铁皮石斛对肉仔鸡生长性能、屠宰性能和免疫性能的影响

李秀富 ， 唐 娇

(1.铜仁职业技术学院 ， 贵州 铜仁 554300 ； 2.贵州铜仁万山区高楼坪农业服务中心 ， 贵州 铜仁 554300)

铁皮石斛(DendrobiumofficinaleKimura et Migo，DKM)为兰科多年附生药食同源性草本植物[1]，具有益胃生津、清热滋阴、增强免疫、提高胃肠消化酶活性、调节糖脂代谢、抗疲劳和抗氧化等功效[2-3]，这主要与其所含多糖、石斛碱、酚类、氨基酸和多种微量元素等生物活性成分有关[4]。鸡新城疫(Newcastle disease，ND)是危害养禽业健康发展最为重要的急性、烈性、高传染性的一类疫病之一[5]，我国防控ND主要以免疫预防为主[6]，但因肉鸡饲养周期短，屠宰时常可见未完全吸收的疫苗，对鸡肉品质和安全存在隐患。当前，寻找促进肉鸡生长、增强肉鸡免疫的免疫增强剂逐渐成为研究的焦点。笔者查阅相关资料，罕见DKM在禽类的相关研究报道。中药细粉化具有成分损失小，利用效率高等优点。基于此，本试验通过在日粮中添加DKM细粉，观察DKM对肉仔鸡的生长性能、屠宰性能、主要免疫器官指数、新城疫抗体效价(Newcastle disease antibody，ND-Ab)、血清免疫球蛋白M(Immunoglobulin M，IgM)和免疫球蛋白G(Immunoglobulin G，IgG)的影响，以期为DKM在禽类健康养殖和作为ND免疫增效剂的开发使用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 DKM，购自铜仁市中药材公司，粉碎后过40目筛；ND血凝抑制抗原、阴性血清和阳性血清，均购自哈尔滨国生生物有限公司；LaSota株ND活疫苗，购自和元生物工程有限公司；IgG、IgM检测试剂盒，均购自南京建成生物工程研究所。

1.2 主要仪器 Eppendorf移液器(100～1 000 μL，50～100 μL，1～10 mL)及配套耗材，均购自江苏科学器材有限公司；数显电子天平，购自康州HZ电子有限公司；MH-2振荡器，购自Kylin-Bell仪器公司；L-600离心机，购自湖南湘仪仪器厂。

1.3 试验动物 爱拔益加(AA)肉仔鸡，公鸡，1日龄，体重(25.23±0.23)g，购自铜仁华鑫禽业有限公司。

1.4 试验方法

1.4.1 试验设计及试验日粮 将250只1日龄健康肉仔鸡随机分成5个组，每组50只，对照组(CG组)饲喂基础日粮，试验组在基础日粮中分别添加0.5%(0.5%DKM组)、1%(1%DKM组)、2%(2%DKM组)和4%(4%DKM组)的DKM粉。所有肉鸡于7日龄(试验7 d)时按1羽份/只进行滴鼻点眼接种LaSota株ND活疫苗，试验期35 d。试验日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础)Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(air-dry basis)

1.4.2 饲养管理 整个试验期采用三层重叠式笼养，饲养环境相同，雏鸡自由饮水采食，间断采光，试验第1～7天控温30 ℃每日间断光照18 h，第8～14天控温28 ℃每日间断光照16 h，第15～21天控温25 ℃每日间断光照14 h，以后控温25 ℃每日间断光照12 h，每天定时记录添加和回收饲料量。

1.4.3 生长性能指标测定 试验结束(35日龄)时，将肉鸡在清晨给料前(禁食12 h)以重复笼为单位称量其空腹体重和耗料量，统计测算试验7～35 d肉鸡的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)。ADG(g)=总增重(g)/(试验天数×只数)；ADFI(g)=总采食量(g)/(试验天数×只数)；F/G=总采食量(g)/总增重(g)。

1.4.4 屠宰性能和重要器官指数测定 试验结束(35日龄)时，每组随机选取6只肉鸡，禁食12 h后称量其活重；完成采血后颈部放血致死，去除羽毛、趾和喙角质层后称量其屠体重；屠体去除食道、气管、胃、肠、心、肝、脾、肺、肾、生殖器、腹脂和头脚后称量其全净膛重；沿胸骨脊切开皮肤向背部剥离，切离胸骨脊侧面的肌肉及肩胛部肌腱称量其胸肌重；去除腿骨、皮肤、皮下脂肪后称量全部腿肌重；解剖摘取主要实质组织器官，剔除脂肪和筋膜杂质，滤纸吸干水分后立即称量其器官鲜重，参照《家畜生产性能名词术语和度量统计方法》测定屠宰性能[7]，计算主要免疫器官指数。全净膛率/%=(全净膛重/活重)×100%；胸肌率/%=(胸肌重/全净膛重)×100%；腿肌率/%=(腿肌重/全膛净重)×100%；器官指数(g/kg)=器官鲜重(g)/体重(kg)。

