基于HPLC指纹图谱的不同产地金钱草及其地方习用品与混用品的鉴定研究

2022-07-22 06:14徐璐娜王翰华李兆慧周漫佳程汝滨
中草药 2022年14期
关键词:积雪草产地用品

陈 云,徐璐娜,王翰华,李兆慧,周漫佳,程汝滨*

基于HPLC指纹图谱的不同产地金钱草及其地方习用品与混用品的鉴定研究

陈 云1,徐璐娜1,王翰华1,李兆慧1,周漫佳2,程汝滨2*

1. 浙江药科职业大学,浙江 宁波 315100 2. 浙江中医药大学,浙江 杭州 310053

对不同产地的金钱草及其常见的地方习用品与混用品的HPLC指纹图谱进行研究,比较分析不同产地金钱草及其习用品与混用品的差异,为其鉴定技术的开发应用奠定基础。利用80%甲醇制备金钱草及其习用品与混用品样品的提取溶液,采用HPLC法建立不同产地的金钱草及其习用品与混用品提取液的指纹图谱,明确金钱草及其地方习用品与混用品的特征鉴别峰,分析比较不同产地金钱草样品间指纹图谱的差异,利用SPSS软件对不同样品的指纹图谱进行聚类分析和主成分分析,明确HPLC指纹图谱在不同产地金钱草样品的质量评价和习用品与混用品的正伪鉴别中的作用。HPLC指纹图谱共获得了区分度较好的8个特征峰数据,可用于后续的鉴别和质量评价,其中金钱草和其地方习用品浙金钱草与几种混用品的指纹图谱存在显著差异,SPSS聚类分析结果表明HPLC指纹图谱可将金钱草及其地方习用品与混用品进行准确高效区分;不同产地金钱草的指纹图谱存在一定差异,其中四川产地和贵州、云南产地的可以进行有效区分。HPLC指纹图谱能有效区分不同产地金钱草及其地方习用品与混用品,鉴定结果具有快速、准确和操作简单的特点,为控制金钱草药材商品的质量提供了技术保障。

金钱草;混用品;指纹图谱;相似度;聚类分析

金钱草为报春花科植物过路黄Hance.的干燥全草[1],又名大金钱草、四川大金钱草等,主要含有黄酮、挥发油、三萜等化学成分,具有利尿通淋、除湿退黄等功效,因其对治疗肝胆结石效果显著,被誉为治结石之要药[2]。由于历史原因和资源限制,金钱草地方习用品和混用品众多,至少有7个科14种植物被作为金钱草在各地使用,点腺过路黄、天胡荽、活血丹、广金钱草、马蹄金、积雪草等均在特定地区被作为金钱草使用[3]。随着药材野生资源的不断衰竭,市场存在着药材品种混乱、掺伪、染色、重金属超标、农药残留等问题,这些都严重影响着药材的质量[4]。近年来发现,金钱草同属植物聚花过路黄、巴东过路黄等也作为金钱草伪品流通于市场[5]。金钱草“同名异物”“以假乱真”现象严重,地方习用品和混用品与正品金钱草在化学成分、药理作用和临床功效等方面存在一定差异,为金钱草的临床用药带来了一定的安全隐患。

随着中医药大健康产业的发展,对中药材的质量提出了更高的要求。道地药材是经过中医临床长期应用优选出来,产在特定地域的药材,与其他产区药材相比,品质和疗效更好,且质量更稳定。杨正久等[6]对贵州省不同来源地的21份金钱草样品进行分析,发现其在槲皮素和山柰素含量上有显著差异,具有丰富的多样性与一定地域性。金钱草主产于云贵川地区,虽被收入《四川道地中药材志》,成为49味川产道地药材之一[7],但不同产区的金钱草药材质量仍缺乏可靠的评价方法,难以体现其优质性,易导致低质量金钱草药材的市场冲击,不利于健康有序的优质优价金钱草中药市场环境的建立。因此,迫切需要建立开发一种金钱草质量分析方法,对不同产区的金钱草进行质量评价和区分,为金钱草道地产区的确认奠定夯实的基础。

