不同水平小球藻对南美白对虾免疫功能的影响

单晓鸾

（乳山市海洋经济发展中心,山东威海 264500）

小球藻具有分布范围广、适应性极强、生物产量巨大等优点，由于其蛋白质含量高于50%，在鱼类养殖生产中可以作为蛋白原料使用[1]。小球藻不仅蛋白质含量丰富，还含有脂类、碳水化合物、叶绿素等营养物质，营养比较全面。 小球藻中富含多糖类、促生长因子等生物活性物质，具有免疫调节功能、提高动物生产性能的功能[2-3]。目前，小球藻在水产养殖生产中具有一些营养研究结果，如小球藻在三疣梭子蟹、鲫鱼、凡纳滨对虾等养殖生产中。 研究表明，在三疣梭子蟹和鲫鱼生产中使用小球藻可以有效促进其生长[4-5]；在凡纳滨对虾生产中使用小球藻可以替代其基础饲料中的豆粕，替代比例高达9%，对凡纳滨对虾的生长性能未产生负面影响，且降低了氮、磷的排放，改善水体养殖环境[6]。 南美白对虾是养殖产量较高的一种广温、广盐性热带虾种之一。 我国引进后，在全国范围内的养殖效果较好，产量较大，养殖范围分布较广。 但随着近年规模化、集约化养殖，导致疾病频发，养殖产量缩减，给养殖者造成巨大的经济损失。 在疾病处理方面经常使用抗生素类药物治疗，产生的药物残留、环境污染、危害人类健康等负面影响收到高度重视， 因此在南美白对虾养殖生产寻找抗生素的替代物至关重要[7-9]。 本研究选择具有免疫功能的小球藻在南美白对虾养殖生产中使用， 提高提高机体免疫力来提高其成活率， 进而提高养殖者的经济效益， 并确定小球藻在南美白对虾养殖中的最适添加量， 为小球藻在南美白对虾养殖生产中的高效、合理使用提供理论数据参考。

1 试验材料和试验方法

1.1 试验材料

小球藻购买于上海某生物科技有限公司， 有效含量大于70%。 南美白对虾购买于当地水产养殖公司，体长约为6.5 cm，体重约为4.50 g。

1.2 试验设计及试验饲料

试验试验选取600尾南美白对虾， 按照单因子试验设计，将其均分为4个处理组，每组150尾南美白对虾。对照组南美白对虾饲喂基础饲料，试验1组基础饲料+1%小球藻，试验2组基础饲料+1.5%小球藻，试验3组基础饲料+2%小球藻。试验周期为28 d，试验结束后采集南美白对虾血液，检测免疫相关指标。 试验设计见表1。 试验南美白对虾基础饲料配方表表见表2。

表1 试验设计

表2 试验南美白对虾基础饲料配方表

1.3 南美白对虾日常养殖管理

试验开始前，先将水族箱（0.8 m×0.5 m×0.5 m）使用生石灰进行消毒。试验过程中使用15个水族箱，在正式试验开始前南美白对虾驯养1周，适应养殖环境。 试验期间每日南美白对虾饲喂3次， 饲喂时间10∶00、15∶00、20∶00，每日的饲喂量为南美白对虾体重3%～4%。 养殖期间仔细观察南美白对虾的采食情况和健康。 养殖期间连续充气， 水温控制在26.5～28.5℃，盐度控制在约18.5，pH值约为7.7，溶解氧浓度大于5.8 mg/L。

1.4 免疫功能的测定方法

试验第28 d， 每组选择15尾南美白对虾， 使用1 mL的无菌注射器在其腹窦部位取血， 血液4 ℃条件下，4000 r/min离心5 min，取上层血清用于检测南美白对虾的血清免疫相关指标。 主要检测总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、溶菌酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶。试剂盒由南京建成生物工程研究所生产，检测方法参考试剂盒说明书。

1.5 数据分析

试验检测的数据先使用Excel进行简单的统计与处理，采用SPSS 25.0进行单因素方差分析，经过方差齐性检验后，具有统计学意义后，再使用LSD法对组间数据进行多重比较，P<0.05作为显著性判断标准，数据结果以平均数和总标准误呈现。

2 试验结果

不同水平的小球藻对南美白对虾血清免疫指标的影响见表3，由表3可知，试验2组和试验3组南美白对虾血清中的总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、溶菌酶活性、 碱性磷酸酶活性及酸性磷酸酶活性均显著高于对组（P<0.05），且除了试验1组南美白对虾的溶菌酶活性， 其余免疫功能指标均有比对照组改善的趋势，但未达到显著性水平（P>0.05）。 研究表明，在南美白对虾养殖生产中使用1.5%和2%的小球藻可以有效改善机体的免疫功能， 且小球藻的最适添加量为1.5%。

表3 不同水平的小球藻对南美白对虾血清免疫指标的影响

3 讨论

生产试验中使用1.5%的小球藻可以显著改善机体的非特异性免疫功能， 表明小球藻增强了南美白对虾对疾病的抵抗能力。 崔青曼等[10]研究发现，在南美白对虾养殖生产中使用不同水平的小球藻可以提高机体的免疫力及成活率，改善了生产性能，且小球藻的最适添加量为1%。 本研究中小球藻的最适添加量略高于崔青曼的试验结果， 可能是因为本试验使用的小球藻有效含量略低导致的。 小球藻改善水产生物机体非特异性免疫功能与其富含的多糖类活性物质有关， 多糖可促进水产生物体生成大量的干扰素，而干扰素会刺激水产生物机体的免疫系统，进而提高机体的免疫力，增强机体的抗病力[3]。

4 结论

本研究表明， 在南美白对虾养殖生产中使用1.5%和2%的小球藻可以有效提高了总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、溶菌酶活性、碱性磷酸酶活性及酸性磷酸酶活性，改善了机体的免疫功能，且小球藻的最适添加量为1.5%。