喘息急性发作期儿童肠道微生态学改变及其与血浆Th1/Th2 的相关性

陈梦凡 张传新 倪霞红 王强

绍兴市柯桥区妇幼保健院儿科，浙江绍兴 312030

喘息急性发作期患儿会出现支气管收缩和痉挛，气道出现狭窄，呼吸气流经过时受到阻碍，从而可出现胸闷、气喘、呼吸困难，造成呼吸系统絮乱。当肠道菌群发生紊乱会促使炎症反应加剧，对机体细胞造成损伤，导致人体免疫力下降，无法抵御侵入体内各种细菌和病毒。Th1 细胞参与细胞免疫和迟发性超敏反应；Th2 可介导B 细胞分化，参与体液免疫应答，Th1 细胞/Th2 细胞（Th1/Th2）的失衡代表体内炎症反应加剧，细胞因子和炎症介质大量释放导致机体免疫损伤。本研究旨在探讨喘息急性发作期儿童肠道微生态学改变及其与血浆Th1/Th2 的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年6 月～2020 年10 月于绍兴市柯桥区妇幼保健院儿科就诊的儿童下呼吸道感染患儿85例做为研究对象，根据患儿的临床症状分为喘息组（45 例）和非喘息组（40 例）。纳入标准：①患儿均符合下呼吸道感染的诊断标准；②能够配合诊疗。排除标准：①支原体肺炎；②肺部肿瘤；③心肺功能不全；④哮喘、鼻炎史。选择同期在笔者所在医院体检后的35名健康儿童作为对照组。三组儿童的基线资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1。本研究已取得儿童的父母知情同意，经绍兴市柯桥区妇幼保健院医学伦理委员会批准。

表1 三组基线资料比较[n（%），（）]

1.2 观察指标

①肠道微生态：三组儿童分别提取一份2 mg 粪便样本放入无菌玻璃瓶并编号，然后将标本种植在培养基内进行培养，观察培养基中的菌落的生长情况，采用16SrDNA 荧光定量PCR 的方法对双歧杆菌、大肠杆菌的数量进行检测，并计算双歧杆菌/大肠杆菌（B/E）的比值；②肺功能：采用HI-801 肺功能仪测定三组儿童的第1 秒最大呼气容积（FEV）、FEV与用力肺活量比值（FEV/FVC）%、最大呼气流量（PEF）的水平；③血浆Th1/Th2：三组儿童采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）的表达水平。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 三组的肠道微生态指标比较

三组儿童的大肠杆菌数量组间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；喘息组患儿的双歧杆菌数量、B/E 水平均明显低于非喘息组和对照组，非喘息组患儿双歧杆菌数量、B/E 水平均低于对照组（均P＜0.05）。见表2。

表2 三组的肠道微生态指标比较（）

2.2 三组的肺功能比较

喘息组患儿的FEV、FEV/FVC、PEF 水平均明显低于非喘息组和对照组，非喘息组的FEV、FEV/FVC、PEF 水平均低于对照组（均P＜0.05）。见表3。

表3 三组肺功能比较（）

2.3 三组的血浆Th1/Th2 比较

喘息组患儿的血清IFN-γ、IL-4 水平均明显高于非喘息组和对照组，IFN-γ/IL-4 明显低于非喘息组和对照组；非喘息组的患儿血清IFN-γ、IL-4 水平均明显高于对照组，IFN-γ/IL-4 明显低于对照组（均P＜0.05）。见表4。

表4 三组的血浆Th1/Th2 比较（）

2.4 B/E 比值与IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4 的相关性

经Pearson 相关分析结果显示，B/E 比值与IFNγ、IL-4 水平均呈负相关，与IFN-γ/IL-4 呈正相关（均P＜0.05）。见表5。

表5 B/E 比值与IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4 的相关性

3 讨论

儿童下呼吸道系统和机体免疫功能由于身体发育所影响极易受到各种病原菌感染，常见病原体有细菌、病毒、支原体等，下呼吸系统被病原体感染后释放炎症因子，导致免疫系统絮乱，直接影响病情的发展。

肠道中的双歧杆菌属于益生菌，双歧杆菌具有抑制肠道内肠杆菌各种细菌过量繁殖、调整肠道菌群平衡、增加有益细菌的吸收和促进胃肠道消化的作用。机体Th1、Th2 细胞数量处于动态平衡状态，其中IFN-γ 主要由Th1 细胞和NK 细胞合成，可增强吞噬细胞介导的抗感染机制，抵抗细胞内寄生菌的感染，从而参与机体的免疫调节。IL-4 主要由T 细胞产生，能促进Th0 细胞向Th2 细胞的分化，抑制其向Th1 分化。

本研究结果显示，喘息组患儿的血清IFN-γ、IL-4 水平均明显高于非喘息组和对照组，B/E、IFNγ/IL-4 比值明显低于非喘息组和对照组，分析其原因是由于喘息组患儿肺部的炎症反应加剧及肠道微生态中的菌群相互作用和制衡的状态被双歧杆菌数量的降低所打破，损害机体的细胞免疫，导致T、B 淋巴细胞比例出现紊乱，造成患儿免疫功能低下，直接导致IFN-γ、IL-4 水平的升高，而IFN-γ、IL-4 的升高可加剧气道的炎症反应和高反应。经Pearson 相关分析结果显示，B/E 比值与IFN-γ、IL-4 均呈负相关，与IFN-γ/IL-4 呈正相关，分析原因可能是因B/E 下降由肠道微生态系统的紊乱失衡间接影响机体免疫功能的调节作用削弱，激活巨噬细胞释放炎性因子，IFN-γ、IL-4 均被机体炎症反应所诱发而升高，IFNγ/IL-4 因此降低。本研究的不足之处在于未分析药物治疗前后消化系统、免疫系统、呼吸系统指标的变化，因此有待携手其他中心进行全方位深入研究。

综上所述，喘息急性发作期儿童肠道菌群紊乱导致B/E 值降低，血浆Th1/Th2 免疫状态失衡，对其检测有助于评估患儿病情的严重程度。