HPLC指纹图谱是从中药多组分角度为研究基础的现代分析技术,是中药品种鉴定及质量评控的一种常用方法[8]。杜欢等[9]证实HPLC特征图谱可以有效区分金钱草及其混用品锈毛过路黄、显苞过路黄等,提示该技术在金钱草的质量评价和品种鉴别方面具有广阔的应用前景。本研究以芦丁、槲皮素为主要参比成分,采用HPLC法对不同地区金钱草及其习用品与混用品药材进行指纹特征图谱测定及其特征峰的归属确认分析,并结合相似度分析、聚类分析和主成分分析比较其差异,来考察HPLC指纹图谱对不同产地金钱草原药材及其常见的几种市场销售的地方习用品与混用品的鉴定能力,用以提高金钱草用药的准确性,为临床安全合理用药提供技术保障。

1 仪器与材料

1.1 仪器

LC-20A型高效液相色谱仪(日本岛津公司);SB-5200DT型超声波清洗机(宁波新芝生物科技有限公司);ME204型十万分之一电了天平(瑞士梅特勒公司);QE-200型高速粉碎机(浙江屹立工贸有限公司)。

1.2 材料

芦丁(批号C20J6Y1722,质量分数≥98%),槲皮素(批号C20J6Y1722,质量分数≥98%),对照品均购自上海源叶生物科技有限公司;甲醇,乙腈均为色谱纯,水为娃哈哈纯净水,购自宁波奥博科技有限公司。

30批金钱草及其习用品与混用品药材样品来源信息见表1,浙江台州、宁波产地的连钱草和马蹄金为笔者自行采集,其他产地金钱草及其混用品药材分别购于全国各地的药材市场。经浙江医药高等专科学校中药学院李兆慧副教授鉴定分别为过路黄Hance(金钱草)、点腺过路黄Maxim.(浙金钱草)、连钱草(Nakai) Kupr.、广金钱草(Osbeck) Merr.、马蹄金Urban.和积雪草(L.) Urb.,将样品做好标记后保存于该单位奉化校区中药实验室。

2 方法

2.1 样品溶液的制备

取样品3 g,加50 mL 80%甲醇至150 mL具塞锥形瓶中,密塞,称定质量,60 ℃超声40 min,放冷,80%甲醇补足质量,滤过,精密量取续滤液25 mL,微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤即得。

表1 样品来源

Table 1 Sample source

样品品种来源地 S1金钱草(对照药材)四川秦巴 S2金钱草四川秦巴 S3金钱草四川维康大药房 S4金钱草四川维康大药房 S5金钱草四川遂宁 S6金钱草四川遂宁 S7金钱草四川沐川 S8金钱草四川沐川 S9金钱草贵州遵义 S10金钱草贵州遵义 S11金钱草云南 S12金钱草云南 S13浙金钱草浙江台州 S14浙金钱草浙江台州 S15广金钱草广东肇庆 S16广金钱草广东梅州 S17广金钱草广东汕头 S18广金钱草广西南宁 S19连钱草浙江台州 S20连钱草浙江宁波 S21连钱草江苏扬州 S22连钱草湖北 S23马蹄金广东梅州 S24马蹄金浙江台州 S25马蹄金浙江宁波 S26马蹄金贵州黔东南 S27积雪草广西桂林 S28积雪草广西玉林 S29积雪草湖北 S30积雪草贵州

2.2 对照品溶液的制备

取芦丁、槲皮素对照品,加甲醇制成含芦丁11 μg/mL、槲皮素2 μg/mL的混合溶液,即得。

2.3 色谱条件

Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相0.3%醋酸溶液(A)-乙睛(B),梯度洗脱(0~15 min,92%~85% A;15~45 min,85%~79% A;45~50 min,79%~75% A;50~60 min,75%~55% A;60~75min,55%~45% A;75~80 min,45%~92% A),柱温30 ℃,体积流量0.9 mL/min,检测波长360nm,进样量10 μL。色谱图见图1。

芦丁和槲皮素等黄酮类化合物为金钱草的主要有效成分之一,且在HPLC指纹图谱中的出峰时间适中,因此本实验选芦丁、槲皮素的色谱峰作为金钱草的参照色谱峰,对不同产地金钱草及其地方习用品与混用品的HPLC指纹图谱进行比较分析。

5-芦丁 7-槲皮素,下同

2.4 方法学考察

2.4.1 重复性试验 取金钱草S1样品药材同一批次6份,精密称定,按“2.1”项下的制备方法制备,按2.3项下的色谱条件测定,以5号峰(芦丁)作为参照峰,计算出各共有峰的相对保留时间的RSD在0.03%~0.47%、相对峰面积的RSD在0.23%~1.50%。

