2 型糖尿病患者血清Lp-PLA2、IL-18、S100A8 水平变化及与糖尿病足溃疡的关系

陈虹燕 龙 可 黄淑莹 闵 珊

广州市番禺区中医院内分泌科，广东广州 511400

2 型糖尿病（type 2 diabetes，T2DM）是中老年人群常见的慢性病之一，其发病率逐年升高[1]。糖尿病足溃疡（diabetic foot ulcer，DFU）是T2DM 严重的并发症之一，其是周围神经病变、下肢动脉粥样硬化闭塞等因素导致的足部溃疡、畸形、坏疽。DFU 的治疗效果较差，现阶段其早诊早治是临床的工作重心[2]。众多研究证实局部过度炎症反应在DFU 的进展中起到了决定性的作用[3-4]。脂蛋白相关磷脂酶A2（lipoprotein associated phospholipase A2，Lp-PLA2）可与低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）结合生成游离脂肪酸和溶血磷脂酰胆碱，进而促进炎症反应和动脉硬化[5]。白细胞介素（interleukin-18，IL）-18在级联炎症反应和免疫功能失衡中发挥重要作用[6]。钙结合蛋白S100A8（calcium binding protein S100A8，S100A8）通过趋化中性粒细胞和激活炎症因子在炎症反应中发挥重要作用[7-8]。目前，Lp-PLA2、IL-18 和S100A8 的研究多见于冠状动脉粥样硬化、脑血管硬化等炎症性疾病，三者在DFU 中的具体机制尚未阐明。鉴于此，本研究分析血清Lp-PLA2、IL-18、S100A8与DFU 的关系，旨在为DFU 的及早诊治提供帮助。

1 对象与方法

1.1 研究对象

收集2019 年1 月至2021 年3 月于广州市番禺区中医院随诊的183 例T2DM 患者的临床资料，按是否并发DFU 分为T2DM 组（101 例）和DFU 组（82 例）。纳入标准：①T2DM 的诊断符合美国糖尿病协会制定的《糖尿病诊疗指南（2017 版）》[9]；②DFU 的诊断符合国际糖尿病足工作组发布的《糖尿病足国际临床指南》[10]；③临床资料完整，自愿进入本研究。排除标准：①半年内心肌梗死、脑梗死、脑出血发作史；②严重的心、肺、肾等重要器官功能障碍；③血液疾病、恶性肿瘤；④身体其他部位感染性疾病。入组对象均签署知情同意书，本研究经医院伦理委员会审批同意。

1.2 研究方法

1.2.1 一般资料 收集入组对象的基本临床资料，包括年龄、性别、吸烟史、饮酒史、体重指数（body mass index，BMI）。

1.2.2 生化指标的检测 于清晨抽取入组对象空腹静脉血5 ml，经3000 r/min 离心14 min（离心半径15 cm），取上清置于-70℃冰箱中备用。使用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法检测血清中Lp-PLA2、IL-18、S100A8、IL-1、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、C 反应蛋白（C-reactive protein，CRP）的水平，Lp-PLA2检测试剂盒（批号：R172018061431）购于Novus Biologicals公司（美国）；IL-18（批号：132018012517）、IL-1β（批号：3372018091002）、TNF-α（批号：2212019010104）检测试剂盒均购于罗氏公司（瑞士）；S100A8 检测试剂盒（批号：7792018111943）购于北诺生物科技有限公司（上海）。使用DF-403 全自动生化检测仪（优特医疗器械有限公司，东莞）检测生化指标：空腹血糖（fasting blood glucose，FBG）、糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin，HbA1c）、同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、甘油三酯（triglyceride，TG）、LDL-C、总胆固醇（total cholesterol，TC）。使用LH 750 全自动血细胞分析仪（贝克曼库尔特，美国）检测白细胞计数（white blood cell count，WBC）和中性粒细胞百分比（neutrophil percentage，NEU）。

1.3 统计学方法

采用SPSS 17.0 对所得数据进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验，计数资料采用百分率表示，组间比较采用χ2检验；采用logistic 回归分析DFU 的危险因素。以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较

DFU 组年龄、FBG、HbA1c高于T2DM 组（P ＜0.05）；DFU 组糖尿病病程长于T2DM 组（P ＜0.05）。两组男性、吸烟史、饮酒史、高血压者占比及BMI、Hcy、TG、TC、HDL-C、LDL-C 水平比较，差异无统计学意义（P ＞0.05）。见表1。

表1 两组一般资料比较

2.2 两组Lp-PLA2、IL-18、S100A8 等炎症指标比较

DFU 组Lp-PLA2、IL-18、S100A8、CRP、IL-1β、TNF-α、WBC、NEU 高于T2DM 组（P ＜0.05）。见表2。

表2 两组Lp-PLA2、IL-18、S100A8 等炎症指标比较（）

表2 两组Lp-PLA2、IL-18、S100A8 等炎症指标比较（）

注 T2DM：2 型糖尿病；DFU：糖尿病足溃疡；Lp-PLA2：脂蛋白相关磷脂酶A2；IL：白细胞介素；CRP：C 反应蛋白；TNF-α：肿瘤坏死因子α；WBC：白细胞计数；NEU：中性粒细胞百分比

