一例祁连县默勒镇病死羔羊的诊断和防治报告

汪燕昌，简莹娜，韩青忠，万玛吉，李剑，马利青

(1.青海省祁连县动物疫病预防控制中心,祁连 810499；2.青海大学畜牧兽医科学院,西宁 810016)

2021年5月，祁连县默勒镇某养殖户羊群中的羔羊(2月龄左右)发生死亡，死前咳嗽，体温升高。同期羔羊间断性发病死亡，陆续出现卧地不起、呻吟、腹泻，有时出现摇头等神经症状。送检至实验室进行临床剖检，经实验室检验和分子生物学鉴定，诊断为D型产气荚膜梭菌合并感染绵羊肺炎支原体，现报道如下。

1 发病及症状

祁连县默勒镇瓦日尕村某养殖户饲养的2月龄左右的羔羊不时发病死亡，截至送检病料时已经发病死亡3只。发病羔羊卧地不起，眼结膜苍白，呻吟，腹式呼吸，腹泻，粪便呈暗黑色，混有黏液或血液，有时出现摇头、转圈等神经症状，死前咳嗽，体温升高。

2 剖检症状

病死羊体表有少量的羊虱蝇，剖检发现心包积液、心包膜有出血斑点，心脏冠状沟脂肪上有少量出血点；肝脏肿大、质基脆、土黄色，肝脏背侧有不规则的病灶；脾正常；肺脏肿大、实变，靠近胸肋骨处有化脓灶，肺小管切面有白色脓汁流出；胸腔积液；肾脏柔软、土黄色；腹腔积液；肠膨气，部分肠段潮红，肠淋稍肿大；瘤胃中充满积食，胃黏膜脱落(瓣胃，瘤胃)；十二指肠球状部稍肿，有一处鲜红的出血斑。

3 实验室诊断

3.1 涂片镜检

取病死羊的心、肝、脾、肺、肾及肠淋巴等组织涂片，瑞特氏染色，镜检肝脏涂片中有梭状大杆菌；肺组织涂片镜检有小杆菌；肠系膜淋巴结涂片镜检有大杆菌。

3.2 细菌的分离培养

将上述无菌采集的心、肝、脾、肺、肾、肠淋巴及小肠内容物等组织病料依次接种至普通肉汤、鲜血平板和厌气肉肝汤培养基上，经24 h培养后，接种肠内容物的鲜血平板培养基上有圆形、表面突起、呈灰白色半透明状菌落，且在菌落周围形成双层溶血环，菌落染色镜检为革兰氏阳性大杆菌，该菌能在厌气肉肝汤中生长、产气。

3.3 动物试验

取病死羊小肠水样内容物，用1倍量的灭菌生理盐水进行稀释，3 000 r离心10 min，取上清液。选取2只健康15 g左右的小鼠，静脉注射上清液0.2 mL/只，对照组小鼠2只，均注射生理盐水0.2 mL/只，试验组小鼠经过24 h左右死亡，对照小鼠正常，说明有毒素致实验组小鼠死亡。

3.4 PCR检测

将上述无菌采集的心、肝、脾、肺、肾、肠淋巴、小肠内容物等组织病料剪碎后进行DNA提取，经PCR检测，在肠内容物扩增出产气荚膜梭菌α毒素和ε毒素，为D型产气荚膜梭菌(见图1)。在肺组织中检测到绵羊肺炎支原体(见图2)。

图1 肠内容物产气荚膜梭菌毒素PCR检测结果图2 绵羊肺炎支原体PCR检测结果

4 结论

经临床观察、剖检变化、细菌分离培养、肠内容物毒素检查及PCR检测，综合判定该病例是由D型产气荚膜梭菌和绵羊肺炎支原体合并感染引起的死亡。

5 防治

5.1羊肠毒血症也叫做软肾病，是由D型产气荚膜梭菌引起的一种急性非接触性传染病，具有非常高的死亡率，往往给养殖户造成严重的经济损失[1]。D型产气荚膜梭菌通常在土壤、动物肠道和污水中存在，病羊和带菌羊是肠毒血症的传染来源，肠毒血症常见经口感染，绵羊对该病非常易感，呈散发状态[2]。

5.2绵羊传染性胸膜肺炎又称绵羊支原体性肺炎，是一种由绵羊肺炎支原体(Mycoplasmaovipneumoniae,MO)引发的高度接触性传染病，俗名“烂肺病”。该病呈现地方性流行特点，可经空气传播，羊只经呼吸道感染，具有较强的接触传染性特性[3-5]。

5.3发病时应立即隔离病羊，对羊舍内外环境进行消毒，及时清理粪便等排泄物，病死羊只在指定地点进行无害化处理。禁止饲喂带冰碴、霉变和变质的草料，增加营养以提高羊只的抵抗力[6]。

5.4确诊后，对发病羊群及时免疫接种羊“三联四防”疫苗[7，8]。该地区以前是羊肠毒血症的老疫区，经多年防疫，现已基本控制羊肠毒血症在该乡镇的流行[9]。此次发现病例给当地兽医工作者敲响了警钟，羊病的防治不可掉以轻心，尤其在老疫区。

5.5对于伴有咳嗽的羊只，需进行隔离饲养，改善饲养环境，确保舍内空气通畅，有条件的及时注射绵羊传染性胸膜肺炎疫苗。发病早期可以用30%的氟苯尼考注射液，按0.2 mL/kg体重的剂量注射，1次/d，3 d为1个疗程。对高热不退的病羊，可用30%安钠咖注射液10 mL肌肉注射，同时用10%的维生素C注射液10 mL、维生素B1注射液2 mL、5%葡萄糖生理盐水注射液200 mL，混合后静脉注射补充营养，1次/d，3 d为1个疗程[3]。另外可在饲料中添加麻杏石甘散(主要成分为麻黄、苦杏仁、石膏、甘草)，饮水中添加电解多维。坚持用药治疗1周后，病羊精神状态、食欲恢复正常，无新病例出现，则肺炎疫情得到控制[10]。