2.4.2 精密度试验 取金钱草S1样品药材1份,精密称定,按“2.1”项下的制备方法制备,按“2.3”项下的色谱条件重复进样5次,测定各特征色谱图,以5号峰(芦丁)作为参照峰,计算出各共有峰的相对保留时间的RSD在0.02%~0.34%、相对峰面积的RSD在0.16%~0.47%。

2.4.3 稳定性试验 取金钱草S1样品药材末1份,精密称定,按“2.1”项下的制备方法制备,按“2.3”项下的色谱条件,分别于0、2、4、8、12 h检测,测定各特征色谱图,以5号峰(芦丁)作为参照峰,计算出各共有峰的相对保留时间的RSD在0.04%~0.43%,相对峰面积的RSD在0.26%~1.04%。

2.5 数据处理

将30批金钱草及其地方习用品与混用品药材样品,按“2.1”项下的方法制备,按“2.3”项下的色谱条件检测,得到的图谱导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012A)软件进行分析处理,以S1号金钱草样品(四川秦巴地区)的指纹图谱为参照图谱,多点校正,采用平均数法,时间窗宽度为0.1,计算各样品与参照图谱相似度,识别共有峰。通过SPSS 24软件对这30批样品HPLC指纹图谱的8个共有特征峰峰面积进行数据处理,采用组间联接法,以平方Euclidean距离为度量标准,进行聚类分析,并采用降维、因子分析,以回归方法,计算主成分特征值和方差贡献率,将得到的成分矩阵进行正交旋转,得到一个旋转矩阵,进行主成分分析。

3 结果与分析

3.1 HPLC指纹图谱的分析

对来自全国8个地区的30批金钱草及其地方习用品与混用品药材样品进行HPLC指纹图谱的测定,结果如图2所示,金钱草含有分离度较好且峰面积占比较大的8个特征峰,可作为区分鉴别金钱草及其习用品与混伪品的主要依据。与对照品比对分析后,明确5号峰为芦丁,7号峰为槲皮素,金钱草及其习用品与混伪品之间的指纹图谱存在着显著差异,HPLC指纹图谱可作为一种鉴别金钱草正伪品种的有效手段。1~4号峰和6号峰在部分混伪品样品中均有缺失,其中1号峰在浙金钱草(S13)中的占比最高;5号峰在广金钱草(S15)中的占比最低,在马蹄金中最高(S23);6号峰在广金钱草(S15)、连钱草(S19)中缺失,在马蹄金(S23)与积雪草(S27)中的占比都较高;而8号峰占比最低的是马蹄金(S23),最高的是积雪草(S27)。该结果提示金钱草指纹图谱中的1~8号峰,可作为金钱草HPLC指纹图谱特征鉴定的指标,是金钱草及其习用品与混用品区分的重要依据。

如图3所示,不同产地金钱草之间的指纹图谱也存在着一定的差异,金钱草含有分离度较好且峰面积占比较大的8个特征峰,可作为区分鉴别不同产地金钱草之间的主要依据。与对照品比对后,明确5号峰为芦丁,7号峰为槲皮素,其中1、6和8号峰在贵州遵义(S9)、云南(S11)产地样品中的占比均低于其他产地;3、7号峰在贵州遵义(S9)产地中的占比最低;4、5号峰占比较高的是四川秦巴(S1)、维康(S3)、沐川(S7)产地。该结果显示金钱草指纹图谱中这1~8号峰,可作为金钱草HPLC指纹图谱特征鉴定的指标,是区分不同产地金钱草之间的重要依据。

图2 金钱草及其习用品与混用品代表药材HPLC特征图谱

图3 不同产地金钱草代表药材HPLC特征图谱

为进一步深入分析HPLC指纹图谱中特征峰的鉴定效果,对不同样品中的特征峰含量和比例进行量化分析,以5号峰作为参照峰,分别计算各样品各共有峰的相对峰面积,习用品和混用品均已取其平均值,结果如表2所示。金钱草及其习用品与混用品共有峰的相对峰面积的RSD值在25.07%~83.03%,其中2号峰的RSD值最大,7号峰的RSD值最小;2号峰在马蹄金和积雪草中缺失,其相对峰面积在广金钱草中占比最高;8号峰的相对峰面积在金钱草中占比最高,在马蹄金中最低;3号峰在积雪草中缺失,在金钱草中占比最高;6号峰在广金钱草、连钱草中均缺失,其相对峰面积占比最高的是积雪草;浙金钱草在4、5号峰占比较大的同时,1号峰在其他习用品及混伪品中占比最高,说明浙金钱草可能在这些习用品及混伪品中与正品金钱草的差异性最小;广金钱缺失2个特征峰,且5号峰在其他习用品及混伪品中占比最低,积雪草缺失3个特征峰,1号峰在其他样品中占比最低,说明广金钱草和积雪草可能与正品金钱草差异性更大。该结果也提示金钱草指纹图谱中的1~8号峰,可作为金钱草HPLC指纹图谱特征鉴定的指标,是金钱草及其习用品与混用品区分的重要依据。

