新疆鼠疫血清学检验室间质控结果与评价

贵有军 郝俊晖 王启果 罗勇军 木尼热·木合买提 卡斯木江·玉素甫 李博 王诚 王效俊

（新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心 830002）

鼠疫是由鼠疫耶尔森氏菌（Yersinia Pestis）引起的广泛流行于野生啮齿动物间的一种以鼠、蚤传播为主的自然疫源性疾病，以发病急、传播快、病死率高、传染性强为主要特征，是《中华人民共和国传染病防治法》 规定的甲类传染病[1]。鼠疫血清学检验具有快速、敏感、特异性高、成本低、操作简便实用等特点，同时对实验室设备和人员水平要求较低，适合基层开展规模检测[2]，在流行病学调查、常规监测、腐败材料检验、鼠疫快速检验和追溯诊断等方面有非常重要的作用。为提高全区鼠疫血清学检测水平，建立一套行之有效的质量管理体系，确保检测结果的科学性和准确性，2021 年7 月在全区13个鼠疫监测实验室开展室间质量控制，对检验工作进行全面分析，并作质控结果评价。

1 材料与方法

1.1 质控项目

间接血凝试验（IHA）和反向间接血凝试验（RIHA）。

1.2 质控材料制备

将鼠疫F1 抗体（抗原）间接血凝诊断试剂中阳性血清和菌体制剂分别按一定比例稀释，充分混匀后分装于离心管中，置于4℃冰箱中冷藏。各质控样本每天检测1 次，观察记录结果，连续测试5 次，已出现最多次数的滴度作为该批质控血清的标准滴度。试剂盒由兰州生物制品研究所有限责任公司生产，均在有效期内使用。

1.3 质控方法

将质控样本分装于Eppendorf（1ml）管中分发到各考核点，统一时间进行检测并报告结果。质控样本的操作按照《新疆鼠疫防治手册》 和试剂盒说明书进行。判定标准：鼠疫IHA 和RIHA 结果判定以反应强度(++) 为阳性反应界限，出现阳性反应的最高稀释度作为该血清的阳性滴度。

1.4 结果评定标准

质控样本检测滴度与“标准滴度”比较相差不超过±1 个稀释滴度，视为质控合格，超过则判定为不合格。

2 结果

2.1 鼠疫血清学检测质控结果

由附表可知，2021 年7 月开展鼠疫血清学检验室间质控发放质控样本共26 份，质控实验室13 个，IHA 和RIHA 室间质控样本标准滴度均为1:256，经对检验结果全面分析和质控评价，质控总合格率为80.76%，IHA 的合格率为84.62%，RIHA的合格率为76.92%。表明全区鼠疫监测点基本具备鼠疫血清学检验能力，检验结果基本能反映监测地区的客观事实。

附表 2021 年新疆鼠疫血清学检验室间质控结果

2.2 质控结果影响因素分析

2.2.1 检测人员实操能力

质控结果显示，由于检测人员操作不当、理论基础差或工作岗位调整等原因，导致实验操作和结果判定存在误差，致使质控结果不合格。此类因素质控不合格频率较高，有2 个实验室3 次质控不合格，占质控不合格次数的60%。

2.2.2 仪器设备及试剂材料

质控结果显示，由于仪器设备选择或使用不当，导致1 个实验室1 次质控不合格，此类因素占不合次数20%。由于试剂配制、保存不规范，导致1 个实验室1 次质控不合格，此类因素占不合次数20%。

3 讨论

20 世纪70、80 年代，新疆鼠防专业队伍曾是全国最强的阵容之一，但随着鼠疫防控老专家相继退休，出现鼠防人才断层，队伍不稳的局面，很多医学专业毕业生不愿投身到这种条件艰苦、经常出野外的鼠疫防控事业中来[3]。多数基层疾病预防控制中心编制短缺，专业技术人员承担多病种防治任务，单病种检测规范化操作水平较低，专门从事鼠疫防控工作的人员更少，加之新入职和频繁转岗的人员缺乏专业知识培训[4]，造成目前新疆鼠疫防控专业能力和技术水平不高的局面。

专业人员理论基础和实操水平对整个实验起关键主导作用。实验人员要掌握专业理论知识，经专业培训可熟练操作后持证上岗。实验人员因自身经验不足会影响试验结果的准确性，如在倍比稀释过程中，移液量不准确、移液器吹打力度或次数不同，均会造成稀释滴度不准确；检测人员对检测原理、流程不熟悉、操作不规范，极易造成试剂或样本交叉污染而导致整个试验的失败，如在使用移液器滴加阳性参考、F1 抗原（抗体）血球时，吸头不小心接触到反应孔（此时孔内已有稀释液、血清、抗原等），又没有及时更换吸头，会造成试剂和各孔内液体交叉污染；实验人员因专业理论掌握不扎实、责任性不强、样本或试剂保存不规范等原因，会造成整批样本腐败或试剂失效，如在现场指导培训时发现，有人将样本和试剂一起长期在4℃冰箱中冷藏存放导致样本腐败；试验人员（尤其是有最终复判权和出具报告的省级疾控监测人员）要充分了解仪器检测原理和性能，对实验结果具有一定的分析能力，否则，即便是完全按照操作步骤进行试验，当遇到复杂样品或出现异常现象时也不一定能得出准确可靠的结果[5]。

实验室质量控制是为了排除误差，保证检验结果实事求，它包括室内质控(IQC) 和室间质控(EQA)，且参与EQA 的实验室应首先做好IQC[6]。随着鼠疫监测关口前移和监测点标准化建设的不断推进，提高鼠疫监测质量成为监测工作的重要内容，自治区疾控中心作为全区鼠疫监测技术指导和复判机构，对全区监测工作质量起督促与指导作用，在日常工作中应加强对地、县级鼠防机构的现场指导和培训力度，对IQC 人员进行组织管理、仪器设备（检测仪应在校准）、取材运输、试剂盒质控、检验程序、结果判定、风险评估及疫情报告等的培训；对EQA 过程中涉及的样本制备、专技培训及结果分析等要做到认真负责；分析质控中发现问题的原因，提出解决办法，再次进行考核，直至合格；对室间质控工作中出现的薄弱环节及时提出改进措施。为确保检测质量，完善体制，建立长效机制，每年监测工作开始前应对鼠防点实验室进行仪器设备校准和质控考核，通过发现、分析和解决问题，使各实验室检验工作都能达到质控要求，保检测结果准确、可靠[7]。