2型糖尿病合并幽门螺杆菌感染对血清PG和G-17的影响

孙秋杰，贾红丽，商书霞，赵军魁，段丽君

幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，H.pylori)属革兰氏阴性菌，是胃肠疾病的常见致病菌，其主要通过损坏胃上皮细胞进而导致消化性溃疡、慢性胃炎等疾病[1]。H.pylori感染可导致胃黏膜 出现高增殖，使胃黏膜出现肠上皮化生，导致胃肠进一步加重损伤，甚至可进一步发展为恶性肿瘤疾病，因此世界卫生组织将其列入一级致癌因子[2-3]。

伴随着社会的变革，人们的饮食结构也发生了翻天覆地的变化，糖尿病的发病率逐年攀升，而且呈现出年轻化趋势[4]。作为新兴流行性疾病的2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)每年可导致全球约400万人死亡[5]。T2DM发病机制复杂，目前认为致病的相关危险因素主要与生活方式关系密切，例如饮食习惯、遗传影响、体力运动、心理因素等[6]。只有进一步的认识、了解T2DM才能有效的预防、降低发病率并减缓其发展进程。炎症反应在T2DM的发生、发展中扮演了重要角色，T2DM的发病率和H.pylori感染具有显著的关联性[7]。既往报道[8-11]证明，T2DM患者感染H.pylori的概率明显高于健康人群，而且T2DM合并H.pylori感染会导致更加突出的抗菌药耐药现象，增加了根除H.pylori的难度。临床中，糖尿病患者继发因胃神经功能紊乱而导致的胃排空延迟等症候也较为多见，患者多会出现恶心呕吐、腹痛腹胀、饱胀感等临床表现[12-13]。

血清胃蛋白酶原(pepsinogen，PG)和胃泌素-17(gastrin-17，G-17)主要由胃部细胞分泌、合成，PG主要分为PGⅠ和PGⅡ[14]。胃黏膜若发生炎症、溃疡甚至癌变等问题时，血清PGⅠ、PGⅡ、G-17以及PGⅠ/PGⅡ值(pepsinogen ratio，PGR)都会发生一定变化。通过观察以上血清指标的变化可以有效地评估胃黏膜状态和功能的变化，能够为临床的诊治以及预后评估提供较为有意义的参考资料。

1 对象与方法

1.1 研究对象

在2018年6月至2020年7月华北医疗健康集团峰峰总医院邯郸院区就诊患者中，选取H.pylori感染合并T2DM患者100例(H.pylori+T2DM组)，男59例、女41例，年龄30～59岁，平均年龄(49.1±6.2)岁；同时期单纯H.pylori感染阳性患者100例(H.pylori组)，男46例、女54例，年龄28～57岁，平均年龄(48.7±5.3)岁；同时期体检健康者100例，男性44例、女性56例，年龄29～60岁，平均年龄(47.9±6.5)岁。三组在性别、年龄两项基线资料的比较中，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经华北医疗健康集团峰峰总医院院伦理委员会审核批准，所有入试者均自愿签署知情同意书。

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准 ①健康者或H.pylori感染[15]者或H.pylori感染合并T2DM者[16]；②自愿接受PG、G-17等相关检测；③年龄≥20岁。

1.2.2 排除标准 ①伴有胃癌等恶性肿瘤疾病者；②检测前3个月内有服用糖皮质激素、胃黏膜保护剂、抑酸剂等影响相关检测指标药物者；③伴有心、肝、肾等重要脏器功能异常者。

1.3 检测方法

H.pylori定性检测采用13C-尿素呼气试验，由北京勃然制药有限公司提供检测试剂盒。所有受检者采集气体前需为空腹或禁食不少于2 h，服用13C标记物前，受检者维持正常呼吸，将吸管插入收集袋并到达底部，对准吸管慢慢呼气3～5 s直至第1个呼气收集袋饱满，然后马上拔出吸管并立即旋紧盖子，标记为0 min样本；随后受试者口服尿素13C药物5 g，闭嘴静坐30 min后依第一次收集气体时的操作进行气体的再次收集，此次需收集满2个气体收集袋，标记为30 min样本1和样本2。对两次收集的气体进行13CO2检测，检测结果用δ‰表示。δ‰=(13C测定样品同位素丰度/13C参比样品同位素丰度-1)×1000。检测结果=30 min样本1δ‰-0 min样本δ‰，结果若≥4则进行复检(检测结果=30 min样本2δ‰-0 min样本δ‰)，两次结果均≥4，则判定H.pylori感染为阳性；若结果<4则判定H.pylori感染为阴性；若首次结果≥4，但复测结果<4，则以加测第三次结果为准。

血清PGⅠ、PGⅡ、G-17均采用酶联免疫法进行测定，由必欧涵生物技术有限公司提供检测试剂盒。所有受检者均在空腹状态下抽取5 mL肘静脉血，20～25 ℃操作环境下，检验者将标本与试剂进行充分融合，每孔添加空白液、标准液、对比液以及稀释2倍后的标本共100 μL，封孔膜封孔后37 ℃下进行60 min孵育。每孔经350 μL稀释后的洗涤液清洗3遍后，再次加入稀释100倍后的混匀酶标液100 μL，封孔膜封孔后37 ℃下进行60 min孵育。然后每孔经350 μL稀释后的洗涤液再次清洗3遍后，每孔加入混匀底物液100 μL，封孔膜封孔后常温下进行30 min孵育，最后每孔加入混匀的终止液100 μL，30 min内采用爱德康全自动酶标仪测定450 nm处的吸光度。计算标准液、空白液、对照液以及样本各复孔的吸光度，测试结果=各测试液的吸光度值-空白液的吸光度值。0为起点，X轴为标准液给定值，Y轴为标准液吸光度平均值，绘出的最佳拟合曲线为标准曲线，在曲线上根据样本和对照液的吸光度平均值查找对应的血清PGⅠ、PGⅡ、G-17浓度值。

