血清神经特异性因子表达与脑胶质瘤患者术后脑损伤程度的相关性研究

罗肖宇，刘彩霞，石代乐，左路广

脑胶质瘤是一种常见的神经系统肿瘤，主要表现为头痛、颅内压升高、神经障碍、癫痫发作等，占颅内原发性肿瘤的35%～60%［1-2］。手术切除是脑胶质瘤的主要干预手段，但手术过程中牵拉、电凝等操作可能损害肿瘤周围脑组织，引起术后神经功能障碍，进而影响治疗效果和预后情况［3］。有研究指出，神经特异性细胞因子能够从微观水平反映神经局部代谢状况，对判断脑损伤病情具有重要参考价值［4］。本研究通过监测脑胶质瘤患者围手术期血清髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein，MBP）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）水平变化，分析其与脑胶质瘤术后脑损伤程度的关系，为早期评估脑胶质瘤患者术后脑损伤情况提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018 年1 月至2020 年8 月河北北方学院附属第一医院神经外科进行手术治疗的96 例脑胶质瘤患者，其中男54 例，女42 例；年龄35～65 岁［（49.65±8.97）岁］；病理分级：Ⅰ级5 例，Ⅱ级40 例，Ⅲ级51 例。

纳入标准：（1）经影像学及病理检查确诊为脑胶质瘤［5］；（2）初诊患者，尚未采取任何临床干预措施；（3）由同一组手术医师团队行择期开颅肿瘤切除术，术后遵医嘱接受规范化治疗；（4）手术前意识清醒，配合治疗并完成相关检查。研究方案经医学伦理委员会讨论通过（218 伦批03 号），受试患者及家属对研究内容知情同意。

排除标准：（1）颅脑损伤史、脑梗死或其他神经系统疾病；（2）全身其他部位肿瘤或急慢性感染疾病；（3）心肝肺肾等重要脏器功能损伤；（4）内分泌疾病、免疫系统疾病、凝血障碍或血液疾病；（5）已采取放化疗等干预措施；（6）不配合治疗、不耐受手术治疗、随访缺失或其他原因死亡或失联。

1.2 术后脑损伤判定标准 所有患者于术后7 d采用格拉斯哥昏迷评分法（Glasgow coma scale，GCS）评分判定术后脑损伤程度，观察内容包括睁眼、语言、运动3 项，总分为15 分，其中3～8 分为重度受损，9～11 分为中度受损，12～14 分为轻度受损。

1.3 治疗方法 所有患者入院后行常规开放肿瘤切除术，全身麻醉。首先开颅去除骨瓣，充分暴露胶质瘤中心及周围浸润部位，再小心切除肿瘤及病变组织，最大限度保护正常神经组织；对于体积较大或界限不清肿瘤，先切除瘤内，待减压后再小心切除周围病变组织，常规止血后逐层缝合，术后抗癫痫治疗3 个月。

1.4 观察指标 采集患者术前、术后3 d 及术后7 d 时外周血3 ml，以3 000 r/min（离心半径5 cm）离心10 min，收集血清待检。采用双抗夹心ELISA法检测血清MBP、GFAP 水平，检测试剂购自武汉华美生物公司，全自动酶标仪（Triturus 型）购自瑞典Can Ag 公司。

1.5 统计学处理 采用SPSS 19.0 软件进行统计分析，计量资料以±s表示，采用单因素方差分析或独立t检验；计数资料以频率和百分比（%）表示，采用χ2检验；绘制ROC 曲线分析血清MBP、GFAP对脑胶质瘤术后脑损伤程度的评估价值，采用Pear⁃son 法探讨血清MBP、GFAP 水平与GCS 评分的相关性。P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 脑胶质瘤患者围手术期血清MBP、GFAP 水平变化 与术前相比，脑胶质瘤患者术后3 d 和术后7 d 血清MBP、GFAP 水平明显升高（P<0.05），且术后3 d 时血清MBP、GFAP 水平高于术后7 d（P<0.05）。见表1。

表1 96 例脑胶质瘤患者围手术期血清MBP、GFAP 水平变化（± s）

表1 96 例脑胶质瘤患者围手术期血清MBP、GFAP 水平变化（± s）

注：MBP 为血清髓鞘碱性蛋白，GFAP 为胶质纤维酸性蛋白

时间术前术后3 d术后7 d F 值P 值GFAP（ng/L）69.62±14.96 102.32±25.36 83.21±17.55 59.896<0.01 MBP（µg/L）4.38±1.16 7.02±1.85 5.69±1.42 60.121<0.01

2.2 术后不同脑损伤程度患者临床特征比较 术后不同脑损伤程度患者性别、年龄和病理分级相比，差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

表2 术后不同脑损伤程度患者临床特征比较

2.3 术后不同脑损伤程度患者围手术期血清MBP、GFAP 水平比较 术后不同脑损伤程度患者术前血清MBP、GFAP 水平相比，差异无统计学意义（P>0.05）；而术后中重度损伤患者术后3 d 和术后7 d 时血清MBP、GFAP 水平高于轻度损伤患者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

表3 术后不同脑损伤程度患者围手术期血清MBP、GFAP 水平比较（± s）

表3 术后不同脑损伤程度患者围手术期血清MBP、GFAP 水平比较（± s）

注：MBP 为血清髓鞘碱性蛋白，GFAP 为胶质纤维酸性蛋白

损伤程度轻度损伤中重度损伤t 值P 值例数69 27 MBP（µg/L）GFAP（ng/L）术前4.33±1.08 4.49±1.12 0.593 0.555术后3 d 6.28±1.68 8.89±1.92 6.052<0.01术后7 d 5.51±1.29 6.15±1.36 2.037 0.044术前69.38±13.14 70.23±15.26 0.236 0.814术后3 d 92.07±21.05 128.54±25.04 7.227<0.01术后7 d 80.25±14.62 91.08±15.38 2.959 0.004

