利咽汤剂与袋泡茶成分含量的比较

2022-07-13 21:32赵颖骆方莲
中国医药科学 2022年9期
关键词:薄层色谱法高效液相色谱法

赵颖 骆方莲

[摘要]目的考查南京市中医院自制利咽合剂以袋泡茶形式和汤剂形式加工有效成分含量的差异,为临床医生用药提供参考数据。方法采用薄层色谱法,对不同处理方法利咽方中射干、南沙参进行定性鉴别,采用高效液相色谱法,对不同处理方法利咽方中次野鸢尾黄素进行含量测定,对有效成分含量差异进行比较分析。结果定性鉴别中,射干、南沙参的薄层鉴别斑点清晰度均为粉末煎煮组>饮片煎煮组>粉末冲泡组>饮片冲泡组,阴性制剂均无干扰;含量测定实验中,次野鸢尾黄素含量为粉末煎煮组>饮片煎煮组>粉末冲泡组>饮片冲泡组。粉末袋泡茶在冲泡1 h 以上接近粉末煎煮0.5 h 有效成分含量。结论有效成分的含量煎煮法优于袋泡茶法,若选用袋泡茶法,需要冲泡1 h 以上。

[关键词]利咽合剂;中药袋泡茶;中药煎煮;高效液相色谱法;薄层色谱法

[中图分类号] R283.6  [文献标识码] A   [文章编号]2095-0616(2022)09-0075-04

Comparison of the content of components in Liyan Decoction versus bagged Liyan Tea

ZHAO  Ying    LUO  Fanglian

Department of Pharmacy, Nanjing Hospital ofTraditional Chinese Medicine, Jiangsu, Nanjing 210022, China

[Abstract] Objective To investigate the difference in the content of active ingredients in Liyan Mixture made by Nanjing Hospital of Traditional Chinese Medicine in the form of tea bag and decoction so as to provide reference data for clinicians to use the medicine. Methods The qualitative identification of belamcanda chinensis (L.) DC and fourleafladybell root in Liyan Mixture with different processing methods was carried out by thin-layer chromatography, and the content of irisflorentin in Liyan mixture with different processing methods was determined by high-performance liquid chromatography. The differences in the content of active components were comparatively analyzed. Results In the qualitative identification, both the clarity of spots of belamcanda chinensis (L.) DC and fourleafladybell root found by thin-layer chromatography in order were: powder decocting group>herbal pieces decocting group>powder brewing group>herbal pieces brewing group, and the negative preparations were free of interference. In the content determination experiment, the content of irisflorentin in order was: powder decocting group>herbal pieces decocting group>powder brewing group>herbal pieces brewing group. The content of active components in bagged powder brewing for more than 1 hour was close to that in powder decocting for 0.5 hours. Conclusion The content of active components in the medicine in the form of decoction is higher than that in the form of bagged tea, and if the form of bagged tea is chosen, the medicine is suggested to be brewed for more than 1 hour.

[Key words] Liyan Mixture; Bagged Chinese herbal tea; Chinese medicine decoction; High-performance liquid chromatography; Thin-layer chromatography

利咽合劑由南沙参、射干、木蝴蝶、麦冬等药味组成,具有养阴生津,清热利咽的功效,主要用于治疗慢性咽炎。该制剂在南京市中医院(本院)已使用30余年,具有优异的临床疗效。因此,为推广使用,本研究对该方的另一种剂型进行探讨。经翻阅文献,茶饮法更适宜咽部用药[1-2]。不同的提取方法对利咽方的有效成分含量也有一定的影响[3]。本课题分别以中药粉末和中药饮片为原料制备利咽袋泡茶和利咽汤剂,采用现代实验技术分析制剂中有效成分的含量,通过成分含量的比较,讨论哪种剂型更有优势,为临床医生开具处方提供参考依据。

1仪器与试药

1290型高效液相色谱仪(安捷伦公司),电子天平[托利多仪器(上海)有限公司]、电热恒温干燥箱(上海精宏实验设备有限公司),KQ-500E 型超声仪(昆山市超声仪器有限公司),ZF-2型三用紫外分析仪(上海安亭电子仪器厂),电热恒温水浴锅(上海跃进医疗器械厂)。

次野鸢尾黄素对照品(批号: MUST-18030404)由成都曼思特生物科技有限公司提供,甲醇(批号:20190503)由镇江久亿化学试剂公司提供,正己烷(批号:180619913E),甲酸(批号:180511553E)、二氯甲烷(批号:180917977F)、正丁醇(批号:180601766E)、乙酸乙酯(批号:181204989K)、乙醚(批号:210728631E)由南京化学试剂股份有限公司提供,三氯甲烷(批号:20171120)、丙酮(批号:20180105)由上海凌峰化学试剂有限公司提供。

2方法与结果

2.1样品制备

汤剂的制备:取2 d 处方量的中药饮片和中药粉末(80目筛)各3份,分别加水至1 L 煎煮0.5、1和1.5 h,过滤,浓缩至80 ml(20℃)即得,样品编号见表1。

袋泡茶的制备:取2 d 处方量的中药饮片和中药粉末(80目筛)各3份,分别加沸水至1 L 冲泡0.5、1和1.5 h,过滤,每份浓缩至80 ml(20℃)即得,樣品编号见表1。

