2016-2020年甘肃省奶牛结核病感染情况调查与分析

车小蛟，韩庆彦，罗莉宁，王 亮，于清磊，孟林明，高军军，薛喜娟

（甘肃省动物疫病预防控制中心，甘肃 兰州 730046）

牛结核病（Bovine tuberculosis）是由牛分枝结核杆菌（Mycobacterium bovis）引起的一种人和多种家畜共患的慢性传染病，组织器官多处出现结核结节性肉芽肿和坏死灶[1-2]。结核病牛由鼻汁、粪便、尿、乳汁、气管分泌物等排出病菌，污染周围环境而散布传染动物和人[1]。牛感染后，可引起肺结核、乳房结核、淋巴结核、肠结核等临床症状，牛结核病对养牛业，尤其是奶牛业的危害很大。本文通过对甘肃省 2016—2020年奶牛结核病感染情况进行初步调查与分析，旨在更好地掌握甘肃省奶牛结核病的流行现状，为逐步净化和有效控制该病提供数据支持。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 待检奶牛 2016-2020年5年间甘肃省14个市（州）的存栏奶牛，共计 3 303个养殖场点，335 714头奶牛。30日龄以下、临产前 2个月内、正在生病的奶牛不检测。

1.1.2 检测试剂 提纯牛型结核菌素，购自哈药集团生物疫苗有限公司。

1.1.3 主要器材 游标卡尺、剪毛剪、一次性无菌注射器、酒精棉球、防护用品等。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 按照GB/T 18645-2002的PPD试验操作[3]。

1.2.2 判定结果 注射部位前后出现明显的炎性反应，皮皱厚差值大于或等于 4 mm，判为阳性；炎性反应不明显，且皮皱厚差值为 2～4 mm，判为疑似；无炎性反应，皮皱厚值小于2 mm，判为阴性。判为疑似反应的牛只，于60 d后重新采样进行复检，结果仍为可疑或阳性的，判为阳性[3]。

1.2.3 数据分析 将检测结果录入 Excel，根据不同年份、不同养殖场点和不同地区，计算奶牛结核病的阳性数和阳性率，进行统计分析。

1.2.4 阳性牛处理 调查阳性奶牛均按照《牛结核病防治技术规范》进行扑杀和无害化处理；隔离阳性场/群，定期进行跟踪检测，发现可疑病例，及时隔离复检[4]。

2 结果与分析

2.1 2016-2020年甘肃省奶牛结核病检测情况

由表1可知，5年间共检测 3 303个场点，335 714头奶牛，检出阳性奶牛 142头，平均阳性率为 0.04 %，从2016年的 0.05 % 和 2017年的 0.1 % 降至 2020年的 0.03 %。结果表明，近5年甘肃省奶牛结核病检测阳性率呈下降趋势（图1）。

表1 2016-2020年全省奶牛结核病检测结果

图1 2016-2020年全省奶牛结核病阳性率曲线

2.2 2016-2020年甘肃省不同养殖场点奶牛结核病检测情况

由表2可知，5年间全省检测种奶牛场的8 679头，阳性数 0头，阳性率为 0；规模场的295 186头，阳性数57头，阳性率为0.02 %；散养户的 31 213头，阳性数 85头，阳性率为0.27 %；其他场点的636头，阳性数0头，阳性率为 0。结果表明，不同养殖场点检出的阳性率存在明显差异，检出阳性率最高的是散养户，规模场阳性率很低，采集的种奶牛场及其他场户样品全部为阴性。5年间规模场和散养户总体阳性率都呈下降趋势，散养户下降明显（图2）。

表2 2016-2020年不同养殖场点全省奶牛结核病检测结果

图2 2016-2020年不同养殖场点奶牛结核病阳性率变化曲线

2.3 2016-2020年甘肃省不同地区奶牛结核病检测情况

由表3可知，全省14个市（州）2016-2020年的总阳性率分布范围为 0 %～1.9 %，平均阳性率为 0.04 %。高于平均阳性率的有 4个市（州），低于平均阳性率的有 10个市（州）。结果表明，甘肃省不同地区奶牛结核病检测阳性率呈明显差异，防控效果也存在差异。张掖、平凉、陇南、临夏 4个市（州）阳性率均高于农业部净化标准（0.05 %），防控工作形势依然严峻。

表3 2016-2020年甘肃省不同地区奶牛结核病检测结果

2.4 奶牛结核病与人肺结核相关性

甘肃省奶牛结核病疫情形势与甘肃省卫生部门公布的肺结核疫情整体趋势吻合，2016-2020年甘肃省奶牛结核病和人肺结核发病具有正相关性，总体上奶牛结核病阳性数与人肺结核发病数呈逐年下降趋势（图3、图4）。