1.4 观察指标

记录三组患者的血清PGⅠ、PGⅡ、PGR和G-17水平。

1.5 统计方法

2 结果

2.1 三组血清PG水平比较

H.pylori+T2DM组血清PGⅠ水平与H.pylori组差异无统计学意义(P>0.05)，但两组均明显高于健康组，差异均具有统计学意义(P<0.05)。H.pylori+T2DM组血清PGⅡ水平较H.pylori组和健康组明显增高，差异均具有统计学意义(P<0.05)；而H.pylori组和健康组差异无统计学意义(P>0.05)。H.pylori+T2DM组PGR值明显低于H.pylori组和健康组，差异均具有统计学意义(P<0.05)；而H.pylori组和健康组间差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 三组血清PGⅠ、PGⅡ、PGR和G-17水平比较

2.2 三组血清G-17水平比较

血清G-17的水平H.pylori+T2DM组>H.pylori组>健康组，三组间差异均具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

3 结论

血清PG作为天门冬氨基酸蛋白酶前体，作为特异性指标可精准反映出人体胃黏膜的功能和状态[17-18]。PG根据免疫学原性分为PGⅠ和PGⅡ，胃底腺的主细胞和颈粘液细胞分泌PGⅠ，而PGⅡ则由全胃腺(胃贲门腺、胃底腺、胃窦幽门腺及十二指肠布氏腺)分泌[19-20]。因为G-17主要由胃窦部的G细胞合成、分泌，所以G-17的血清浓度取决于G细胞的数量和胃内酸度值，从而可以作为判断G细胞功能的生物学标志，且能间接反映胃黏膜的分泌功能和组织状态[21-22]。血清PG和G-17对调节人体消化功能和维护消化器官组织结构的完整性具有十分重要的作用和意义。多项研究中都曾联合检测血清PG和G-17来对胃黏膜状态进行评估，但结果并不统一，猜测与糖尿病的阶段、H.pylori感染的菌株及部位、患者个体差异等因素有关[23]。

目前，糖尿病与H.pylori感染之间的相关性还没有形成统一的认识，一些报道认为糖尿病患者H.pylori感染率更高，而也有一些研究认为两者之间不存在相关性[24]。虽然没有明确的证据表明H.pylori到底在糖尿病的发病中扮演了一个什么样的角色，但大家对两者之间是否存在一定关系的研究热情一直未减。H.pylori感染可导致机体慢性炎症，而这些炎症被认为与T2DM的发生有密切关系，因为前者可以持续激活机体的免疫系统和促使机体释放炎症细胞因子。机体长时间遭受炎性因子的侵犯，就会逐渐出现T2DM的临床典型症状。王瑞等[25]研究认为H.pylori感染会对胃黏膜瘦素和脑肠肽水平产生影响，导致机体发生代谢紊乱和胰岛素抵抗，造成机体对糖的利用度的降低，从而诱发糖尿病。刘学功[26-29]等人的研究证实H.pylori感染产生的炎性因子会对脂蛋白酶的活性产生抑制作用，从而减少了血脂的分解代谢，造成低密度脂蛋白胆固醇水平的升高，使得机体持续处于一种慢性的、全身性的炎症状态下。

另一方面，在T2DM的发生发展中白细胞介素会通过胰岛素分泌的减少来介导自身胰岛β-细胞的炎症，人白介素1b、白细胞介素6、C-反应蛋白、肿瘤坏死因子等血清指标的表达增加是这种炎症的显著特征[30-31]。在部分流行病学的调查研究中发现，引起胰岛素抵抗炎症的一个重要危险因素即是病原体感染[32]。H.pylori感染会直接导致胃上皮细胞产生急慢性炎症，H.pylori感染后宿主细胞发生的免疫反应是复杂的，其中白细胞介素6、C-反应蛋白等促炎细胞因子的高水平表达和T2DM的发生发展紧密相关[33-34]。

一些研究证据同样表明，T2DM患者的H.pylori易感性明显增加。首先，患者自身的糖调节受损引起的机体免疫可增加个体对于H.pylori的敏感性[35]；其次，胃黏膜因糖调节受损而发生改变，对H.pylori感染具有促进作用[36]；最后，糖调节受损者相较健康者更易暴露于病原体[37-38]。

H.pylori感染和(或)患T2DM后均可对胃体主细胞产生刺激，从而增加PGⅠ分泌量，因此本研究中H.pylori+T2DM组和H.pylori组患者血清PGⅠ水平却无明显差异(P>0.05)，但H.pylori+T2DM组却明显高于健康组(P<0.05)。H.pylori组和健康组患者血清PGⅡ、G-17水平均明显低于H.pylori+T2DM组(P<0.05)，推测是由于H.pylori+T2DM导致全胃轻度炎症较单纯感染H.pylori或健康患者更加广泛，所以刺激PGⅡ、G-17分泌量均明显增加。

综上所述，T2DM病人合并H.pylori感染会加重胃部炎症程度，临床中应注重T2DM合并H.pylori感染患者的H.pylori根除治疗。