1.4.5 鸡血清ND-Ab抗体效价测定 分别于试验14、21、28 d和35 d时，随机从各试验组选取6只肉鸡，采心脏血液5 mL于离心管中，在37 ℃静置30 min，于室温下以3 000 r/min离心10 min，吸取上部1.5 mL血清置于指型离心管，保存于-20 ℃冰箱待检。按照《新城疫诊断技术》规范(GB/T16550—2008)标准进行鸡ND抗体效价测定。

1.4.6 血清免疫功能测定 于试验14 d和28 d时分别从各组挑选6只体重相近的肉鸡，按1.4.5心脏采血分离血清。IgG、IgM含量测定严格按照试剂盒说明书进行。

2 结果

2.1 DKM对肉仔鸡生长性能的影响 由表2可知，在各试验组ADFI差异不显著的情况下(P>0.05)，与CG组比较，1%、2%、4% DKM组肉鸡平均末重、ADG显著提高，F/G显著降低(P<0.05)，说明日粮中添加DKM可有效提高肉鸡生长性能(表2)。

表2 DKM对肉仔鸡生长性能指标的影响Table 2 Effects of DKM on growth performance of broilers (n=6)

2.2 DKM对肉仔鸡屠宰性能的影响 由表3可知，试验组的胴体重和全净膛率较CG组显著增加(P<0.05)；1%、2% DKM组和4% DKM组肉鸡的胸肌率以及1% DKM组和2% DKM组的腿肌率显著高于CG组(P<0.05)。

表3 DKM对肉仔鸡屠宰性能指标的影响Table 3 Effects of DKM on slaughter performance of broilers (n=6)

2.3 DKM对肉仔鸡免疫器官指数的影响 由表4可知，试验14 d时，试验组肉鸡胸腺指数(ThI)较CG组增加，但差异不显著(P>0.05)，2% DKM组和4% DKM组的脾脏指数(SpI)较CG组显著增加(P<0.05)，试验组法氏囊指数(BFI)较CG组显著增加(P<0.05)；试验28 d时，1%、2% DKM组和4% DKM组ThI较CG组显著增加(P<0.05)，试验组SpI较CG组显著增加(P<0.05)，1%、2% DKM组和4% DKM组的BFI较CG组显著增加(P<0.05)。

表4 DKM对肉仔鸡主要免疫器官指数的影响Table 4 Effects of DKM on major immune organ indexes of broilers (g/kg,n=6)

2.4 DKM对肉仔鸡抗体滴度的影响 由表5可知，试验14 d和28 d时，1%、2% DKM组和4% DKM组的ND-Ab效价较CG组显著升高(P<0.05)；试验21 d时，试验组较CG组均显著升高(P<0.05)；试验35 d时，仅2% DKM组较CG组显著升高(P<0.05)；整个试验阶段均未出现组间差异显著性升高变化(P>0.05)。

表5 DKM对肉仔鸡新城疫抗体滴度的影响Table 5 Effects of DKM on Newcastle disease antibody titer of broilers (log2,n=6)

2.5 DKM对肉仔鸡血清免疫球蛋白的影响 由表6可知，试验14 d时，1%、2% DKM组和4% DKM组IgM较CG组显著升高(P<0.05)，2% DKM组和4% DKM组IgG较CG组显著升高(P<0.05)；试验28 d时，1%、2% DKM组和4% DKM组IgM和IgG较CG组显著升高(P<0.05)，且IgM含量在14 d时高于28 d；IgG含量在28 d时高于14 d。

表6 DKM对肉仔鸡血清IgM、IgG的影响 Table 6 Effects of DKM on serum immunoglobulin M and immunoglobulin G of broilers (mg/mL,n=6)

