泰安市岱岳区不同规模奶牛场口蹄疫抗体检测结果分析

钟召兵

（泰安市岱岳区行政审批服务局，山东 泰安 271000）

口蹄疫是由口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）引起的急性、烈性传染病，易感动物为偶蹄类动物，其传播途径多、速度快，被世界动物卫生组织列为必须报告的动物传染病。有效的疫苗免疫预防是防控该疫病发生有效措施之一，我国对口蹄疫实施强制免疫的预防措施，近年来口蹄疫的流行形式从急、快转变为慢性、持续性感染，对奶牛养殖造成巨大的经济损失。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验材料 3 038头奶牛血样从泰安市岱岳区辖区的 7个不同规模奶牛养殖场（编号A～G）采集。血清分离并置 -20 ℃ 冰箱保存。

1.1.2 疫苗及主要诊断试剂 奶牛场使用的口蹄疫苗为中农威特生物科技股份有限公司生产的口蹄疫O型灭活疫苗。牛口蹄疫（O型）ELISA检测试剂盒，由京森贝伽生物科技有限公司生产。操作步骤按照试剂盒说明书进行。

1.2 方法

1.2.1 阻断率计算 样品阻断率 PI=[（阴性对照OD平均值-样品 OD值）/阴性对照 OD平均值]×100 %，根据以上公式计算被检样品和阳性对照样品的阻断率。

1.2.2 试验成立 两孔阴性对照 OD450nm值至少一孔 OD值大于 0.5；两孔阳性对照至少一孔的阻断率大于60 %。

1.2.3 结果判定 被检样品 PI≥50 % 判为口蹄疫病毒 O 型抗体阳性；PI＜50 % 判为口蹄疫病毒O型抗体阴性。

1.2.4 加强免疫 对首次免疫口蹄疫苗抗体检测不合格的奶牛进行第二次肌肉注射免疫上述口蹄疫 O型灭活疫苗。二免 28 d后采血，分离血清，并再次检测口蹄疫抗体。

2 结果与分析

2.1 不同奶牛场奶牛群口蹄疫免疫效果抗体检测结果

检测结果显示（表1），7个不同奶牛场奶牛的口蹄疫抗体合格率为 71.79 % ～ 95.22 %。其中B场最高，F场最低，而D场、E场、F场与G场的口蹄疫抗体合格率均低于80 %，达不到农业部的要求（表2）。通过7个不同规模奶牛场奶牛口蹄疫抗体结果显示，奶牛口蹄疫抗体的合格率高低与奶牛场规模大小呈正相关。

表1 奶牛口蹄疫抗体检测结果

表2 不同奶牛养殖场口蹄疫抗体合格率

2.2 口蹄疫苗二次免疫后口蹄疫抗体检测结果

检测结果显示（表3）奶牛第一次免疫后不同奶牛群口蹄疫抗体不合格率为 4.78 % ～28.21 %，其中最高为 F场；最低为 B场；二次免疫后奶牛群口蹄疫抗体不合格率为 4.14 % ～12.82 %，比第一次免疫前平均降低了 7.9个百分点。表明不同规模养牛场口蹄疫抗体经过第二次免疫后抗体合格率均有不同比例的提高。其中以F场和 G场的提高幅度最大，分别提高了15.39 % 和 15.52 %，而 B场的提高幅度最小（0.64 %）。试验结果表明二次免疫可以提高规模化场口蹄疫抗体的合格率，为制定淘汰口蹄疫抗体不合格奶牛提供一定的试验数据。

表3 奶牛二次免疫后口蹄疫抗体检测结果

3 讨论

奶牛的健康稳定决定了规模化奶牛场持续稳定发展。奶牛场口蹄疫是否有效控制直接关系到整个奶牛养殖场的经济效益乃至奶牛群的后期发展[1]。奶牛群口蹄疫抗体水平偏低，对奶牛群不能形成有效的免疫保护效果，一旦感染口蹄疫病原，会给奶牛养殖场造成重大损失[2]。同时不规范的免疫注射操作方法，也是影响口蹄疫疫苗的免疫效果的重要因素。因此，检测每一头奶牛的口蹄疫抗体免疫效果，筛选出第一次免疫口蹄疫抗体水平不合格的奶牛，进行二次免疫能从源头上降低感染口蹄疫疫病的风险，是降低口蹄疫对奶牛养殖场造成重大经济损失的有效的措施之一[3]。

检测结果可以看出，规模不同的奶牛场奶牛群的口蹄疫抗体合格率高低与规模场的大小成正比。原因可能小型规模饲养场基础设施差、设计不合理；养殖投资人员未经过系统的专业技术培训，经营理念、管理水平与实际要求存在差距，不能满足疫病防治、生产技术的需要等。仅有14 % 的奶牛场口蹄疫抗体合格率超过 90 %，而农业部对口蹄疫抗体合格率要求在 80 % 以上，说明本次检测的奶牛场中有 57 % 的牛场的口蹄疫抗体相对不稳定。奶牛场奶牛不产生口蹄疫抗体的原因可能是：疫苗免疫操作不当；疫苗保存、运输不当；免疫程序制定不合理；免疫抑制性因素造成奶牛机体免疫功能受损等[4]。因为各场管理水平、技术人员业务素质和免疫程序存在差别，针对第一次免疫后检测抗体不合格的奶牛进行口蹄疫灭活疫苗加强免疫，结果表明二疫后一个月口蹄疫抗体不合格率均有不同程度的降低，但少数抗体不合格奶牛在每个奶牛场仍然存在。若排除疫苗和操作等原因，很可能是奶牛个体差异或疾病原因造成自身抗体水平低[5-6]，这些免疫力低下的奶牛没有足够的口蹄疫抗体会因免疫保护不足而成为易感动物，被视为暴发口蹄疫的潜在威胁。因此，建议详细分析这部分奶牛免疫失败的具体原因，决定是否保留口蹄疫抗体不合格奶牛，使之不威胁到整个牛群的健康。