不同产地金钱草的共有峰的相对保留时间的RSD<1.79%,说明在成分组成上大致一样,相对峰面积的RSD值在5.88%~23.93%,说明在含量上有所差异,其中8号峰的RSD值最大,7号峰的RSD值最小;4号峰、5号峰在四川维康中的相对峰面积占比最高;3号峰、7号峰在贵州遵义产地中最低;2号峰在贵州遵义、云南产地中的相对峰面积占比最高,在四川遂宁中最低;1号峰、6号峰和8号峰的相对峰面积在贵州遵义、云南产地中最低,说明贵州遵义、云南产地的金钱草在特征峰含量上可能与四川产地相比具有更大的差异,其原因可能与生长环境有关,有待深入研究。

表2 金钱草及其习用品与混用品HPLC指纹图谱特征峰相对峰面积

Table 2 Fingerprint characteristic peak relative peak area of L. christinae and its articles and mixes

样品特征峰相对峰面积 12345678 S11.090.760.771.211.000.580.170.68 S21.090.760.771.211.000.580.170.68 S31.050.760.831.231.030.570.180.68 S41.040.760.821.221.030.570.180.68 S51.030.710.920.870.820.500.180.67 S61.040.710.920.880.830.500.180.67 S71.080.780.901.161.000.560.170.69 S81.080.780.901.160.990.560.170.69 S90.760.880.540.850.970.440.150.38 S100.760.890.540.850.960.440.150.38 S110.780.810.880.890.890.420.170.39 S120.780.810.860.890.890.420.170.39 S131.170.200.360.450.420.380.080.15 S141.160.200.370.460.420.370.080.16 S150.001.160.430.640.090.000.140.12 S160.001.150.430.630.090.000.130.11 S170.001.160.430.640.090.000.140.12 S180.001.160.430.640.090.000.140.12 S190.520.190.190.230.380.000.260.11 S200.530.190.190.220.380.000.250.10 S210.520.180.190.230.380.000.260.11 S220.520.190.190.230.380.000.260.11 S230.640.000.170.390.790.960.150.09 S240.630.000.160.380.770.950.150.09 S250.640.000.170.390.790.960.150.09 S260.640.000.170.390.790.960.150.09 S270.480.000.000.000.200.980.180.30 S280.480.000.000.000.200.980.170.28 S290.470.000.000.000.210.960.180.30 S300.480.000.000.000.200.980.180.30

3.2 相似度分析

以S1号金钱草样品(四川秦巴地区)为参照图谱,通过“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012A)软件对这30批金钱草及其习用品与混用品图谱进行分析处理,生成对照指纹图谱,见图1,并进行相似度计算。30批样品的相似度差异较大,习用品和混用品相似度在0.023~0.486,其中浙金钱草(S13~S14)与金钱草(S1~S12)的相似度相对较高,广金钱(S15~S18)、积雪草(S27~S30)的相似度略低,在0.023~0.045。不同产地的金钱草(S1~S12)相似度较高,在0.916~1.000,其中贵州遵义(S9~S10)、云南(S11~S12)产地的相似度稍低于四川产地(S1~S8),其原因可能与生长环境有关,有待深入研究。

3.3 聚类分析

通过SPSS 24软件对这30批样品HPLC指纹图谱的8个共有特征峰峰面积进行聚类分析,结果如图4所示。当Euclidean距离大于5时,金钱草及其习用品与混用品样品可聚为6类,积雪草(S27~S30)聚为第1类,马蹄金(S23~S26)聚为第2类,连钱草(S19~S22)聚为第3类,浙金钱草(S13~S14)聚为第4类,金钱草(S1~S12)聚为第5类,广金钱草(S15~S18)聚为第6类。不同产地的金钱草可聚为2类,其中贵州遵义(S9~S10)、云南(S11~S12)产地的金钱草可聚为一类,四川(S1~S8)产地的金钱草聚为第2类,说明不同产地金钱草及其地方习用品与混用品的HPLC指纹图谱有很大差异,其聚类趋势与相似度计算结果基本一致。这也体现了不同产地的金钱草具有一定的区域性,贵州产地和云南产地的金钱草之间有一定的亲缘关系,而四川作为金钱草的主产区有一定的独特优势,这为金钱草道地药材的质量评价和鉴定区分提供了一定的技术保障。

