到淋巴细胞分离液上，经离心、PBS 洗涤、再次离心去上清后，用 EGM-2MV 培养基重悬细胞，然后放入培养瓶中常规培养，培养鉴定分化正常后，分离靶标细胞，流式细胞仪检测。

1.4统计学方法 采用SPSS 25.0统计软件对数据进行统计分析，计量资料均呈非正态分布，采用中位数及四分位数[M(P25，P75)]表示，组间比较采用非参数检验；计数资料采用频数及百分比表示,组间比较采用连续性校正卡方检验或费希尔确切概率法。相关性分析采用Logistic回归分析。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.12组孕妇血清硒、VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比比较 HDCP组孕妇血清硒、VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比均明显低于正常组，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表2。

表2 2组孕妇血清硒、VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比比较[M(P25，P75)]

2.22组孕妇不良妊娠结局比较 HDCP组胎儿窘迫及早产发生率均明显高于正常组(P均<0.05)，2组产后感染、产后出血、胎膜早破发生率比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。见表3。

表3 2组孕妇不良妊娠结局比较 例(%)

2.3血清硒、VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比与妊娠结局的相关性 Logistic回归分析显示，血清硒水平与胎儿窘迫、早产的发生无明显相关性(P均>0.05)，血清VEGF水平是发生胎儿窘迫和早产的保护因素(OR分别为0.976和0.974，P均<0.05)；外周血内皮祖细胞百分比是发生胎儿窘迫的保护因素(OR为0.807,P<0.05),与早产的发生无明显相关性(P>0.05)。见表4。

表4 血清硒、VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比与不良妊娠结局的Logistic回归分析相关性

3 讨 论

HDCP发病机制尚未完全明确，病因学较多，其中内皮细胞损伤所致的血管舒缩功能异常是其发病机制之一[5]。一般情况下，血管收缩异常会引起组织缺氧缺血，导致内皮损伤，血管内皮细胞会分泌一系列细胞因子，促进内皮祖细胞动员，发挥修复内皮作用。VEGF是一种功能性糖蛋白，能促进血管内皮细胞增殖、迁移，可以显著提高血液循环中大分子的渗透性，直接或间接诱导新血管形成和提高血管通透性[6-7]。Adu-Bonsaffoh等[8]研究结果显示子痫前期孕妇血清 VEGF 水平明显低于正常妊娠孕妇。边英新等[9]研究发现，妊娠高血压综合征孕妇循环内皮祖细胞数量较正常孕妇明显减少。Dymara-Konopka等[10]研究发现VEGF的高表达能促进内皮祖细胞迁移，在血管内皮细胞的修复中与内皮祖细胞共同发挥作用。本研究结果显示，HDCP组孕妇血清VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比均明显低于正常组。这说明血清VEGF水平、外周血内皮祖细胞数量与 HDCP有关，二者降低导致受损血管内皮无法及时修复，从而促进HDCP的进一步发展，但HDCP孕妇血清VEGF 水平降低及外周血内皮祖细胞数量减少的原因还不完全清楚。

随着对HDCP的不断深入研究，发现孕妇体内微量元素水平异常在HDCP的发生发展过程中起到关键作用[11]。相关研究报道，微量元素锌可通过调控核因子κB(NF-κB)信号通路抑制炎症反应[12]；铜可参与铁代谢与造血等生理过程，铜蓝蛋白对胎儿的生长发育有保护作用，当孕妇体内铜含量降低时，会引起细胞呼吸障碍、结缔组织功能异常等，对胎盘厚度、弹性和韧性造成直接影响[13]。硒能够通过多种细胞信号通路调节机体免疫功能，其参与超氧化物酶、谷胱甘肽等Ⅱ相解毒酶的合成，可提高超氧化物歧化酶活性，有利于清除自由基，减轻H2O2过量聚集所致的氧化应激损伤，改善血管内皮功能；可提升外周血内皮祖细胞数量，促进受损细胞内皮修复、新生[14]；还可以减轻缺血再灌注导致的水肿，抑制肿瘤坏死因子释放，减少中性粒细胞浸润，抑制炎症反应[15]。刘洋等[16]报道，妊娠期高血压疾病孕妇存在微量元素缺乏及机体氧化还原失衡现象。国外的相关研究也证实，母体硒水平与子痫前期发病关系密切，硒缺乏会使GSH-Px合成减少，机体抗氧化能力下降，引起血管内皮细胞氧化损伤，适当补充硒元素，可以增加内皮祖细胞的活性，有利于内皮细胞修复[17-18]。本研究结果显示，HDCP组孕妇血清硒水平明显低于正常组，说明微量元素硒水平与HDCP发生有关。

本研究进一步分析了血清硒、VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比与不良妊娠结局的关系，结果显示VEGF水平是发生胎儿窘迫和早产的保护因素，外周血内皮祖细胞百分比是发生胎儿窘迫的保护因素，提示提高HDCP孕妇血清VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比可改善妊娠结局；而血清硒水平与胎儿窘迫、早产的发生无明显相关性，其原因尚不明确，可能与样本数较少有关。

综上所述，HDCP孕妇血清硒、VEGF水平及外周血内皮祖细胞百分比明显低于正常妊娠孕妇，血清VEGF水平和外周血内皮祖细胞百分比与不良妊娠结局有相关性，这些指标的监测可辅助HDCP的防治，可以预测不良妊娠结局发生情况，值得进一步深入探究。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。