2.4 血清MBP、GFAP 水平与GCS 评分的相关性分析 术前血清MBP、GFAP 水平与GCS 评分无密切相关性（P>0.05）；而术后3 d 和术后7 d 血清MBP、GFAP 水平与GCS 评分均呈负相关（P<0.05）。见表4。

表4 血清MBP、GFAP 水平与GCS 评分的相关性

2.5 术后3 d 血清MBP、GFAP 水平对术后脑损伤程度的评估价值 以中重度脑损伤为观察组，轻度脑损伤患者为对照组，分析血清MBP、GFAP 对术后脑损伤情况的评估价值。二者联合检测评估灵敏度与MBP、GFAP 单独检测比较差异无统计学意义（P>0.05）。联合检测评估特异度高于MBP、GFAP单独检测，差异有统计学意义（P<0.05）。见表5、图1。

表5 术后3 d 血清MBP、GFAP 水平对术后脑损伤程度的评估价值

图1 血清MBP、GFAP 评估术后脑损伤程度的ROC 曲线

3 讨论

脑胶质瘤的治疗需要在不损害功能区域脑组织前提下，尽可能完全切除病灶，同时联合同步放、化疗，最大限度改善预后和降低复发率。脑胶质瘤的病变部位特殊，手术风险较高，操作难度较大［6］。虽然精准医学在神经外科的应用日益广泛，脑胶质瘤诊疗效果有显著提高，但手术切除病灶过程中不可避免会造成脑组织创伤，影响术后神经功能恢复［7］。因此，准确评估术后脑损伤情况对判断临床手术效果尤为重要。

GCS 是目前临床上评估患者意识状态的常用指标，但其为宏观监测项目，所受的干扰因素较多，且主观性较强，导致判定结果容易出现偏差［8］。近年来研究发现，多项神经特异性因子参与脑损伤的病理过程，可作为临床查体和神经影像学检查的补充，对脑损伤的诊断、评估具有重要参考价值［9］。MBP、GFAP 均是来源于神经细胞的特异性蛋白因子，MBP 主要存在于少突细胞中，GFAP 则是胶质细胞特有的骨架蛋白，两者在维持神经细胞结构及功能完整性方面均发挥着积极作用［10］。有研究表明［11］，MBP、GFAP 是神经受损的敏感标志物，脑外伤、颅脑手术等均会导致其表达量升高，检测血清MBP、GFAP 水平有助于辅助评估术后脑损伤程度。

本研究结果显示，脑胶质瘤患者术后血清MBP、GFAP 水平显著升高，且呈先升后降的变化趋势，提示血清MBP、GFAP 水平可能作为评估术后脑损伤的参考指标。颅内肿瘤切除术可引起脑水肿和局部脑组织损伤，神经细胞受损，导致术后血清MBP、GFAP 水平快速升高；而随着术后时间推移，颅内水肿逐渐消除，脑损伤得到恢复，血清MBP、GFAP 水平也逐渐降低。因此，动态监测血清MBP、GFAP 水平变化有助于掌握脑胶质瘤患者术后神经恢复情况。

脑胶质瘤的浸润生长会对周围神经产生压迫，造成脑水肿、颅内代谢紊乱以及相关炎症等，加重脑组织损伤程度。手术虽能缓解病灶对脑组织的物理压迫，但术中牵拉、电凝等操作仍会造成医源性脑损伤。另外，手术时间、机体应激、术后颅内水肿、出血等均是影响脑损伤程度的重要因素。GCS 评分是脑损伤患者意识状态的重要指标，对判断颅脑手术患者脑损伤程度和评估预后具有一定帮助［12］。本研究结果显示，中重度损伤患者术后血清MBP、GFAP 水平高于轻度损伤患者，且血清MBP、GFAP 水平与GCS 评分呈显著负相关，提示术后血清MBP、GFAP水平能从细胞代谢方面判断脑组织受损程度，可作为评估术后脑损伤的潜在指标。

本研究中，术后3 d 血清MBP、GFAP 水平评估脑胶质瘤患者术后中重度脑损伤的灵敏度、特异度尚可，均在70%以上。但由于脑胶质瘤术后脑损伤病情复杂，单一指标的评估效能有限，可能会影响早期预测的准确性。本研究进一步分析发现，血清MBP 联合GFAP 对中重度脑损伤预测的特异度有显著提高，联合预测的灵敏度与单一指标检测无差异，提示血清MBP 和GFAP 联合检测能够提高对脑胶质瘤术后脑损伤程度的评估效能，对临床选择合理治疗方案具有重要意义。颅脑手术不可避免会造成神经受损，导致血清中MBP、GFAP 水平发生改变，在经过有效的治疗后，2 项指标水平会逐渐恢复。而部分中重度脑损伤患者血清MBP、GFAP 水平同时升高，神经损伤较重，治疗预后可能不太理想。

综上所述，脑胶质瘤患者术后血清MBP、GFAP水平先升后降，其表达与术后脑损伤及修复情况有关，可作为评估脑胶质瘤手术脑损伤程度的潜在指标。但本研究所纳入研究对象较少，研究结果可能存在偏差，今后需设计大样本、多中心研究，验证研究结果的准确性。