图4 金钱草及其习用品与混用品的聚类分析树状图

3.4 主成分分析

通过SPSS 24软件对这30批样品HPLC指纹图谱的8个共有特征峰峰面积进行主成分分析,结果见表3。主成分特征值和方差贡献率是选择主成分的依据,载荷矩阵反映了各变量对主成分的重要程度。经因子分析所得的前3个主成分,其特征值均>1,即4.122、1.972、1.114,方差的总累积达90.095%,说明各个成分之间具有较强的相关性,适合主成分分析。将得到的成分矩阵进行正交旋转,得到8个指标在3个主成分中的旋转矩阵,据表4所示:第1主成分的信息主要来自于1、3、4、5(芦丁)、8号色谱峰,第2主成分信息主要来自6号色谱峰,第3主成分信息主要自7(槲皮素)号色谱峰。以1、2、3主成分为自变量绘制得分图如图5所示,从图中可以看出不同产地金钱草及其地方习用品与混用品样品已经进行了很好地分类,共分为6大类,金钱草(S1~S12)聚为第一类,浙金钱草(S13~S14)聚为第2类,马蹄金(S23~S26)聚为第3类,积雪草(S27~S30)聚为第4类,连钱草(S19~S22)聚为第5类,广金钱草(S15~S17)聚为第6类,其结果与聚类分析基本一致。

表3 金钱草及其习用品与混用品的主成分分析特征值和方差贡献率

Table 3 Principal component analysis of eigenvalue and variance contribution rate of L. christinae and its articles and mixes

成分特征值方差贡献率/%累积方差贡献率/% 14.12251.52551.525 21.97224.64976.174 31.11413.92190.095

表4 金钱草及其习用品与混用品的主成分因子荷载矩阵

Table 4 Principal component factor load matrix of L. christinae and its articles and mixes

峰号成分1成分2成分3 1 0.707 0.560 0.082 2 0.578−0.772−0.174 3 0.949−0.244 0.028 4 0.955−0.224−0.061 5 0.826 0.393 0.116 6 0.019 0.876−0.286 7−0.158−0.010 0.976 8 0.877 0.174 0.157

图5 金钱草及其习用品与混用品的指纹图谱得分

4 讨论

本研究首先对样品制备方法及色谱条件进行了优化,最终以出峰数量和分离效果确定以80%甲醇的溶剂超声提取,以Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)、流动相0.3%醋酸-乙腈、梯度洗脱、柱温30 ℃、体积流量0.9 mL/min、检测波长360 nm为最佳色谱参数。其次通过相似度分析、聚类分析和主成分分析对不同产地金钱草及其地方习用品与混用品的HPLC指纹图谱进行了研究。结果显示HPLC指纹图谱共获得了区分度较好的8个特征峰,指认了5号峰为芦丁,7号峰为槲皮素,其中金钱草及其地方习用品与混用品的指纹图谱存在显著差异,浙金钱草与正品金钱草的相似度最高,广金钱草、积雪草的相似度略低,SPSS聚类分析结果表明HPLC指纹图谱可将金钱草及其地方习用品与混用品进行准确高效区分;不同产区金钱草的指纹图谱存在一定差异,其中四川产区和贵州、云南产地的可以进行有效区分。以上结果表明,本研究建立的HPLC指纹图谱法可用于鉴别不同产地金钱草及其地方习用品与混用品,且浙金钱草长期作为浙江地区金钱草药材的代替习用品,具有一定的科学依据。本研究的开展为浙金钱草资源的开发与利用提供了一定的技术保障,为后续浙金钱草的应用研究奠定了基础,有助于对其进一步深入研究和有关健康产品的开发。