3 讨论

3.1 日粮中添加DKM对肉鸡生长性能和屠宰性能的影响 ADG、ADFI和F/G是评估动物生长发育快慢最直观的三大生长性能指标。2015版《中华人民共和国药典》和现代药理研究表明，DKM具有益胃生津、厚肠胃、提高机体消化酶活性、促胃肠液分泌和排便、调节胃肠道菌群等多种功效[8-9]。本试验结果显示，日粮中添加1%、2%和4% DKM，在ADFI差异不显著的情况下(P>0.05)，可显著提高肉仔鸡平均末重和ADG，F/G显著降低(P<0.05)，其中以2%DKM组指标增加最明显，0.5% DKM组生长指标有所提高，但差异不显著(P>0.05)，说明DKM对提高肉仔鸡生长性能有效，其原因可能与DKM选择性促进肠道益生菌增殖、提高肠道消化酶活性帮助食物消化吸收[10-11]和促进胃肠排空有关[12]。屠宰率、全净膛率和胸肌率等指标是评估肉鸡常用的屠宰性能指标，一般认为全净膛率60%以上，屠宰率80%以上，肉用性能良好[13]。本试验结果显示，试验组的胴体重、屠宰率和全净膛率不仅显著高于CG组(P<0.05)，也高于肉鸡肉用性能评判标准，腿肌和胸肌是肉鸡的主要可食部分，日粮中添加1%、2%、4% DKM后肉鸡的胸肌率和添加1%、2% DKM后肉鸡的腿肌率显著高于CG组(P<0.05)，再次表明日粮中添加DKM对提高肉鸡生长性能、产肉性能和屠宰性能具有良好的作用，但日粮中添加0.5%、1%和4% DKM后肉鸡的生长性能和屠宰性能指标不如日粮中添加2% DKM的效果好，说明日粮中添加DKM要适量，短时间低浓度添加可能达不到最佳刺激肠胃消化酶活性和促进肠绒毛快速增长的作用，高浓度添加对饲料口感可能会产生影响，导致日均采食量和日均增重不增反降，肉鸡屠宰性能相关指标也降低，具体原因有待进一步研究证实。

3.2 日粮中添加DKM对肉仔鸡免疫性能的影响 机体的免疫效应主要通过活化巨噬细胞的吞噬作用，提高T细胞、B细胞主要免疫活性细胞和NK细胞等其他相关免疫细胞活性，同时激活机体的补体系统等来完成[14]。法氏囊、胸腺和脾脏是禽类最主要的免疫器官，胸腺和法氏囊分属于主导细胞免疫和体液免疫的初级免疫器官，脾脏属于主导体液免疫的次级免疫器官[15]。通常认为健康动物免疫器官的质量增加是T、B淋巴细胞增殖分化、成熟形成、免疫应答所致，其指数越高，机体免疫功能越强[16]。本试验结果显示，试验14 d时，试验组法氏囊指数和2%、4% DKM组脾脏指数显著高于CG组(P<0.05)；试验28 d时，试验组脾脏指数，1%、2%、4% DKM组胸腺指数和法氏囊指数均显著高于CG组(P<0.05)，其中以2%DKM组免疫器官指数升高最明显。说明DKM对促进雏鸡的细胞和体液免疫具有重要作用，但必须在日粮中添加适当的剂量。细胞免疫和体液免疫是组成机体特异性免疫的2种重要免疫方式，血清抗体效价是衡量机体体液免疫状况的主要指标，抗体效价越高，机体体液免疫功能越强[17]。本试验结果显示，试验14～35 d时DKM能快速显著提高鸡ND疫苗免疫功能(P<0.05)，而且能使ND-Ab效价持续保持较高水平，表明DKM在雏鸡ND免疫后，能快速显著提高其体液免疫功能。由B淋巴细胞主导的体液免疫主要通过IgG、IgM等来发挥功效，IgM是初次免疫后机体产生最早的抗体，IgG是疫苗免疫机体后监测的主要抗体[18]。本试验结果显示，试验组的IgM和IgG均高于CG组，试验14 d时，1%、2%、4% DKM组IgM和2%、4% DKM组 IgG显著高于CG组(P<0.05)；试验28 d时，1%、2%、4%DKM组IgM和IgG均显著高于CG组(P<0.05)。说明DKM可通过增加B淋巴细胞增殖来增强机体体液免疫功能和提高抗体滴度[3]。从试验结果指标数据上看，2% DKM组要明显优于0.5%、1%和4% DKM组；4%DKM组较2%DKM组指标下降，表明机体的免疫功能与日粮添加DKM并不形成正相关性，有一定的阈值性。黄晓君[19]、覃辉艳等[20]在小鼠中的研究发现，DKM粉末能促进小鼠脾淋巴细胞分化增殖，增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能，提高血清中免疫球蛋白含量和体液免疫功效，与本试验结果较为相似。

3.3 本试验结果证实，在雏鸡日粮中添加DKM具有显著提高雏鸡生长性能、屠宰性能、免疫器官指数、ND-Ab效价水平、血清IgM和IgG含量的作用，本试验条件下以日粮中添加2% DKM的效果最好。