图3 2016-2020年奶牛结核病阳性数

图4 2016-2020年人肺结核病例数

3 讨论与结论

本次调查按照GB/T 18645-2002的PPD试验进行操作和判定，该标准已重新进行了修订，现在执行的是 GB/T 18645-2020，于 2020年12月14日发布，新标准中增加了临床诊断方法、PCR检测、γ-干扰素体外检测法等，诊断结果判定也会发生一定变化[5]。本次调查主要目的是通过PPD试验进行大规模初筛，从而对省内结核病发病情况进行初步调查。值得注意的是，牛结核PPD皮内变态反应存在误差，有一定的非特异性，受外界环境及人为因素的影响较为明显，在大规模检测中，易出现阳性漏检情况[6]，有时造成不必要的经济损失，实际工作中还要结合临床症状或 PCR试验、γ-干扰素 ELISA 检测法，从而确保阳性病例的准确性。操作中必须做好个人安全防护工作，佩戴眼罩、口罩、橡胶鞋套、防护服等，并对做过的样品和污染过的环境进行消毒处理。

1957年兰州市奶牛结核病变态反应阳性率为19.44 %。1965-1980年兰州等5市（州）奶牛结核病调查，平均阳性率 3.33 %[7]。1981-1989年全省奶牛结核病调查，平均阳性率为 0.53 %。1990-2014年全省共检测奶牛 878 324头，检出了阳性奶牛 1177头，平均阳性率为 0.13 %[8]。2011-2016年全省共检测奶牛 326 651头，检出了阳性奶牛 183头，平均阳性率 0.06 %[9]。本次调查平均阳性率为 0.04 %，与历史数据相比，60年来全省奶牛结核病阳性率不断下降，奶牛结核病感染情况趋向好转。近年来，甘肃省兽医主管部门高度重视，加大了项目支持和经费投入，采取行政手段，强制扑杀和无害化处理，通过实施监测、扑杀、净化为主的综合措施，使得甘肃省奶牛结核病防控工作取得阶段性成效，奶牛结核病阳性率呈逐年下降态势。

不同养殖场点奶牛结核病检出阳性率存在明显差异，不同场点检出阳性率分别为：散养户0.27 %、规模场 0.02 %、种奶牛场 0、其他场0，散养户阳性率高于规模场，徐小艳等[10]、赵胜杰等[11]、陈利霞[12]的研究结果与本研究结论基本一致。造成这种情况的原因可能是散养户对奶牛结核病防控意识较差，牛舍及周围环境卫生差，饲养密度大，奶牛舍通风不畅、潮湿、阳光不足、缺乏运动等易造成奶牛结核病传播。相比而言，规模化奶牛场饲养管理水平较高，养殖设施与设备齐全，饲料营养配比科学合理，落实有效的生物安全防护措施等，能防止疫病传播，因而检出阳性率较低。甘肃省奶牛养殖规模多以中小型为主，散养户居多，这也是今后奶牛结核病防控工作存在的薄弱环节。

奶牛结核病为人畜共患病，可与人结核病交叉感染，要引起畜主的重视，增强防范意识，避免造成交叉感染[13]。根据国家疾病预防控制局发布的《2020年全国法定传染病疫情概况》数据显示，2020年全国共报告肺结核发病670 538例，死亡 1 919人，发病总数和病死总数都很高。甘肃省卫生健康委员会发布的《2020年甘肃省法定传染病疫情公布》数据显示，2020年全省共报告肺结核发病 8 119例，死亡 13人，仅次于艾滋病。肺结核仍然是长期严重危害人民健康的慢性传染病，奶牛结核病和人肺结核发病具有高度的相关性，这也给奶牛结核病的防控增加了难度，本省奶牛结核病防控形势依然严峻。

调查发现甘肃省奶牛中存在牛结核病感染情况，各地的防控效果存在差异，其中陇南市、平凉市奶牛结核病流行最为严重，散养户感染牛结核病的风险明显高于规模户。针对不同的区域、不同的场点，有关部门需要制定相应的牛结核病防控和净化措施，重点加强对监测阳性牛和阳性牛群的管理，强化调运奶牛的产地检疫和流通监管，引导奶牛养殖模式由散养逐步向规模化过渡，加强对养殖场（户）防疫和养殖技术交流培训，提高养殖场（户）的科学防疫和科学养殖水平，建立健全科学防疫制度，加强监督，落实生物安全防护措施，定期开展奶牛结核病的检测和监测，及时淘汰阳性奶牛，积极培育和壮大奶牛结核病阴性群体，逐步实现场群净化和区域净化。