道地性中药材是近年的研究热点之一,随着中药现代化基地建设的推进,中药材跨区域引种现象日益增加,加之市场流通的便利性,道地药材与非道地药材在药材市场共存,严重影响了道地性药材价值和疗效。我国作为道地药材的产区,原材料丰富,全国均有分布,且政府越来越重视中医药文化及技术的发展与传承,这也为道地药材扩大市场占有率提供了有利条件[10]。药材性状、药效和化学成分通常是评价道地药材的直接指标,其中化学成分分析被公认为道地药材的内在质量标准[11],这几年来,很多学者用化学指纹图谱对道地药材进行鉴定识别,效果显著,指纹图谱也已成为国际公认的控制中药质量的最有效手段[12]。本研究表明,不同产地的金钱草在HPLC指纹图谱上有一定差异,其中四川秦巴、维康、遂宁、沐川产地的样品和贵州遵义、云南昆明产地的有着显著差异,主要体现在成分含量上有一定的差别,且不同产地的金钱草表现出了一定的区域性,四川产区的金钱草样品与贵州、云南产地样品能够明显区分,四川作为金钱草的主产区有一定的独特优势[7],这为金钱草道地药材的质量评价和鉴定区分提供了一定的技术保障。

在广东、广西地区,常把广金钱草当作金钱草使用,称为“广东金钱草”,含黄酮和生物碱成分,主治泌尿系结石等病症[13];积雪草在湖北、广西地区也被当作金钱草使用,称为“地钱草”[14],主要含有三萜类和挥发油类成分,有着抗抑郁、抗炎等作用[15];在江浙沪地区,用于治疗各种热淋、尿路结石等病症的“金钱草”其实大部分是连钱草[16],主要含挥发油和三萜酸类成分[17];在四川和贵州等地区,还把马蹄金当作金钱草,称为“小金钱草”[18],含黄酮和挥发油类成分,主要用于治疗湿热黄疽、尿路感染等病症,具有镇痛、抗炎作用[19];点腺过路黄在浙江地区的资源蕴藏量非常丰富,并收录在《浙江省中药炮制规范》中,因其与正品金钱草的主治功效相似,因此在浙江地区常用其作为金钱草的代替习用品长期使用,名为“浙金钱草”[20],主要成分为糖类和氯化钾,具有清利湿热、消肿的功效,主要用于治疗炎症,包括肝炎、膀胱炎等[21]。正品金钱草主要含有黄酮和挥发油类成分,以除湿退黄、利胆排石为主要功效,偏重于治结石,如此混用,必将给金钱草的临床应用带来一定的安全隐患。

本研究发现,HPLC指纹图谱可以作为一种评判不同产地金钱草及其地方习用品与混用品质量差异的方法,但因药材取样的局限性,本研究不能完全代表各产地金钱草及其地方习用品与混用品的质量差异,应进一步在其他成分或其他方面进行深入分析,以提高用药的科学性。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

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Study on identification technology ofand its local common articles and mixed articles based on HPLC fingerprint

CHEN Yun1, XU Lu-na1, WANG Han-hua1, LI Zhao-hui1, ZHOU Man-jia2, CHENG Ru-bin2

1. Zhejiang Pharmaceutical University, Ningbo 315100, China 2. Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China

To researchand its local common articles and mixed articles based on HPLC fingerprint, and compare and analyze the differences of the medicinal materials and mixed articles in different areas, so as to lay a foundation for the development and application of the identification technology.Using 80% methanol to preparationand its local common articles and mixed articles extracts, HPLC method was used to establish the fingerprints of theand its local common articles and mixed articles, clarify the characteristic identification peak of theand its local common articles, analyze and compare the differences of the fingerprints of different thesamples. SPSS software was used for cluster analysis of fingerprints of different samples, to clarify the role of HPLC fingerprint in the quality evaluation of thesamples in different areas and the positive and false identification of common articles and mixed articles.The data of eight characteristic peaks were obtained by fingerprint. The composition and proportion of each characteristic peak in the fingerprint of differentspecies were significantly different, the results of SPSS cluster analysis showed that HPLC fingerprint could be used to accurately and efficiently distinguish theand its local common articles. There were also some differences in the fingerprint patterns of the samples from different regions, among which the samples from Sichuan, Guizhou and Yunnan could be effectively distinguished.HPLC fingerprint can effectively distinguish the sources of differentand its local common articles, and the identification results have the characteristics of rapid, accurate and simple operation, which provides a technical guarantee for the quality control of the.

Hance; adulterants; fingerprint; similarity; cluster analysis

R286.2

A

0253 - 2670(2022)14 - 4504 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.14.029

2021-12-19

浙江医药高等专科学校校级科研基金项目(XY2020005,ZPCSR2020006,ZPCSR2020007)

陈 云(1988—),女,实验师,硕士,研究方向为中药资源的化学成分和质量控制研究。Tel: 13429355212 E-mail: 365553752@qq.com

程汝滨,副研究员,研究方向为中药资源开发与利用。Tel: 15988839155 E-mail: biothcheng@hotmail.com

[责任编辑 时圣明]

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