2.3 DFU 危险因素分析

以DFU 作为因变量（是=1，否=0），以表1～2 中差异有统计学意义（P <0.05）的指标作为自变量（原值输入），行多因素logistic回归分析（逐步法），结果显示IL-1β（OR=1.766）、Lp-PLA2（OR=1.824）、IL-18（OR=2.083）、S100A8（OR=1.941）升高均是DFU发病的危险因素（P ＜0.05）。见表3。

3 讨论

T2DM 是以高血糖为病理基础的慢性代谢性疾病，当血糖长期控制不佳时，会并发心脏、肾脏及下肢部位并发症，DFU 是常见的并发症之一，其治疗困难、致残率较高[11]。本研究观察到T2DM 并发DFU 患者的T2DM 病程、FBG、HbA1c较高，提示血糖长期控制不佳的糖尿病患者并发DFU 的概率更高，可能的原因是机体长期的高血糖状态导致组织末梢血管持续性损伤，引起DFU 的风险增加，临床应积极有效控制患者血糖水平以降低糖尿病患者的发病风险。既往研究认为DFU 的主要病因为神经病变，但很大比例的神经病变患者并未发生DFU。目前，炎症学说成为众学者研究的热点，过度炎症反应可能是DFU 的决定性因素[12]。本研究结果显示，DFU 患者CRP、IL-1、TNF-α、WBC、NEU 明显升高，提示DFU 患者体内炎症反应明显，且随着病情进展逐渐加重，这也与众多学者的研究相符[12-13]。因此，积极追寻可准确评估DFU 的炎症指标，可为指导临床对患者进行个体化治疗。

Lp-PLA2 主要由单核细胞和巨噬细胞分泌，是众多炎症因子生物学活性的调控物。White 等[14]的研究发现Lp-PLA2 抑制剂可抑制炎症因子的表达，进而显著降低动脉斑块的体积。钱超等[13]的研究显示糖尿病足和糖尿病合并冠心病患者血清Lp-PLA2 明显升高，推测其与血管壁炎症、凝血及纤溶系统异常密切相关。Lp-PLA2 作为炎症反应调节物，可通过水解LDL-C 氧化形成的氧化卵磷脂，生成氧化脂肪酸和溶血磷脂酰胆碱，进而促进内皮细胞对IL-1、TNF-α 等炎症因子的释放，引发级联炎症反应。此外，Lp-PLA2 还有增加胰岛素抵抗作用和血管平滑肌毒性作用，加速了糖尿病病情进展、增高了血管斑块破裂风险[15]。本研究结果显示DFU 患者血清Lp-PLA2 水平明显升高，且是DFU 发病的危险因素，这也与既往的报道相互印证[13-14]，笔者据此推测Lp-PLA2 通过促进炎症反应、血管斑块形成，引发DFU 的发生和进展，其可作为评估DFU 发病风险和病情的可靠指标。

IL-18 是脂肪细胞分泌的一种具有内分泌作用的蛋白质，其具有多向性促炎效应，在免疫调节、慢性炎症反应中发挥重要作用。有研究[16]发现糖尿病前期患者血清IL-18 水平既有升高，且与IL-6 呈正相关，提示IL-18 的促炎效应参与了糖尿病进展的全程。还有学者[17]观察到血清IL-18 水平在健康人、糖尿病患者和糖尿病足患者中逐渐升高，且其是糖尿病足的独立危险因素，提示其动态监测有助于了解患者病情进展。究其原因，IL-18 不仅可以促进T 淋巴细胞分泌γ-干扰素，还可以促进IL-1、TNF-α、IL-8、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子等炎症因子的释放，通过调节免疫和炎症因子的释放参与炎症的发生发展[18]。本研究发现DFU 患者血清IL-18 水平高于T2DM 患者，进一步分析发现IL-18 是DFU 的危险因素，提示IL-18与DFU 的病情和发病风险具有较好的量化关系，其亦是评估DFU 病情的有效指标。此外，本研究还发现，IL-1 也是DFU 的危险因素，其也是重要的炎症反应蛋白之一，可促进中性粒细胞活化、聚集，进而发挥血管损伤作用，如前文所述IL-18 和Lp-PLA2 均会促进IL-1 的表达，因此其与DFU 也表现出一定的量化关系，对DFU 的准确评估也有一定的应用价值。

S1008A 是S100 家族成员之一，其可与钙离子结合导致空间结构改变，进而与靶蛋白结合发挥生物学效应[19]。S1008A 可通过中性粒细胞趋化作用启动炎症细胞和炎症因子、激活膜受体晚期糖基化终产物受体及Toll 样受体-4[20]，进而介导炎症信号通路引发炎症反应[21]。目前，S1008A 的研究多见于血管炎症、血钙钙化及变应性皮炎等炎症疾病[22-27]，其与DFU 的关系研究比较罕见，亦有文献[25-29]报道糖尿病患者和DFU 患者血清S1008A 水平明显升高，但具体机制并不清楚。本研究结果显示，DFU 患者血清S1008A 水平明显升高，进一步分析发现其是DFU 发病的危险因素，笔者据此推测S1008A 可能是通过介导炎症信号通路引发级联炎症反应，参与DFU 的发生发展，具体机制仍需后续研究证实。

综上所述，血清Lp-PLA2、IL-18、S100A8 升高与DFU 的发生、发展密切相关，对三者进行动态监测可能为DFU 的有效评估提供帮助。