2.2薄层鉴别

2.2.1射干的薄层鉴别取12份样品各15 ml,分别加乙醚15 ml 振摇提取2次,合并乙醚液,水浴蒸干,残渣加甲醇2 ml 使溶解,作为供试品溶液。另取射干对照药材1 g,加乙醚50 ml,浸泡12 h,过滤,滤液蒸干,残渣加甲醇2 ml 使溶解,作对照药材溶液。取射干的阴性样品15 ml,同供试液的制备方法制成阴性对照溶液。按照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述溶液各2μl,分别点于同一聚酰胺薄膜上,以三氯甲烷-丙酮-甲醇(3∶2∶ 1)为展开剂,展开,取出晾干,置紫外灯光365 nm 下检视。在供试品色谱中,12份样品均与对照药材有3个相同颜色的荧光斑点,阴性相同位置无点,见图1~2。结果显示,射干的薄层鉴别斑点清晰度为粉末煎煮组>饮片煎煮组>粉末冲泡组>饮片冲泡组。

2.2.2南沙参的薄层鉴别取12份样品各10 ml,加二氯甲烷10 ml 振摇提取2次,合并二氯甲烷液,水浴蒸干,残渣加甲醇2 ml 使溶解,作为供试品溶液。另取南沙参对照药材2 g,加二氯甲烷50 ml,超声处理30 min,过滤,滤液蒸干,残渣加甲醇2 ml 使溶解,作为对照药材溶液。取南沙参的阴性样品10 ml,同供试液的制备方法制成阴性对照溶液。按照薄层色谱法(通则0502)实验,吸取供试品溶液20μl,对照药材溶液5μl,阴性对照溶液20μl,点于同一硅胶 G 薄层板上,以正己烷-丙酮-甲酸(16∶1∶ 0.05)为展开剂,展开,取出晾干,喷以2%香草醛硫酸溶液,在95℃加热至斑点显色清晰,阴性相同位置无点,见图3~4。结果显示,南沙参的薄层鉴别斑点清晰度为粉末煎煮组>饮片煎煮组>粉末冲泡组>饮片冲泡组。

2.3次野鸢尾黄素的含量测定

色谱条件与系统适用性条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇∶水(53∶47)为流动相;检测波长为266 nm。

对照品溶液的制备:精密称定次野鸢尾黄素对照品适量,制成每1 ml 含100μg 的次野鸢尾黄素溶液。

供试品溶液的制备:取12份样品各10 ml,分别加入甲醇15 ml,称定重量,超声处理30 min,取出,放冷,再称定重量,用60%甲醇补足减失重量,过滤,各收集续滤液10 ml,即得。

线性关系考察:精密吸取0.099 mg/ml 次野鸢尾黄素对照品溶液1、2、5、8、10、12μl,进样,按上述色谱条件测定峰面积值,以峰面积均值( Y)为纵坐标,进样量(X)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程 Y=2636.29X-3.62, r=0.9999。

结果表明次野鸢尾黄素进样量在0.099~1.188μg 范围内呈良好的线性[4-5],见图5。

野鸢尾黄素含量测定:分别精密吸取次野鸢尾黄素对照品溶液、供试品溶液(样品1∶ 12)及阴性对照溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定结果见表2。

结果表明利咽方使用煎煮法有效成分含量要优于冲泡法。煎煮法中,粉末提取次野鸢尾黄素的含量优于饮片提取。次野鸢尾黄素的含量为粉末煎煮组>饮片煎煮组>粉末冲泡组>饮片冲泡组;粉末冲泡1 h ≈粉末冲泡1.5 h ≈粉末煎煮0.5 h ≈饮片煎煮0.5 h。

3讨论

参照《中华人民共和国药典》药材射干项下次野鸢尾黄素的含量测定方法,流动相为甲醇∶0.2%磷酸溶液(53∶47)[6],考虑到磷酸为难挥发性酸,会降低高效液相色谱仪及色谱柱的使用寿命,因此本实验维持原流动相配比,对两种流动相甲醇∶0.1%甲酸溶液与甲醇∶水溶液的样品色谱峰进行比较分析,发现这两种流动相的样品色谱峰峰型接近,分离效果均理想,因此最终确定流动相为甲醇∶水溶液(53∶47)。

袋泡茶样品的制备参考文献[7],使用沸水冲泡。介于条件原因,未能将多次冲泡列入试验项目,是本课题的不足。实际生活中,袋泡茶是会多次冲泡服用的,以正常人喝茶为例,一份茶叶也会反复加开水3~4次,所以添水也是值得之后研究代茶饮需要考虑的项目之一。就本实验结果来看,煎煮法在制作中药制剂是普遍优于茶饮法的,考虑到不同的药材水提效果不一,有条件建议选择煎煮法服药,尽管煎煮法优于袋泡茶法,在实际运用时,袋泡茶仍能起到较好效果[8]。中药茶饮在治疗咽喉疾病方面有着独特的疗效,中药茶饮相比中药合剂,在味道和服用方法上占据明显的优势,这可以弥补其他口服类中药制剂的不足,甚至有助于患者服用其他药物,因此中药茶饮仍值得研究发展和推广。茶饮法在呼吸道和口腔疾病的防治上有独特的优势,这在咽部疾病的防治中值得探究[9-15]。

[参考文献]

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(收稿日期:2021-09-23)

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